BD BACTECTMFX200全自动血培养仪的性能评价

2021-09-21郭丽娜

医学食疗与健康 2021年13期

【摘要】目的：对BD BACTECTM FX200全自动血培养仪进行性能评价。方法：选用24株临床已分离菌株及标准菌株进行检测，评价仪器的准确性，采用转种平板的方法，回顾性分析2019年6月至12月968份血培养的结果，分析阳性率、阳性检出时间、检出菌种类、假阳性率及假阴性率等的性能评价指标。结果：在模拟20份树脂需氧瓶中，19份在72h内报阳，阳性检出率为95%。在模拟20份溶血素厌氧瓶和树脂儿童瓶中在72h内全部报阳，阳性检出率为100%。报阳转种的病原菌经Phoenix 100鉴定后，与已知病原菌一样，准确性为100%。968份临床血培养标本，120份阳性，阳性率12.4%，最快阳性报警时间2h，假阴性率0.47%，假阳性率为4.0%。结论：FX200血培养仪操作简便，检测速度快，准确性高，既提高血培养阳性率，又缩短报阳时间。

【关键词】BD BACTECTM FX 200；全自动血培养仪；病原菌；性能评价

[中图分类号]R446 [文献标识码]A [文章编号]2096-5249（2021）13-0144-02

BD BACTECTM FX 200为微生物快速培养系统，可对菌血症患者血液里的病原菌进行快速灵敏检测，同时也可检测体内无菌部位标本。能为临床更快提供检验结果，便于临床诊断治疗及用药[1]，现根据CNAS-GL028文件要求，对该血培养仪进行性能评价，结果如下。

1 材料与方法

1.1菌株来源我院自2019年1月至6月在血培养阳性标本中分离的21株病原菌，经过Phoenix 100鉴定且经microTyper MS质谱仪分析确认。分别为肺炎链球菌、流感嗜血杆菌、热带假丝酵母菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、屎肠球菌、粪肠球菌、肺炎克雷伯菌、无乳链球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、阴沟肠杆菌、产酸克雷伯菌、粘质沙雷菌、奇异变形杆菌、化脓链球菌、藤黄微球菌、表皮葡萄球菌、卡他莫拉菌、产气荚膜梭菌。还有3株病原菌为标准菌株大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌，标准菌株购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。

1.2临床标本我院自2019年6月至12月经BD BACTECTMFX200检测的血培养标本共计968份。

1.3仪器与试剂 BD BACTECTM FX 200、树脂需氧瓶、溶血素厌氧瓶、树脂儿童瓶、Phoenix 100鉴定系统、microTyper MS质谱仪、BD革兰氏阴性细菌鉴定/药敏板、BD革兰氏阳性细菌鉴定/药敏板、PhoenixTM酵母菌鉴定板。

1.3方法 ①准确性评价：先配置麦氏0.5菌悬液，9.9 mL生理盐水加0.1 mL菌悬液稀释两次，9.8 mL生理盐水加0.2 mL菌悬液一次，稀释三遍后相当于菌悬液浓度为300 CFU/mL，加100uL稀释后的菌悬液至3 mL无菌血液中即制备成接种至树脂需氧瓶或含溶血素厌氧瓶的模拟标本（菌量为10 CFU/瓶），加100uL稀释后的菌悬液至1 mL无菌血液中即制备成接种至树脂儿童瓶的模拟标本（菌量为30CFU/瓶）。另取100uL生理盐水加入需要量无菌血液中，作为阴性对照。将制备好的模拟标本打入相应培养瓶中，按操作步骤放置血培养仪中，并记录报阳时间，吸取报阳瓶中的培养液转种于血平板、沙保罗、巧克力平板，放在5%CO2培养箱中培养18～24h，过夜培养的菌株用Phoenix 100进行鉴定。后续经microTyper MS质谱仪分析确认，比较不同病原菌在相同浓度时仪器报阳时间的差别及鉴定结果与已知菌株的一致性。②性能指标评价：按照血培养仪的標准规程培养临床血标本，并转种至血平板、沙保罗、巧克力平板进行培养及鉴定，根据鉴定结果对仪器的阳性率、阳性检出时间、检出菌种类、假阳性率及假阴性率进行评价。

2 结果

2.1培养分离菌株树脂需氧瓶中，除藤黄微球菌未报阳性，其余19份均在72h内报阳，阳性检出率95%。鉴定结果与已知菌株一致，准确性100%。在溶血素厌氧瓶和树脂儿童瓶中，20份模拟样本72h内均报阳，阳性检出率100%，培养分离菌株鉴定结果与已知菌株一致，准确性100%。

2.2检出菌种类分布及构成比 968份临床血标本中，120份阳性标本，阳性率12.4%，其中革兰氏阴性菌占58.3%、革兰氏阳性菌占35.8%、酵母菌占5.8%，大肠埃希菌阳性报警时间最快（2h），假阴性率0.47%，假阳性率4.0%（见表1），检出菌种类分布及构成比见表2。

3 讨论

血流感染是医院常见严重的感染性疾病，有相关文献报道：革兰氏阴性菌造成的血流感染多于革兰氏阳性菌造成的血流感染[2-3]，与本文检出的病原菌分类一致。

本实验模拟的20份血培养标本中，溶血厌氧瓶在72h内报阳率100%，报阳平均时间13时52分。除了产气荚膜梭菌为专性厌氧菌外，其余19株病原菌均为兼性厌氧菌，说明厌氧瓶兼具检出专性厌氧菌和兼性厌氧菌的能力。溶血厌氧瓶与树脂需氧瓶所选用的病原菌有16株一样的，在相同浓度、病原菌情况下，除肺炎链球菌和卡他莫拉菌外，其余14株厌氧培养报阳时间均早于树脂需氧培养，与文献中提到双瓶均报阳，厌氧瓶报阳时间早于需氧瓶的报道一致[4]，究其原因，我认为可能是厌氧培养瓶中营养成分比需氧培养瓶好，有些兼性厌氧菌仅在厌氧培养瓶中生长。因此建议临床对疑似血流感染患者抽取血培养时，要采集双瓶双侧，分别做需氧和厌氧培养。

在968份临床标本中，报阳时间最快的是大肠埃希菌，因为此菌属于肠杆菌科，兼性厌氧菌，在普通琼脂平板即可生长，发酵葡萄糖产酸产气，这与BD血培养仪检测原理一致。本文中仪器假阳性率为4.0%，可能原因有：①抽血量过多；②厌氧菌及苛养菌的存在，没有选择适合的培养方式及平板；③室温高于28℃；④培养箱电压及温度不稳定。将经血培养仪培养5 d报阴性的瓶子取出，转种于血平板、沙保罗及巧克力平板，发现4份血培养标本为假阴性，假阴性率为0.47%，3份真菌，1份奴卡菌。产生原因：①血液标本采集后，放在室温时间过长；②血液采集量不足，儿童少于1 mL，成人少于3 mL，产生的CO2量不足以激发荧光系统而造成假阴性；③采集标本时刚刚或正在使用抗生素；④未抓住采集合适时机；⑤消毒酒精未完全挥发时进行标本采集。因此，血培养瓶经仪器培养5 d后报阴时，应转种血平板、沙保罗、巧克力平板，以确认是否为真阴性。