余汪平 郭冬梅 孔庆龙 朱卓 李桦军 游燕

摘 要：目的：考察三七蜜片对大鼠辅助降血脂及体内抗氧化功效的作用。方法：参照保健食品辅助降血脂及抗氧化功能评价方法，选用健康大鼠进行混合型高脂血症以及乙醇致大鼠氧化损伤模型构建，给药30 d后分别对血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C以及肝脏GSH、MDA、蛋白质羰基和 SOD活力进行检测。根据保健食品评价技术规范进行最终结果判定。结果：三七蜜片样品对混合型高血脂大鼠的血脂具有一定的降低作用;对于血脂升高相對较低的大鼠高胆固醇血症模型，三七蜜片样品对该模型大鼠血清中的TC、LDL-C具有显著的降低作用，对TG无明显降低作用;三七蜜片低、中、高剂量均能明显提升模型大鼠肝脏GSH含量，中、高剂量均能明显降低模型大鼠肝脏 MDA含量，低、中、高剂量均无明显降低模型大鼠肝脏蛋白质羰基含量，提升 SOD 活力的作用。结论：在本实验剂量条件下三七蜜片具有一定辅助降血脂及抗氧化功效。

关键词：三七蜜片;高脂血症;降血脂;抗氧化;大鼠;模型

研究表明，三七皂苷有一定的抗脂质过氧化作用[1]，对心脑血管疾病有良好的预防和治疗作用[2]。国内外都在积极探索调节血脂作用的生物资源，而中药及中药制剂在这些方面具有良好的发展空间[3]。大量研究表明，三七除具有活血补血作用外，还具有改善心肌缺血、抗心律失常、降血脂[4]、降血压、抗炎等作用[5-6]。本文结合中药记载及现在医学研究，将三七按照饮片相关工艺结合保健食品相关技术规范[7-8]，制成三七蜜片保健食品，探讨三七蜜片在大鼠血脂和抗氧化两个水平的影响，为三七类保健食品开发提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

豹七三七，云南白药中药资源有限公司;油菜蜂蜜，云南白药中药资源有限公司;总胆固醇（TC）试剂盒，南京建成生物工程研究所;三酰甘油（TG）试剂盒，南京建成生物工程研究所;低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）试剂盒，南京建成生物工程研究所;高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）试剂盒，南京建成生物工程研究所;SOD试剂盒，南京建成生物工程研究所;丙二醛（MDA）试剂盒，南京建成生物工程研究所;GSH试剂盒，南京建成生物工程研究所;蛋白质羰基试剂盒，南京建成生物工程研究所;考马斯亮蓝试剂盒，南京建成生物工程研究所;无水乙醇，国药集团化学试剂厂;冰醋酸，国药集团化学试剂厂;乙酸乙酯，国药集团化学试剂厂;SPF级健康雄性SD大鼠[（200±20）g]：广东省医学实验动物中心;实验动物使用许可证号：SYXK（滇）2017—0004，发证单位：昆明市科技局。

1.2 仪器与设备

PL-203型电子天平，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司;JJ2000型电子天平，美国双杰兄弟（集团）有限公司常熟市双杰测试仪器厂;一次性 20 μL 微量采血吸管，姜堰市健华医疗器械有限公司;3K15 型高速冷冻离心机，Sigma公司;Multiskan Go型全波长酶标仪，美国 Thermo公司;GZX-9240MBE电热鼓风干燥箱，上海博讯医疗设备厂;组织匀浆机，南京马内里仪器有限公司。

1.3 实验方法

1.3.1 辅助降血脂方法[9-10] 雄性SD大鼠87 只，取SD大鼠（12 只）作为空白对照组，给予普通饲料。75 只给予高脂饲料（配方：20.0%蔗糖、15%猪油、1.2%胆固醇、0.2%胆酸钠，余为维持饲料）作为造模组。造模组给予高脂饲料 2 周后，空白对照组和造模组的大鼠不禁食采血（眼内眦），采血后分离血清，按试剂盒方法测定血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C 水平[11-12]。初步设计三七样品为1.00 g/kg，即人临床日服用 6 g/d的 10 倍量算;三七蜜片（包含水分）为低剂量 1.32 g/kg、中剂量 2.64 g/kg、高剂量 5.28 g/kg。根据TC水平将造模成功的大鼠随机分成 5 组，每组 15 只，分别为模型对照组、豹七三七组（1.00 g/kg）、三七蜜片低剂量组（1.32 g/kg）、中剂量组（2.64 g/kg）、高剂量组（5.28 g/kg）。每日按 1.0 mL/100 g灌胃给予受试样品给药1次，空白对照组和模型对照组同时给予同体积的相应溶剂，连续给药 30 d。各组动物间隔 3 d称重 1 次，调整给药剂量。空白对照组给予普通饲料，各给药组及模型对照组给予高脂饲料[13]。

1.3.2 抗氧化实验方法[14-16] 选用雄性SD鼠 60 只，按体重随机分为空白对照组、模型对照组、三七蜜片低剂量组、三七蜜片中剂量组、三七蜜片高剂量组，每组 12 只。每周称量体重1次。除空白对照组和模型对照组大鼠灌胃给予等容量纯水外，其余各组每天按剂量灌胃给予对应样品1次，连续 30 d，给药容积为 10 mL/kg。末次给药后，除空白对照组外，其余各组禁食 16 h（过夜），然后 1 次性灌胃给予 50%乙醇 12 mL/kg BW，6 h后腹主动脉采血，取肝脏。全血 4 ℃静置 3 h后使用离心机制备血清（3 500 r/min）。在肝脏相同位置处称取约 0.5 g 肝脏组织，加定量生理盐水，冰浴条件下用匀浆机匀浆（2 000 r/min），制备 10%匀浆液[17-19]。参照试剂盒说明书测定血清和肝组织中GSH含量、MDA含量、蛋白质羰基含量和 SOD活力。

1.3.3 三七蜜片研制 选用云南白药中药资源有限公司提供的豹七三七冻干片为原料，经过初筛厚度在1.5～2.5 mm、截面宽度3～5 mm 作为三七蜜片制备材料。先用50%油菜蜂蜜水浸泡30～60 min至三七冻干片吸水均匀，之后选用相同浓度油菜蜂蜜水按照三七冻干片∶油菜蜂蜜水=1∶10比例进行熬煮、浓缩。用折光仪及密度计进行浓缩液比重测试，浓缩至比重为1.2停止加热熬煮。过夜12 h浸泡后捞出三七片，50 ℃条件热风烘干2 h后30 ℃吹干，即得实验用三七蜜片样品。

2 结果与分析

2.1 三七蜜片对混合高脂血症大鼠血脂的影响

如表1所示，与空白对照组比较，模型对照组的鼠血清TC、TG、LDL-C的含量均显著升高（P<0.01）。与模型对照组比较，豹七三七组大鼠血清 TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量均无明显影响作用（P>0.05）。与模型对照组比较，三七蜜片低剂量组的大鼠血清中TC、TG、LDL-C、HDL-C的含量均無明显影响作用（P>0.05）;三七蜜片中剂量组的LDL-C、高剂量组的TC、LDL-C含量有不同程度的降低，具有统计学差异（P<0.01、P<0.05、P<0.05）。

2.2 三七蜜片对大鼠抗氧化功效的影响

表2表明，与空白对照组比较，模型组大鼠肝脏GSH含量显著降低（P<0.001）、MDA含量显著升高（P<0.001）、蛋白质羰基含量显著升高（P<0.05）、SOD 活力显著降低（P<0.05），表明造模成功。与模型对照组比较，三七蜜片低、中、高剂量组大鼠肝脏GSH含量显著升高（P<0.05、P<0.001、P<0.001），中、高剂量组大鼠肝脏MDA含量显著降低（P<0.01、P<0.01），低、中、高剂量组大鼠肝脏蛋白质羰基含量无明显变化，低、中剂量组大鼠肝脏SOD活力明显降低（P<0.01、P<0.05）。

3 结论与讨论

辅助降血脂实验结果表明，三七蜜片样品对混合型高血脂大鼠的血脂具有一定的降低作用;对于血脂升高相对较低的大鼠高胆固醇血症模型，三七蜜片样品对该模型大鼠血清中的TC、LDL-C具有显著的降低作用，对TG无明显降低作用。三七蜜片低、中、高剂量均能明显提升模型大鼠肝脏GSH含量，中、高剂量均能明显降低模型大鼠肝脏 MDA含量，低、中、高剂量均无明显降低模型大鼠肝脏蛋白质羰基含量，提升 SOD 活力的作用。

综合功效实验结果表明，单纯的三七蜜片在辅助降血脂以及抗氧化功能方面有一定的功效作用，但整体作用效果按照保健食品评判标准均未达到要求，分析可能一是由于处方单一，按照中医君臣佐使理论，应该进行复方设计，协同增强抗氧化功效以及辅助降血脂功效[20-21];二是可能由于单方产品实验剂量未达到药理功能评价剂量，后续可进行提高实验剂量以及试验周期进行考察验证[22-23];三是可能由于在三七蜜片制备过程中工艺对三七有效成分损失较大，后期可对产品工艺进行改进。◇

参考文献

[1]董婧婧，刘艳菊，涂济源，等.三七粉调血脂作用及机制研究[J].中草药，2017，48（8）：1597-1603.

[2]潘丽华，袁瑾，丁伟，等.生三七粉降低血浆凝血因子I[J].中国新药与临床杂志，2000（4）：331-332.

[3]张海燕.中药三七治疗心血管疾病的临床分析[J].中西医结合心血管病电子杂志，2016，4（11）：68-69.

[4]贺小琼，张丽芬，陈平，等.三七提取物防治大鼠高脂血症作用研究[J].云南中医中药杂志，2004（1）：32-33.

[5]谢珍，刘璐，何立成，等.三七复方制剂对高脂血症大鼠血脂、血凝及抗氧化功能的影响[J].中医药导报，2018，24（10）：85-87.

[6]官兵，韦旭斌，刘国光，等.三七总皂苷减少高脂血症兔动脉壁损害作用的实验研究[J].昆明医科大学学报，2014，35（6）：29-32、50.

[7]梁坚，李彬，何为涛，等.三七口服液调脂作用的研究[J].中国临床保健杂志，2006（5）：465-466.

[8]张嘉麟，徐文安，杨荫康，等.三七中人参皂甙对老年鼠血浆脂质及其代谢产物含量的影响[J].昆明医学院学报，2001（1）：45-46、52.

[9]张翼冠，李晓辉，樊继山，等.三七总皂苷通过抗炎和调血脂作用抑制大鼠动脉粥样硬化形成[J].现代生物医学进展，2007（11）：1601-1603、1607.

[10]陈永斌，董玉华.三七总皂苷治疗高脂血症的临床效果及药理作用分析[J].中国医药科学，2016，6（1）：51-53、139.

[11]吕萍，陈海峰.三七叶苷降脂作用的实验研究[J].中国生化药物杂志，2004（4）：235-236.

[12]康金科，高春江，马克强，等.三七总皂苷对肥胖小鼠代谢紊乱及脂肪组织炎性因子表达的改善作用[J].重庆医科大学学报，2012，37（11）：949-953.

[13]高其若，耿志强.中医运用三七治疗高脂血症的临床观察[J].上海医药，2018，39（11）：23-24、34.

[14]罗颂武，张旭红.加压提取三七总皂苷体外抗氧化活性成分研究[J].江西中医药，2014，45（4）：62-63.

[15]胡军霞，海春旭，梁欣.三七醇提物对大鼠肝组织体内外抗氧化作用的研究[J].癌变·畸变·突变，2011，23（3）：171-175、180.

[16]何积源，吴延佳.三七对高脂血症大鼠抗氧化作用的影响[J].大众科技，2007（3）：150.

[17]王莹，禇扬，李伟，等.三七中皂苷成分及其药理作用的研究进展[J].中草药，2015，46（9）：1381-1392.

[18]黎江华，李涛，黄永亮，等.熟三七多糖的结构分析及抗氧化活性研究[J].中华中医药学刊，2018，36（6）：1380-1383.

[19]黄积武，李创军，杨敬芝，等.三七叶的化学成分及其抗氧化活性研究[J].中草药，2017，48（21）：4381-4386.

[20]黃上峰，陆飞燕，黄元河，等.三七多糖抗氧化活性研究[J].微量元素与健康研究，2018，35（1）：30-32.

[21]杨琳，林万程，施家乐.三七总皂苷药理作用的研究进展[J].安徽医药，2014，18（5）：963-965.

[22]李彦彬，邓秀婷，罗姮，等.中药三七与桑葚抗氧化作用的对比研究[J].现代中西医结合杂志，2014，23（8）：822-823.

[23]王俊，康淑荷.三七与天麻复配提取液体外抗氧化作用[J].西北民族大学学报（自然科学版），2019，40（1）：69-73.

Effect of Panax Notoginseng Honey Tablet on Lowering Blood Lipid and Anti-oxidation

YU Wang-ping，GUO Dong-mei，KONG Qing-long，ZHU Zhuo，LI Hua-jun，YOU Yan

（Yunnan Institute of MateriaMedica/Yunnan Bai Yao Group Innovation and R&D Center/3Yunnan Province Company Key Laboratory for TCM and Ethnic Drug of New Drug Creation，Kunming 650111，China）

Abstract：Objective To investigate the effect of panax notoginseng honey tablet on helping to reduce blood lipid and antioxidation in rats.Method With reference to the evaluation methods of health-food-assisted lowering blood lipid and antioxidant functions，healthy rats were selected for the establishment of a model of mixed hyperlipidemia and ethanol induced oxidative damage in rats.The activity of serum TC，TG，LDL-C and HDL-C as well as liver GSH，MDA，protein carbonyl and SOD were detected 30 days after administration.According to the health food evaluation technical specifications to determine the final results.Result The samples of panax notoginseng honey tablets had a certain effect on the reduction of blood lipid in mixed hyperlipidemia rats.As for the rat hypercholesterolemia model with relatively low increase of blood lipid，panax notoginseng tablet had significant effect on reducing TC and LDL-C in the serum of the model rats，but no significant effect on TG.The low，medium and high doses of panax notoginseng honey tablets could significantly increase the content of GSH in the liver of the model rats，while the high and medium doses could significantly reduce the content of MDA in the liver of the model rats，while the low，medium and high doses could not significantly reduce the content of carbonyl protein in the liver of the model rats and increase the activity of SOD.Conclusion In this experiment，panax notoginseng honey tablet has certain auxiliary effect of lowering blood lipid and anti-oxidation.

Keywords：panax notoginseng honey table;hyperlipidemia;lowering blood lipid;anti-oxidation;rat;model