冯丹萍 范敏

【摘 要】 目的：研究榛叶荚蒾的化学成分。方法：采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20、HPLC对榛叶荚蒾甲醇提取物进行分离纯化，根据波谱数据鉴定所得化合物的结构。 结果：从中分离得到8个已知化合物，分别鉴定为α-芒柄花醇（1），sitostane-3β-5α-6β-triol （2），山奈酚3-O-β-D-葡萄糖苷（3），槲皮素-3-O-鼠李糖苷（4），berchemol （5），（9E，11Z）-13-oxo-9，11-octadecadienoic acid （6），没食子酸甲酯（7），丹皮酚（8）。结论：化合物6～8为首次从榛叶荚蒾中分离得到。

【关键词】 榛叶荚蒾;化学成分;分离鉴定

【中图分类号】R284.2 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2021）14-0047-04

Abstract：Objective To study the chemical constituents of Viburnum corylifolium J. D. Hooker et Thomson. Methods The methanol extract from C. tinctorius was isolated and purified by silica gel， ODS， Sephadex LH-20 and HPLC. The structures of the obtained compounds were identified based on spectral data. Results Eight compounds were isolated and identified as α-onocerin （1）， sitostane-3β-5α-6β-triol （2）， 3-O-β-D-glucopyranosylkaempferol （3）， quercetin-3-O-rhamnoside （4）， berchemol （5）， （9E，11Z）-13-oxo-9，11-octadecadienoic acid （6）， methylgallate （7）， paeonol （8）. Conclusion Compounds 6-8 were isolated from V. corylifolium for the first time.

Keywords：Viburnum corylifolium; Chemical Composition; Separation and Identification

莢蒾属（Viburnum）为忍冬科（Caprifoliaceae）一大属，全球约有200种，包括灌木和乔木，主要分布于北半球温带和亚热带地区。我国共有74种，广泛分布于全国各省区，以西南部种类最多。该属多种植物在民间作为传统药物使用，用于咳嗽、痢疾、风湿性关节炎、类风湿性关节炎以及肿胀等多种疾病的治疗[1]。《全国中草药汇编》中记载，荚蒾属植物有祛风清热、祛瘀消肿、散瘀活血之功效。已有研究[2]表明该属植物中的化学成分类型多样，富含二萜类、三萜类、环烯醚萜类、单萜类、倍半萜类、黄酮类和木脂素类等成分，其中多个化合物具有良好的抗肿瘤和抗氧化活性，尤其vibsanin型的二萜具有良好的抗肿瘤活性[3]。基于此，近年来荚蒾属植物多样的药理活性及其独特的化学成分引起科研工作者的密切关注。榛叶荚蒾Viburnum corylifolium J. D. Hooker et Thomson为落叶灌木，分布于四川、广西东北部、贵州、湖北西部、陕西南部及印度东北部等地[4]。国内外对该植物化学成分的研究报道较少，截止目前，仅本课题组前期从中发现了6个化合物[5]。为进一步探索榛叶荚蒾的化学成分，以便为利用该植物资源提供物质基础指导，本课题组对其甲醇提取物进行了系统研究，共分离鉴定出8个化合物，包括2个三萜、2个黄酮及3个酚酸类化合物。

1 仪器和材料

1D和2DNMR在Bruker AM-400，DRX-500及Bruker Avance III 600核磁共振仪上测定，TMS作为内标，δ为ppm， J为Hz。拌样及柱层析用硅胶（100～200，200～300 目），为青岛海洋化工厂生产;反相填充材料RP-18为40～60 μm， Merk公司生产;MCI填充材料为MCI-gel CHP-20P;MPLC 采用EZ Purifier System 液相色谱仪（pump manager P03， detector modules P02， and fraction collector P01）。HPLC分析仪器为安捷伦1200型高效液相色谱仪，谱柱为Agilent 公司的Zorbax SB-C18 column （5 μm， 10 mm × 250 mm）。半制备色谱柱为Agilent 公司的Zorbax SB-C18， 9.4 mm × 25 cm column。显色剂为7%浓硫酸的乙醇溶液，喷洒后适当加热。

榛叶荚蒾V.corylifolium J. D. Hooker et Thomson地上部分于2017年6月采自云南省文山州，并由中国科学院昆明植物所成晓研究员鉴定。植物标本存放于大理大学生药学教研室。

2 提取与分离

干燥的榛叶荚蒾地上部分7.5 kg，粉碎后用甲醇在室温下冷浸提取三次，每次24 h，合并提取液，减压蒸馏除去有机溶剂后得粗提物，将该粗提物分配于水中，用乙酸乙酯萃取三次，得188 g浸膏。此浸膏经MPLC（MCI gel）柱层析分离，采用甲醇-水（10%→100%）系统进行梯度洗脱，减压浓缩后得到5个馏分纯化，得到化合物1（26 mg）和5（16 mg）。馏分II经过多次正相硅胶柱层析、半制备高压液相、以及Sephadex LH-20（纯甲醇）分离得化合物3（3 mg），4（58mg）和6（6 mg）。馏分III经过反复正硅胶柱层析及Sephadex LH-20（氯仿/甲醇，1∶1）分离得到化合物2（18 mg），7（7 mg）和8（2 mg）。

3 结构鉴定

化合物1： 无色晶体，分子式C30H50O2，ESI-MS m/z： 465[M+Na]+。1H NMR （400 MHz， CDCl3）： δH 4.77 （1H， s， H-26a）， 4.50 （1H， s， H-26b）， 3.16 （1H， m， H-3）， 0.92 （3H， s， Me-23）， 0.69 （3H， s， Me-24）， 0.58 （3H， s， Me-24）;13C NMR （100 MHz， CDCl3）： δC 36.8 （t， C-1/C-20）， 27.1 （t， C-2/C-19）， 78.2 （d， C-3/C-21）， 38.9 （s， C-4/C-22）， 57.1 （d， C-5/C-17）， 22.1 （C-6/C-16）， 38.7 （t， C-7/C-15）， 148.2 （s， C-8/C-14）， 54.5 （d， C-9/C-13）， 38.9 （s， C-10/C-18）， 23.7 （t， C-11/C-12）， 27.8 （q， Me-23/Me-30）， 15.0 （q， Me-24/Me-29）， 14.1 （q， M-25/Me-28）， 106.2 （d， C-26/ C-27）。以上数据与文献[6]一致，鉴定该化合物为α-芒柄花醇。

化合物2： 白色无定形粉末，分子式C29H52O3，ESI-MS m/z： 449[M+H]+。1H NMR （400 MHz， CDCl3）： δH 4.03 （1H， m， H-3a）， 3.30 （s， H-6a）， 1.01 （3H， s， Me-19）， 0.87 （3H， d，J= 6.5 Hz， Me-21）， 0.82 （3H， d，J= 6.9， Me-27）， 0.80 （3H， t，J= 7.1， 7.1 Hz， Me-24）， 0.78 （3H， d，J= 6.9， 26-Me）， 0.59 （3H， s， Me-18）;13C NMR （100 MHz， CDCl3）： δC 36.0 （t， C-1）， 30.2 （t， C-2）， 67.1 （d， C-3）， 24.0 （t， C-4）， 75.7 （s， C-5）， 75.3 （d， C-6）， 25.8 （t， C-7）， 45.3 （d， C-8）， 55.9 （d， C-9）， 37.8 （s， C-10）， 28.8 （t， C-11）， 39.9 （t， C-12）， 42.4 （s， C-13）， 56.0 （d， C-14）， 30.2 （t， C-15）， 32.1 （t， C-16）， 45.7 （d， C-17）， 11.9 （q， C-18）， 19.6 （q， C-19）， 28.3 （d， C-20）， 18.8 （q， C-21）， 33.5 （t， C-22）， 34.6 （t， C-23）， 39.9 （d， C-24）， 21.0 （t， C-25）， 11.8 （q， C-26）， 22.8 （d， C-27）， 16.4 （q， C-28）， 18.5 （q， C-29）。以上數据与文献[7]一致，鉴定该化合物为sitostane-3β-5α-6β-triol。

化合物3： 黄色无定形粉末，分子式C21H20O11，ESI-MS m/z： 471[M+Na]+。1H NMR （500 MHz， C5D5N）： δH 13.3 （1H， s， HO-5）， 8.43 （2H， d，J= 8.6 Hz， H-2′/H-6′）， 6.70 （2H， br s， H-3′/H-5′）， 6.37 （1H， d，J= 3.0 Hz， H-6）， 5.77 （m， H-1 glc）;13C NMR （125 MHz， C5D5N）： δC 157.5 （s， C-2）， 135.5 （s， C-3）， 178.8（s， C-4）， 105.3 （s， C-4a）， 162.9 （s， C-5）， 99.9 （d， C-6）， 166.0 （s， C-7）， 94.7 （d， C-8）， 157.6 （s， C-8a）， 122.0 （s， C-1′）， 131.9 （d， C-2′/C-6′）， 116.1 （d， C-3′/5′）， 161.7 （s， C-4'）， 104.2 （d， C-1 glc）， 76.2 （d， C-2 glc）， 78.6 （d， C-3 glc）， 71.6 （d， C-4 glc）， 79.0 （d， C-5 glc）， 62.8 （t， C-6 glc）。以上数据与文献[8]一致，鉴定该化合物为山奈酚3-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物4： 黄色无定形粉末，分子式C21H20O11，ESI-MS m/z： 471[M+Na]+。1H NMR （400 MHz， C5D5N）： δH 13.3 （1H， s， H-5）， 5.46 （1H， s， aromatic proton）， 1.45 （d， J = 5.6 Hz， Me-6′）;13C NMR （100 MHz， C5D5N）： δC 157.8 （s， C-2）， 135.3 （s， C-3）， 179.2 （s， C-4）， 105.5 （s， C-4a）， 163.0 （s， C-5）， 99.8 （d， C-6）， 165.9 （s， C-7）， 94.7 （d， C-8）， 158.3 （s， C-8a）， 117.2 （s， C-1′）， 116.2 （d， C-2′）， 147.4 （s， C-3′）， 150.7 （s， C-4′）， 116.6 （d， C-5′）， 122.4 （d， C-6′） 100.0 （d， C-1 rha）， 72.3 （d， C-2 rha）， 72.7 （d， C-3 rha）， 73.5 （d， C-4 rha）， 72.2 （d， C-5 rha）， 18.5 （q， C-6 rha）。以上数据与文献[9]一致，鉴定该化合物为槲皮素-3-O-鼠李糖苷。

化合物5： 无色油状物，分子式 C20H24O7，ESI-MS m/z： 399[M+Na]+。1H NMR （400 MHz， CDCl3）： δH 6.97 （1H， d， J = 3.2 Hz， H-2）， 6.83 （2H， d， J = 7.9 Hz， H-6）， 6.67 （1H， d， J = 8.1 Hz， H-6′）， 4.73 （1H， s， H-7）， 3.90 （2H， d， J = 10.1 Hz， H-9）;13C NMR （125 MHz， CDCl3）： δC 129.5 （s， C-1）， 108.0 （d， C-2）， 146.8 （s， C-3）， 145.6 （s， C-4）， 114.4 （d， C-5）， 118.4 （d， C-6）， 86.7 （d， C-7）， 80.6 （s， C-8）， 61.9 （t， C-9）， 131.7 （s， C-1′）， 110.9 （d， C-2′）， 146.8 （s， C-3′）， 144.2 （s， C-4′）， 114.8 （d， C-5′）， 121.4 （d， C-6′）， 33.3 （t， C-7′）， 50.2 （d， C-8′）， 70.8 （t， C-9′）。以上数据与文献[10]一致，鉴定该化合物为berchemol。

化合物6： 黄色无定形粉末，分子式C18H30O3，ESI-MS m/z： 295[M+H]+。1H NMR （400 MHz， C5D5N）： δH 7.78 （1H， dd，J = 15.5， 11.4 Hz， H-11）， 6.34 （1H， d，J =15.5 Hz， H-12）， 6.23 （1H， d，J = 11.4 Hz， H-10）， 5.88 （1H， dt，J = 10.8， 7.6 Hz， H-9）， 2.60 （1H， t， 2H， H-8）， 2.50 （1H， m， H-14）， 2.23 （1H， m， H-2）， 1.74 （m， H-17）， 1.64 （m， H-15）， 1.26 （m， 2H， H-4， 5， 6， 7， 16）， 0.78 （t， 3H，J = 6.6， H-18）;13C NMR （100 MHz， C5D5N）： δC 179.8 （s， C-1）， 33.3 （t， C-2）， 25.8 （t， C-3）， 31.7-29.2 （t， C-4，5，6，7，16）， 28.5 （t， C-8）， 142.7 （d， C-9）， 127.5 （d， C-10）， 137.1 （d， C-11）， 130.3 （d， C-12）， 200.4 （s， C-13）， 41.31 （t， C-14）， 24.6 （t， C-15）， 22.8 （t， C-17）， 14.2 （q， C-18）。以上数据与文献[11]一致，鉴定该化合物為（9E，11Z）-13-oxo-9，11-octadecadienoic acid。

化合物7： 白色针晶，分子式C8H8O5，ESI-MS m/z： 207[M+Na]+。1H NMR （600 MHz， C5D5N）： δH 7.22 （2H， s， H-2/H-6）， 3.62 （3H， s， H-Me）;13C NMR （150 MHz， C5D5N）： δC 121.5 （s， C-1）， 110.6 （d， C-2/C-6）， 148.1 （s， C-3/C-5）， 141.6 （s， C-4）， 169.4 （s， C-4a）， 162.9 （s， C=O）， 52.1 （q， C-Me）。以上数据与文献[12]一致，鉴定该化合物为没食子酸甲酯。

化合物8： 白色无定形粉末，分子式 C9H10O3，ESI-MS m/z： 189 [M + Na]+。1H NMR （400 MHz， CD3COCD3）： δH 12.70 （1H， s， H-OH）， 7.62 （1H， d，J = 9.0 Hz， H-6）， 6.45 （1H， dd， J = 9.0， 2.5 Hz， H-5）， 6.40 （1H， d，J = 2.5 Hz， H-3）， 3.83 （3H， s， H-COMe）， 2.55 （3H， s， H-Me）;13C NMR （100 MHz， CD3COCD3）： δC 114.5 （s， C-1）， 166.9 （s， C-2）， 101.3 （d， C-3）， 165.9 （s， C-4）， 107.9 （d， C-5）， 133.5 （d， C-6）， 203.8 （s， C-1′）， 55.9 （d， C-OMe）， 26.2 （q， C-COMe）。以上数据与文献[13]一致，鉴定该化合物为丹皮酚。

4 结论

荚蒾属植物资源丰富，具有显著的抗肿瘤[14]、抗氧化[15]、抗炎[16]、抗菌杀虫[17]、降血糖[18]等生物活性。迄今为止，从该属植物中已报道了140多种化学成分[19]，但目前仅对珊瑚树、欧洲荚蒾、地中海荚蒾、南方荚蒾等少数几种植物的提取物或单体进行了药理作用研究，对榛叶荚蒾的化学成分研究较少，从中分离到的7-deacetyl suspensolide A aglycone具有较好的抗炎活性[5]。因此从榛叶荚蒾中寻找和发现抗炎活性成分，对该植物资源的研究和开发具有重要意义。

本实验从榛叶荚蒾中分离得到8个已知化合物，其中食子酸甲酯（7）和丹皮酚（8）具有较好的抗炎活性[20-21]。进一步文献调研发现，虽然从荚蒾属植物中分离得到的化学成分种类丰富，但仅对其中的少部分成分进行了药理活性研究，为了丰富对荚蒾属的进一步认识，有必要对榛叶荚蒾中分离的化合物进行活性研究，以期为该属植物的开发与利用提供依据。

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（收稿日期：2020-12-17 编辑：程鹏飞）