黄迪海 郝文娟 徐怀英 盛晓丹 秦卓明

宠物犬的犬种布鲁氏菌病的诊断和治疗方法探讨

黄迪海①②郝文娟①②徐怀英③盛晓丹①②秦卓明①②③*

①山东省健牧生物药业有限公司 济南 250100 ②济南市动物生物药品工程技术研究中心 济南 ③山东省农业科学院家禽研究所 济南）

布鲁氏菌病(Brucellosis)是由布鲁氏菌属细菌引起的人兽共患的常见传染病。犬种布鲁氏菌(B. canis)是布鲁氏菌属的一个种，其危害程度略低于羊、牛和猪种布鲁氏菌，主要感染犬，也可以感染猪、牛、羊等动物，对人的感染鲜有报道，但国内1980~1996年曾有人感染的案例[1,2,3]，潜在的公共卫生意义较大。

伴随着人民生活水平的提高，城镇家庭饲养宠物犬已十分普遍。但是，在养犬过程中，人们对布鲁氏菌病的危害认知明显不足，众多基层兽医诊疗机构也缺乏布鲁氏菌病相关的诊断，导致该病难以确诊。为正确应对犬种布鲁氏菌病，确保饲养人和宠物犬的健康，防患于未然，特提出如下针对性的处置方案。

1 犬种布鲁氏菌病的确诊

1.1 病犬的临床特征 （1）公犬常表现为附睾炎、阴囊水肿、前列腺炎和睾丸炎，甚至出现精子异常和不孕。母犬常见妊娠期45~55d流产、持续排出棕色至黄色阴道分泌物、早期孕体吸收或产出死胎。（2）椎间盘炎、关节炎、眼内炎、反复发热、乏力等共性特征应引起重视。潜伏期或慢性稳定期的病症不明显。组织学检查可见脾、淋巴结、肝、肾、睾丸等器官形成特征性肉芽肿。

1.2 血清学诊断 采集犬血清，应用犬种布鲁氏菌抗原、标准阳性和阴性血清，或配套试剂盒进行检测。一般先利用虎红平板凝集试验(RBT)、间接酶联免疫吸附试验(iELISA)或竞争酶联免疫吸附试验(cELISA)进行初筛；然后，再应用试管凝集试验(SAT)或补体结合试验等方法进一步确诊。如果出现血清学阳性结果，则怀疑宠物犬发生感染。

1.3 病原鉴定 病原鉴定是犬种布鲁氏菌确诊的“金标准”，可采集病犬的血液、阴道分泌物、精液、关节液、流产胎水等病料，在满足GB 19489的BSL-3级生物安全实验室条件下，进行犬种布鲁氏菌的分离培养、染色镜检、细菌鉴定和Bruce-Ladder PCR检测。

2 犬种布鲁氏菌病的治疗

2.1 急性期 急性期的病犬症状明显，此时布鲁氏菌主要暴露于血液和体液中，各脏器损害较轻，抗生素在体内可直接与病原菌作用；同时，自身机体免疫反应强烈，可协同提高治愈率。本阶段主要依靠敏感抗生素治疗+支持疗法[4,5]，犬的用药方法如下(仅供参考)：（1）方案一：三种药物联合，首选。注射用氨苄西林钠，以氨苄西林计，肌肉或静脉注射，40mg/kg体重，1次/d，连用6周；注射用硫酸链霉素或硫酸双氢链霉素，以链霉素计，肌肉注射：25mg/kg体重，1次/d，连用8周；利福平，口服：8~10mg/kg体重，1次/d，连用10周。利福平用药过程中若出现恶心等消化道副作用，饲喂后分2~3次/d服用。氨苄西林钠可用乳酸环丙沙星注射液替代，肌肉或静脉注射，2~2.5mg/kg·d；利福平可用盐酸多西环素可溶性粉替代，口服，10mg/kg·d。其它注意事项参考药品说明书。（2）方案二：两种药物联合。链霉素/乳酸环丙沙星连用8~10周、利福平连用12周，用药方法同方案一。也可用庆大霉素/卡那霉素/丁胺卡那霉素，肌肉注射，每1kg体重6~10mg，1次/d，连用2周；同时，利福平或盐酸多西环素口服，连用12周，用药方法同方案一。（3）还可采用辅助疗法，如口服复合维生素制剂，提高犬的抵抗力；体能不足的病犬，可补充能量合剂；发热、关节和肌肉疼痛的病犬，可应用双氯芬酸钠等解热镇痛药；流产母犬可使用0.1%高锰酸钾溶液冲洗子宫和阴道，1~2次/d，直至无分泌物流出为止。

2.2 慢性期 慢性期分为无病症的慢性稳定期和反复出现病症的慢性活动期，治愈难度大。慢性稳定期或潜伏期的病犬，因机体免疫系统与布鲁氏菌形成平衡状态，不适宜治疗，仅作观察。慢性活动期的病犬，其病症轻于急性期，可使用中药疗法，提高细胞免疫水平、缓解IV型变态反应。（1）中药疗法：可参考人布鲁氏菌病的治疗方法，杨黎黎曾在《中国中医药报》发表文章，应用经方柴胡桂枝汤，7~20余剂，其中包含皮试转阴性的治愈案例；惠云杰[6]应用清火栀麦片配合复方丹参片治疗慢性布鲁氏菌病患者60例，总有效率达91.67%；赵素元[7]应用柴胡、当归、独活等十余味中药的组方，调节免疫治疗430例慢性布鲁氏菌病患者，总有效率88%，皮试转阴率37%，17个月后的复发率为21%。上述组方均有解表、活血、调节免疫、扶正固本的作用，可尝试应用于犬布鲁氏菌病的治疗。（2）免疫疗法：目前还没有上市的犬种布鲁氏菌疫苗，仅有裂解酶重组菌壳疫苗[8]和灭活苗研制的实验室相关报道[9]。（3）转移因子可改善机体的细胞免疫和固有免疫，可配伍使用：肌肉注射或灌服，犬1~ 2ml，1次/d，连用3周，然后，每周用药2次，继续使用4周，总疗程7周。

3 讨论

3.1 安全防护 一旦发现疑似感染犬种布鲁氏菌病的犬，相关接触人员要做好防护，穿戴护目镜、一次性乳胶手套、长筒胶靴和一次性塑料防护衣。将病犬进行隔离，对环境、犬排泄物、采样器具等物品，用“84”等含氯消毒液或醛类消毒液进行喷雾、浸泡等消毒措施。社区宠物医院在进行犬分泌物或犬血的血清学或PCR检测时，同样要做好防护和消毒。不具备BSL-3级生物安全实验室条件，严禁从事活菌的分离培养。密切接触人员到市级以上疾控中心进行布鲁氏菌检测。

3.2 确诊问题 目前，有不少宠物医院可进行布鲁氏菌血清学检测，但要注意检测抗原是否为犬种布鲁氏菌；血清学诊断阳性结果仅代表感染，但有假阳性存在的可能，还需要进行病原分离，作最终诊断。有少量宠物医院可进行犬分泌物或血液的布鲁氏菌DNA提取和PCR检测，应注意方法的准确性和可重复性。建议到专业实验室进行病原的分离和诊断。

3.3 防治问题 （1）宠物犬每年应进行2次以上的血清学检测；接收或配种前也要进行检测，及时掌握犬的健康状况。犬与犬接触时，应了解其健康状况；避免饲喂生肉。一旦确诊宠物犬患犬种布鲁氏菌病，建议对病犬立即实施安乐死，并进行无害化处理。价值和情感上难以割舍的宠物犬，应根据专业兽医的意见或参考本文的方法进行治疗，直至痊愈，并进行长期跟踪监测，防止复发。病犬愈后不宜作为种犬。（2）抗生素和抗菌药目前对布鲁氏菌、结核杆菌等细胞内寄生菌治疗效果不佳，药物治疗具有局限性，期待科研工作者在细胞穿膜肽(TAT)、细胞内靶向载体等方面有所突破，以提高布鲁氏菌病的治愈率。

[1] 汪立茂, 付清培, 薛梅等. 四川省犬种布鲁氏菌病流行病学调查[J]. 地方病通报, 1996(04): 36- 37.

[2] 阎守敦, 徐敏, 何倩倪等. 新疆犬种布鲁氏菌病流行病学调查研究[J]. 中国人兽共患病杂志, 1990(03): 40- 43.

[3] 黄志雄, 陈英辉, 陆家华等. 广西犬种布鲁氏菌病流行病学调查研究[J]. 地方病通报, 1987(1): 1- 5.

[4] 李向阳. 布鲁氏菌病诊断与治疗[M]. 北京: 中国农业科学技术出版社, 2015. 12.

[5] 刘志国, 王妙, 崔步云等. 犬种布病与公共安全风险[J]. 中国人兽共患病学报, 2019, 35(5): 421- 429.

[6] 惠云杰, 张召. 中药治疗慢性布鲁氏菌病60例[J]. 陕西中医, 2003(9): 785- 786.

[7] 赵素元, 李斌. 中药调节免疫治疗430例慢性布鲁氏菌病[J]. 中国现代应用药学, 2000(5): 410- 411.

[8] 钱晶, 尹秋丹, 卜昭阳等. 犬布鲁氏菌菌壳疫苗的制备[J]. 中国畜牧兽医, 2014, 41(1): 38- 43.

[9] 封伟杰, 连世存, 宋杰等. 犬布鲁氏菌免疫程序设计[J]. 饲料与畜牧, 2019(6): 71- 74.

济南市金种子企业关键产品提升计划项目(201502074)

（2020–06–02）

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