王玉燕，昌莉丽，张林吉，迟 兰，丁文卫

(徐州生物工程职业技术学院，江苏 徐州 221006)

中小鸡场以养殖存栏量来定义，一般存栏低于1万只的鸡场可划为小型鸡场，存栏量在1万～10万只的可划归为中等鸡场[1]。当前，虽然规模化、集约化鸡场不断增多，但中小鸡场甚至是存栏数百只、数千只鸡的家庭农场式鸡场仍广泛存在。多数中小鸡场还采用传统养殖模式，养殖设备简陋，地面不做硬化处理，粪便难以进行无害化处理，导致极易发生寄生虫病。球虫病是中小鸡场发生的寄生虫病之一，也是危害养鸡业最严重的寄生虫病之一。该病呈水平传播，对鸡生长和产蛋指标都有较大的影响，降低饲料转化率、产蛋率，死亡率高达80%[2]。

球虫种类较多，不同种类的球虫致病力存在差异，对药物的敏感性也有较大差异，所以鸡球虫病的有效防控应以充分了解该球虫的种类分布及感染情况，有针对性地选用抗球虫药物。本调查采用卵囊形态特征观察与动物回归试验相结合的方法，对15个中小养鸡场的球虫感染情况进行调查，旨在为中小鸡场球虫病的有效防控提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

15日龄公肉雏购自萧县肉鸡孵化场。

1.2 试剂与仪器

重铬酸钾(AR)和氯化钠(AR)均为西陇科学股份有限公司产品。XS-200双目生物显微镜，南京江南永新光学有限公司产品。800低速离心机为江苏天由有限公司产品。

1.3 粪样采集

从徐州市丰县、沛县、铜山区随机选择15个养鸡场(见表1)。采集健康鸡的粪样，从鸡舍四周与中央五个不同位置采集，每份20～50 g，分别装入无菌自封袋，编号，标注鸡日龄、养殖方式、地区及地址等，放入4 ℃冰箱进行保存备检。

1.4 卵囊鉴定

1.4.1 粪样中虫卵检查

用饱和盐水漂浮法[3]检查粪样中的卵囊。显微镜10×10倍下观察，有球虫卵囊，记为+；无球虫卵囊，记为-。每个样品重复检查3次。

1.4.2 卵囊形态观察

收集粪便中的球虫卵囊置于2.5%重铬酸钾溶液中，29 ℃恒温培养箱内培养至球虫卵囊孢子化，取培养后孢子化卵囊液滴加于载玻片，覆盖上盖玻片后在10×10倍和10×40倍下观察卵囊形态。根据卵囊的形态结构和孢子化时间对球虫种类作初步鉴定[4,5]，重复制片观察3次。

1.4.3 动物回归试验

按照周春炎报道的方法[6]进行动物回归试验，每个球虫感染鸡场的卵囊为1个试验组。

试验动物为在无球虫环境中饲养至15日龄的公肉雏，用饱和盐水漂浮法粪检无卵囊。试验全程饲喂不含任何抗球虫药的全价饲料。

2 结果

2.1 球虫感染率与球虫种类

15个鸡场粪便样品中有12个鸡场检出了球虫卵囊，感染率为 80.0%。共检出6个虫种：堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫。各种球虫的比例分别为：堆型艾美耳球虫53.3%(8/15)、巨型艾美耳球虫53.3%(8/15)、缓艾美耳球虫33.3%(5/15)、毒害艾美耳球虫6.7%(1/15)、早熟艾美耳球虫33.3%(5/15)和柔嫩艾美耳球虫66.7%(10/15)。优势虫种为柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫。阳性鸡场球虫均为混合感染，各鸡场检出的球虫情况见表1。

表1 中小型鸡场背景情况与感染鸡球虫种类

2.2 不同日龄鸡群感染的球虫种类及感染情况

不同日龄鸡球虫的情况见表2。15日龄以下、15～65日龄、66日龄以上鸡群中分别有75.0%(3/4)、100.0%(6/6)、80.0%(4/5)的鸡群感染。

表2 不同日龄鸡群的感染球虫感染情况

2.3 不同饲养方式鸡群球虫感染情况

不同饲养方式鸡群的感染球虫情况见表3。88.9%(8/9)的地面平养鸡群感染球虫；33.3%(2/6)的笼养鸡群感染球虫。地面平养鸡群的感染比例显著高于笼养鸡群。

表3 不同养殖方式鸡群的球虫感染情况

2.4 不同品种鸡群感染球虫情况

不同品种鸡场感染球虫情况见表4，采样的6个肉鸡群和3个草鸡群全部感染球虫；66.7%(2/3)的蛋鸡群感染球虫，33.3%(1/3)的种鸡群感染球虫。

表4 不同品种鸡群的球虫感染情况

3 讨论

世界各国记载的鸡球虫种类有13种，我国已发现9个种，公认的致病球虫有7 种：柔嫩艾美耳球虫(Eimeriatenella)、毒害艾美耳球虫(E.necatrix)、巨型艾美耳球虫(E.maxima)、堆型艾美耳球虫(E.acervulina)、布氏艾美耳球虫(E.brunetti)、和缓艾美耳球虫(E.mitis)和早熟艾美耳球虫(E.praecox)[3]。结果提示，中小鸡场流行的鸡球虫种类有6种：堆型艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫。优势虫种为柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫。不同种的球虫，在鸡肠道内寄生部位不一样，其致病力也不相同。柔嫩艾美耳球虫寄生于盲肠，致病力最强；毒害艾美耳球虫寄生于小肠中三分之一段，致病力较强；巨型艾美耳球虫寄生于小肠，以中段为主，有一定的致病作用；堆型艾美耳球虫寄生于十二指肠及小肠前段，有一定的致病作用；布氏艾美耳球虫寄生于小肠后段，盲肠根部，有一定的致病力；和缓艾美耳球虫寄生在小肠前段，致病力较低；早熟艾美耳球虫寄生在小肠前三分之一段，致病力很低，一般无肉眼可见的病变。不同地理区域球虫种类的分布和优势种有所不同[7]，结合文献资料[8-10]分析本次调查。结果发现，致病性强的柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫是中小鸡场流行的优势虫种。

调查结果显示，15个中小鸡场鸡群中，受球虫感染的鸡群占80.0%，且均为混合感染。15日龄以下、15～65日龄、66日龄以上鸡群中分别有75.0%(3/4)、100.0%(6/6)、80.0%(4/5)鸡群感染，说明中小鸡场各年龄段鸡群的带虫感染较为普遍，虽然均为隐性感染，但是遇到适宜的条件极易造成球虫病的爆发。调查结果提示，中小鸡场需采取有效防控措施防患球虫病的爆发。

调查还发现，地面平养鸡群的感染(88.9%)比例高于笼养鸡群(33.3%)；采样的肉鸡群和草鸡群全部有球虫感染；蛋鸡场(66.7%，2/3)有球虫感染，种鸡场比例最低(33.3%，1/3)。中小鸡场肉鸡和草鸡大多为地面平养，地面平养时鸡更容易接触到球虫卵囊，球虫卵囊对外界有很强的抵抗力，一般用于杀菌灭菌的消毒剂对球虫卵囊无效，且鸡球虫卵囊在外界环境中普遍存在，因此球虫感染率较严重。蛋鸡和种鸡多为笼养，笼养鸡与外界环境中球虫卵囊接触的机会较少，球虫感染率较轻。建议中小鸡场改变饲养方式，采用笼养或网上平养，减少鸡与周围环境中球虫的接触，从而降低感染率；在采用地面平养方式时，应对鸡粪、垫料进行无害化处理，如堆积发酵或焚烧，防止环境中球虫卵囊污染饲料、饮水。

4 结论

中小鸡场各日龄段的鸡群带虫感染较为普遍，均为混合感染，致病性强的柔嫩艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫和巨型艾美耳球虫为优势虫种。球虫感染情况与鸡群的饲养方式相关，地面平养鸡群感染球虫的比例显著高于笼养鸡群。