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分光光度法测定不同产地苦楝子总三萜的含量

2020-12-24陈维冉蔡梅超李学燕张宏斌周洪雷

山东化工 2020年22期
关键词:苦楝三萜光度

陈维冉,王 双,蔡梅超,李学燕,于 帅,张宏斌,周洪雷

(山东中医药大学,山东 济南 250355 )

苦楝子为常用中药,该药为楝科植物楝Melia azedarach L.的果实,在我国苦楝作为药物使用至少已有两千多年的历史。苦楝子性寒,味苦,有小毒。归肝、胃经。具有行气止痛、杀虫的功效,临床上用于治疗脘腹胁肋疼痛、疝痛、虫积腹痛、头癣、冻疮等。苦楝的化学成分主要有三萜、甾体、生物碱、黄酮、木脂素等,还含有糖、蛋白质等[1-2]。萜类成分是苦楝子有效成分之一[3],本文测定了不同产地苦楝子中的三萜含量,为该药材的质量评价提供依据。

1 仪器与试药

UV-3600Plus紫外分光光度计(岛津);旋转蒸发器(SY-2000,上海亚荣生化仪器厂),Mettler AE240 电子天平 (瑞士梅特勒);采集或购买于不同产地的苦楝子药材,经山东中医药大学中药鉴定教研室李峰教授鉴定为楝科植物楝Melia azedarach L.的果实。川楝素对照品,自制,纯度大于98%。甲醇和乙腈均为色谱纯,其他试剂均为国产分析纯。

2 方法与结果

1.2.1 对照品溶液制备

精确称取川楝素对照品10 mg,甲醇溶解并定容于10 mL 容量瓶,摇匀,得浓度为 1.022 mg/mL 的标准储备液。

1.2.2 供试品溶液制备

精密称粉碎的苦楝子1.0 g,置圆底烧瓶中,精密加入甲醇100 mL,称定重量,加热回流1 h,冷却至室温,称重,甲醇补重,摇匀,过滤,即得。

1.2.3 测定波长及显色条件

精密吸取 50 μL川楝素对照品甲醇溶液,置于具塞试管中,水浴蒸干,精密加入0.8 mL高氯酸稳定剂、0.2 mL 5%香草醛-冰乙酸显色剂,60 ℃水浴加热15 min后,立即移入冰水浴,精密加入5 mL冰乙酸,摇匀,室温放置。取相应的空白试剂校正基线后,于200~600 nm波长范围内进行全波长扫描,结果表明在515 nm处有最大吸收峰,故样品测定波长确定为515 nm[4]。

1.2.4 线性关系考察

分别精密量取川楝素对照品甲醇溶液20,40,60,80,100 μL,分别置于具塞试管中,按上述方法制备测试样品,在波长 515 nm 下分别测定吸光度,以吸光度 Y 对绝对量 X (μg) 绘制标准曲线,计算回归方程。结果表明川楝素在20.44~102.20 μg 范围内与吸光度具有良好的线性关系。Y=0.0067X-0.0046,r=0.9996。

1.2.5 精密度试验

取川楝素对照品甲醇溶液,在上述色谱条件下,重复进样5次测定峰面积,RSD为1.85%,表明精密度良好。

1.2.6 重复性试验

分别精密量取苦楝子生品粉末 6 份,按供试品溶液的制备进行操作并测定,计算含量及相对标准偏差,RSD为2.47%。表明该方法重复性较好。

1.2.7 稳定性试验

精密取苦楝子供试品溶液,按上述方法显色后,置于室温,分别在 0,10,20、30,40,50,60 min测定各自吸光度,测定含量,计算其相对标准偏差,RSD为2.26%,表明60 min内样品稳定性良好。

1.2.8 回收率试验

精密称定已知含量的苦楝子5份,每份约0.5 g,分别精密加入川楝素对照品溶液,按上述方法分别制备供试品溶液,显色后测定吸光度,计算总三萜含量及回收率,结果表明回收率为97.55,RSD%2.31,回收率良好,见表1。

表1 回收率试验结果

1.2.9 样品测定

取粉碎的苦楝子药材,按上述方法分别制备供试品溶液,精密量取供试品溶液1 mL,按上述测定方法测定,计算含量。结果表明12批次药材含量在4.96~8.47 mg/g之间。见表2。

表2 不同产地苦楝子中三萜含量

3 讨论

3.1 含有多种化学成分,主要包括有三萜类、黄酮类、甾醇类、有机酸类、酚类多糖等化学成分,其中三萜是其驱虫、镇痛、抗菌抗病毒等作用的主要药效物质[5-6]。本文以苦楝子中的川楝素为对照品,采用紫外分光光度法测定了苦楝子总三萜的含量,可以更好地了解控制药材质量。

3.2 采用紫外分光光度法测定苦楝子药材中总三萜的含量,该方法精密度、重复性及线性关系好,回收率满意,可用于川楝子总三萜含量测定。

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