陈明山 曹涛 杨晓夏 林燕翠 毕思远

摘要：选择湛江、珠海、汕头、汕尾、韶关5个代表性区域，从2019年4月至2020年3月每月采样1次采集樣本，每个样本量为300～500 g，总共采集120份样本，获得广东省代表性区域不同季节的水产饲料中真菌毒素的种类及产毒情况，探明了不同环境和不同基质条件下水产饲料中高发真菌毒素种类，为水产养殖人员和质量监控人员提供方向性参考依据。

关键词：水产饲料;真菌毒素;地域;季节;分布特征

中图分类号：S963    文献标识码：A

目前国际社会越来越重视真菌毒素对动物及人类的危害，早在1995年国际食品法典委员会就已经制定了《食品和饲料中污染物和毒素通用准则》，欧盟在2005年发布了黄曲霉毒素的指导文件[1]。国际标准化组织（International Organization for Standardization，ISO）、国际分析化学协会（Association of Official Agricultural Chemists，AOAC）及欧洲标准化委员会（European Committee for Standardization，CEN）都相继制定了一系列真菌毒素的限量和检测方法标准。我国也已经对食品和饲料中真菌毒素制定了一些相关标准，但总体上讲，与发达国家相比在研究水平上还存在差距，安全限量不够完善，监控盲区还较多[2]。尤其是对于毒素易高发且水产品市场庞大的南方地区，水产饲料中真菌毒素污染现状的认知缺乏，监控管理目标不明确。有专家认为为确保我国农产品及饲料安全，应当每隔2～3年进行一次全国范围的真菌毒素污染状况的普查，制定符合我国安全要求的真菌毒素限量标准[3]。

广东作为我国饲料第一大省，连续14年来产量稳居榜首。2018年全国水产饲料2202.9万吨，广东省水产饲料总产量约为531万吨[4，5]。从分区域饲料产量来看，珠三角是广东饲料产量最大的区域，占比高达60%以上，其次是粤西，粤北和粤东。调查广东省水产饲料中真菌毒素污染情况可为广东省水产饲料中真菌毒素的防控提供方向性依据[6]。根据广东省水产饲料生产及养殖区域特点，本实验选取2019年4月至2020年3月间广东省5个代表性地区的水产配合饲料样品作为研究对象，对其中的黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1，呕吐毒素，T-2毒素，HT-2毒素，赭曲霉毒素A及玉米赤霉烯酮7种真菌毒素进行定性定量分析[7，8]。

1  样本采集与保存

在广东省水产养殖地和水产饲料主要生产地，按照GB/T 14699.1-2005/ ISO6497：2002《饲料采集》要求采样。根据广东省水产饲料生产区域分布特征，选择湛江、珠海、汕头、汕尾、韶关5个代表性区域采集样本（图1），从 2019年4月至2020年3月每月采样1次，每个样本量为300～500 g，总共采集120份样本，采集样本在测定前置于-18℃冰箱冻存[9]。

2  检测方法

采集样本用本研究建立的水产饲料中黄曲霉毒素B1、M1，呕吐毒素，T-2毒素，HT-2毒素，赭曲霉毒素A，玉米赤霉烯酮的液相色谱-串联质谱同时检测方法进行检测，方法详程见文献[7]。

3  结果分析

采集的120份水产配合饲料样本中黄曲霉毒素B1、M1，呕吐毒素，T-2毒素，HT-2毒素，赭曲霉毒素A，玉米赤霉烯酮的检测统计结果中（表1），限量标准参照GB 13078-2017《饲料卫生标准》，其中黄曲霉毒素M1，HT-2毒素在标准中并未规定限量，所以不做判定。T-2毒素标准中只规定了植物性饲料原料及猪、禽配合饲料的限量，并未规定水产配合饲料中的限量，所以也不做判定。所有采集的样品中黄曲霉毒素B1的检出率及超标率都是最高的，其次为呕吐毒素，说明这两种毒素在广东省水产饲料中为主要污染毒素种类，尤其是黄曲霉毒素B1，检出率高达41.7%。阳性样本中平均含量最高的为呕吐毒素，其值为982 μg/kg，其次为玉米赤霉烯酮，值为108 μg/kg，但两者超标率却并不高，这与标准限值较宽泛有关。T-2毒素及HT-2毒素在此次采集的样本中检出率并不高，可见广东省水产饲料中这两种毒素污染情况并不算严重，但检出的阳性样本中其平均值为19.4 μg/kg，仅次于黄曲霉毒素B1的阳性样本平均值，而养殖水产动物往往体型较禽畜类小，毒素不耐受性可能更高，所以制定水产饲料中的相关限量标准显得更为重要。在样本的检出毒素种类来看，在同个样本中检出两种或两种以上毒素的样本占比为28.3%，说明被污染的同种饲料中极可能存在多种真菌毒素同时污染的现象，多种真菌毒素对于养殖动物的协同作用不可忽略，我国限量标准在这方面并未体现。

从5个代表性区域采集的水产饲料中7种真菌毒素的检出率来看（图2），7种真菌毒素除了黄曲霉毒素M1，其余6种均在5个代表性地区采集的样品中不同程度的检出。汕尾的黄曲霉毒素B1和M1检出率均最高，其次是湛江，这两地均为沿海地带，气候温暖潮湿，为黄曲霉毒素产生提供了有利条件。呕吐毒素检出率最高的地区为湛江，可能与采集的样本中植物性原料已被污染有关。T-2毒素检出率最高的地区为韶关，这可能与当地昼夜温差及季节性更显著有关。赭曲霉毒素A的地域性差异并不太显著。玉米赤霉烯酮检出率最高地区为珠海。

将采集样本检测数据分为四个季度统计结果（图3）可以看到，大部分毒素检出率较高时期都为4月到9月，这段时期正值广东省的梅雨高发季，饲料原料及成本饲料霉变的可能性更大，这就使得饲料中毒素检出率较高，尤其是黄曲霉毒素，季节性高发较明显。但并不是所有监测的目标毒素检出率最高都处于这个时期，如T-2毒素，它的检出率最高时期为1月到3月，这可能与T-2毒素产生条件较苛刻有关，也可能跟饲料厂家所用原料污染状况有关。

4  结论

在所采集的120份广东省不同地区，不同季节的水产饲料樣本中，7种目标真菌毒素有不同程度的检出。黄曲霉毒素B1和呕吐毒素为广东省水产饲料中真菌毒素污染的主要毒素种类。在检出的阳性样本中平均值最高的为呕吐毒素，其次为玉米赤霉烯酮，但两者超标率均在5%以下。我国《饲料卫生标准》中缺少水产配合饲料中黄曲霉毒素M1，T-2毒素及HT-2毒素的限量指标。两种及以上真菌毒素同时检出率为28.3%，多种真菌毒素对于水产养殖动物的协同作用不可忽略。不同区域检出率最高的毒素种类有差异，这与当地气候和饲料用原料情况可能均相关[10]。从不同季度统计结果来看，广东省梅雨季节饲料中真菌毒素污染情况较其它月份更为严重[11]。无论是饲料生产企业在饲料用原料的品质监控上还是水产养殖户在饲料买回后投喂前的储藏阶段，在这个时期对于饲料霉变情况及其中真菌毒素污染情况都需更加谨慎[12]。

参考文献

[1] 孙伟. 霉菌毒素-饲料领域的一大问题[J]. 国外畜牧学（猪与禽）. 2009，29（5）：30-33.

[2] 陈云良. 粮食中真菌毒素检测技术研究进展[J]. 食品安全导刊. 2016，（12）：52.

[3] Marin S， Ramos AJ， Cano-Sancho G， et al. Mycotoxins： occurrence，  toxicology， and exposure assessment [J]. Food Chem Toxicol， 2013，60：218-237.

[4] http：//longshang. cjyun. org/p/30170. html.

[5] http：//www.feedtrade.com.cn/news/china/ 2019-12-10/2031986. html.

[6] 毕思远，王雅玲，王小博，等. 水产饲料中真菌毒素污染现状及风险分析[J]. 安徽农业科学， 2017，45（21）：92-95+98.

[7] 施琦，杨嘉丽，王雅玲，等. 液相色谱-串联质谱法测定虾饲料中的7种真菌毒素[J]. 分析测试学报，2019，3：334-338.

[8] 施琦，刘阳，王雅玲，等. 液相色谱-串联质谱法检测对虾中T-2毒素的不确定度评定[J]. 食品安全质量检测学报，2016，7（6）：2328-2333.

[9] 王小博，王雅玲，王润东，等. 我国南粤地区霉变水产饲料真菌毒素污染现状及毒性评价[J]. 浙江农业学报，2016，28（6）：951-958.

[10] 谢晓鹏，易卫，庄智明，等. 饲料中的霉菌毒素及其防制措施[J]. 中国畜牧兽医. 2013（5）：101-105.

[11]施琦. T-2毒素的自然发生与降解及其在对虾中的蓄积规律[D]. 广东海洋大学：食品质量与安全，2013.

[12] 李雅楠. 论我国食源性动物饲料质量监管制度的完善[D]. 绵阳：西南科技大学，2013.