范静静，黄 驰，李林虎

（江苏利民检测技术有限公司，江苏南京 210000）

目前，测定唑虫酰胺含量常用HPLC、GC 等检测。为了了解影响HPLC 法测定唑虫酰胺乳油中唑虫酰胺含量不确定度的主要来源，保障实验室提供的分析数据准确、可靠，需要及时总结与评定分析结果的不确定度。本实验根据《测量不确定度评定与表示》（JJF1059.1—2012）、《化学分析中不确定度的评估指南》等相关文献，对唑虫酰胺乳油中唑虫酰胺含量高效液相色谱法的测定结果的不确定度进行评定[1]。

1 材料与方法

1.1 仪器工作条件

色谱柱Eclipse Plus C18；流动相：（0.1%磷酸溶液∶甲醇=25 ∶75）；流速1.0mL/min；柱温35℃；检测波长230nm；进样量5μL。

1.2 溶液配制

标准溶液：称0.05g 标样于50mL 容量瓶中，甲醇溶解定容，摇匀。移取上述溶液10mL 于50mL 容量瓶中，用甲醇定容。

试样溶液：称含0.05g 的试样于50mL 容量瓶中，甲醇溶解定容，摇匀。移取上述溶液10mL 于50mL 容量瓶中，用甲醇定容，过滤。

1.3 数学模型的建立

用公式（1）进行试样中唑虫酰胺含量的数学模型建立。

式中：

w1——试样中唑虫酰胺质量分数，以%表示；

A2——试样溶液中唑虫酰胺峰面积的平均值；

m1——唑虫酰胺标样的质量，单位为g；

w——标样中唑虫酰胺质量分数，以%表示；

A1——标样溶液中唑虫酰胺峰面积的平均值；

m2——试样的质量，单位为g。

2 结果

2.1 不确定度的来源识别和分析

从测量方法和数学模型可以看出，本实验的不确定度（图1）主要来源为：称量引入的不确定度，标准品引入的不确定度，溶液配制引入的不确定度，仪器测量引入的不确定度。

图1 不确定度来源分析图

2.2 不确定度的分量评定

2.2.1 称量引入不确定度urel(m)

用万分之一电子天平，0～5g 最大允许误差为0.0001g，取均匀分布，天平标准不确定度为：

称试样5 次，则试样称量的标准不确定度：u样品(m)=称标准品1次，则标品称量的标准不确定度：标准品和样品的称量相对不确定度结果见表1。

表1 称量引入的不确定度

天平称量引入的相对标准不确定度：

2.2.2 标准品引入的不确定度urel(标准物质)

查标准物质证书，含量w为99.0%的标准品不确定度为

2.2.3 标准溶液配制引入的不确定度urel(标液配制)

2.2.3.1 母液配制引入不确定度u1,rel(v)

1）玻璃器皿体积定值的准确性引入的不确定度u1(v1)

参见《常用玻璃量器检定规程》，50mL A 级容量瓶的最大容量允差为±0.05mL，不确定度区间的半宽为0.05mL，均匀分布考虑，则引起的标准不确定度0.0289mL。

2）玻璃器皿使用时温度与校准温度不同引入的不确定度u1(v1)

玻璃器皿在20℃下进行校准，实验室温度变化在±5℃，20℃时水的膨胀系数为2.1×10-4/℃，则体积变化为±（50×5×2.1×10-4）=±0.0525mL，所以包含区间半宽度为a=0.0525mL，假设为均匀分布，则标准不确定度为0.0303mL。

2.2.3.2 母液移取定容引入的不确定度u2,rel(v)

1）10mL 移液管由玻璃容器校准引入的不确定度u2(v1)

参见《常用玻璃量器检定规程》，10mL A 级单标线吸量管的允差为±0.020mL，则不确定度区间的半宽为a=0.020mL，可假设为均匀分布则引入的标准不确定度：u2(v1)=

2）10mL 移液管温度变化引入的不确定度u2(v2)

实验室温度变化在±5 ℃，20 ℃时水的膨胀系数为2.1×10-4/℃，则体积变化为±（10×5×2.1×10-4）=±0.0105mL，所以包含区间半宽度为a=0.0105mL，假设为均匀分布则标准不确定度为

3）50mL 容量瓶定容引入的相对标准不确定度u2,rel(v3)

相对标准不确定度：u2,rel(v3)=u1,rel(v)=0.000383。则，u2,rel(v)=

因此标准溶液配制引入的相对标准不确定度：

2.2.4 试样溶液配制引入的不确定度urel(试液配制)

2.2.5 测量引入的不确定度

2.2.5.1 HPLC引入的不确定度urel(HPLC)

由检定证书上可知，HPLC 定量重复性为0.04%，假设其服从均匀分布，则HPLC 的相对标准不确定度为urel(HPLC)=

2.2.5.2 重复性引入的不确定度urel(重复性)

对样品进行5次平行测定，测定数据如表2所示。

表2 唑虫酰胺含量测定的试验数据

由表2可得，唑虫酰胺含量测定的重复性引入的相对标准不确定度为

2.3 相对合成标准不确定度ucrel(w)

取包含因子k=2，置信水平为95%，则扩展不确定度U(x)为：U(x)=k×ucrel(w)=0.80%。

3 结论

1）液相色谱测定15%唑虫酰胺乳油中唑虫酰胺含量的平均值为16.71%，按数学模型计算扩展不确定度为0.80%。不确定度主要来源依次是样品称量、标准物质、溶液制备及测量重复性所引入的不确定度。

2）从各来源的不确定度分量来看，溶液配制引入的相对标准不确定度的贡献最大。影响溶液配制的因素有很多，如实验室环境温度、移液管及容量瓶校准、人员操作等。实际操作中，应严格按分析方法程序操作，控制环境条件，选择精度高的玻璃器具进行定量实验，减少测量不确定度。

3）为保障实验室提供的分析数据准确、可靠，在实验过程中应严格按照方法要求，减少溶液配制过程中引入的不确定度。对唑虫酰胺含量的不确定度评定和分析，有助于更好地开展实验室质量控制，使分析数据更加真实可靠。