张立恒，1任德强，1孙 博，1柴 晶2

（1.哈尔滨元亨生物药业有限公司， 黑龙江 哈尔滨150000；2.大连雅立峰生物制药有限公司， 辽宁 大连116620）

试剂盒是具有特异、敏感、快速而且便于操作的检测方式，所以目前在疾病诊断的过程中应用的很多，而且占据相对比较重要的地位。当前国内的兽用体外检测市场上,试剂盒所占的市场份额也比较大，但仍然具有巨大的发展空间。本文主要针对兽用快速诊断技术的概况进行分析，总结相应的实际生产研究经验，供参考。

1 ELISA技术的发展概况

ELISA技术在我国已经应用许多年疾病，并且实际应用过程中衍生出对多类疾病成熟可靠的检测方法，其检测灵敏度及特异性都有提高。全自动酶免分析系统在国内外的检验科被广泛的应用于临床，是免疫检测的主要的基础手段。目前，ELISA技术已被的应用于畜禽疾病的检测中，对动物流行性疾病的检测结果更加的可靠，是比较实用的检测方式。由于酶标分析仪并不是每个兽医从业人员都能接触到,普遍应用于比较大型的动物医院,就是主要是大城市，以及之外各地的农科院校开设的医院有所应用。因此目前在我国还没有受到广泛的普及应用，还有比较大的研究和推广空间。

2 分子生物学检测手段

近年来，随着科学技术的不断发展，许多分子生物学检测方式被开发和引入到动物疾病的检测工作当中。

（1）RFLP、PCR以及PCR衍生技术。PCR-RFLP法主要是对特定酶切位点的有关突变进行检测;而AS-PCR可对等位基因进行引物设计,并且根据PCR产物有无的情况以对基因型进行鉴定。PCR技术与蛋白质免疫技术的结合衍生出新型的免疫PCR基因探针，采用特殊且有共价结合能力的分子,常见的如生物素-亲合素、叶绿素等将蛋白质和核酸进行链接,从而构成具有特异性抗性的抗体基因探针。此种复合型的探针能够诊断对基因的表达产物。但目前该技术仍处于研发的阶段国内外很多实验室都看到了此方法所具的优势,竞相开发此技术的检测手段、自动化设备以及试剂盒。而且市场上已经出现了不少此类试剂盒。

（2）肽核酸技术近年来,肽核酸也被应用在PCR检测中开辟了以PCR技术作为基础的检测的新领域。该项技术能对不同基固为点突变进行检测。所以在检测与SNP相关的位点突变中的运用前景很大。

（3）基因芯片该技术是高通量密集型技术的代表。基因芯片技术在最早称为逆向点杂交技术，该技术正在向精密化和自动化的趋势发展。最近开发的DNA芯片系统，是采用荧光素对DNA片段进行标记,然后应用激光扫描技术来采集杂交结果的荧光信号。通过利用计算机处理荧光信号，对每一点的荧光强度数字化开展具体分析，可提高对样品处理的自动化程度和检测结果的准确性。

而研制出的新一代液相基因芯片技术，具有高通量的特点,而且在敏感性、重复性以及信息的量和精确性方面与传统固相芯片相比都要更高些,在科研开发工作中属于理想的工具,在疾病的检测中同样也是检测核酸、蛋白质最为可靠的工具。而基因芯片技术的优势是对样品的处理能力强大、具有自动化程度高，准确性强。特别是在检测突变型较多的遗传疾病方面，表现出更加便捷、准确且可靠的优点。基因芯片技术在工作原理和对样品处理结果的过程方面比传统检测方法有了很大突破，有较强的样品处理能力，用途也更加广泛，自动化程度更高，所以有很高的商业价值,已经成为分子生物学技术领域的热点。

目前，分子生物学者对基因芯片的研究还在继续发展阶段，而分子生物学应用与畜禽疾病的检测过程中更具有先进性和未来性,虽然分子生物学检测灵敏度方面要强于传统的血清学检测,但是血清学检测方式具有特殊的临床意义，也是分子生物学不能完全替代的。因此，ELISA技术还是具有自身发展空间的。因为应用生物分子学和ELISA技术对疾病开展检测对我国的广大农村养殖地区、发达饲养区的大型养殖场都比较适宜应用，以及国家对野生动物疾病进行监测的过程中也可以很好的应用。