姜 川

（沈阳医学院，辽宁 沈阳 110034）

比格犬又称“米格鲁”，属狩猎犬，是世界名犬之一，具有体型小发育快、性情温顺、嗅觉敏锐、运动能力佳等特点，受到养狗人士的推崇，曾被列为台湾受欢迎的十大犬种之一。此外，比格犬也是近年来发现的较为理想的实验动物模型，具有实验可重复性、一致性、可比性等优点，已普遍应用于新药临床前毒理实验，基础医学研究、放射病治疗及实验外科等研究领域。

由于比格犬的炙手可热，其大量繁育成为制约其发展的重要因素。比格犬单次发情，且乏情期长达6～12个月；虽然外源激素可以诱导乏情期母犬发情，但发情的同步控制、超数排卵困难，确切的排卵和受精时间难以掌握。五子衍宗丸是中医补肾益精的经典名方，由枸杞子、菟丝子、五味子、覆盆子、车前子等中药组成，其在改善和提高精子密度、治疗不孕不育方面具有较好的疗效，本实验主要探究了五子衍宗丸组方对公犬生殖能力的影响。

1 材料与方法

1.1 仪器与药品

细胞计数仪［Bio Tech (IC1000)］，兽用血细胞分析仪（MEK-6450K）。五子衍宗丸(由枸杞子、菟丝子、覆盆子、五味子、车前子组成)由北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂生产。

1.2 实验动物

比格犬（Beagle犬）由北京希诺谷生物科技有限公司提供，选取16只性欲旺盛的2～3岁的比格公犬，平均体质量12.36公斤。

1.3 实验动物分组及处理

比格公犬常规饲养5天后，随机数表法将其分为对照组8只和五子衍宗丸组8只。对照组每天喂食全价饲料，自由采食；五子衍宗丸组用蒸馏水将成药配制为混悬液，在全价饲料中拌料，根据人和犬的药物等效剂量系数换算，五子衍宗丸组比格公犬饲喂药30粒/只，每天2次，连续饲喂30天。母犬4只，诱导公犬爬跨。

1.4 观察指标及检测方法

1.4.1 爬跨性行为 统计有爬跨性行为的比格公犬只数。

1.4.2 睾丸、附睾系数 比格公犬处死后，取出双侧睾丸和附睾称重。并计算睾丸重量/体质量为睾丸系数，附睾重量/体质量为附睾系数。

1.4.3 精子品质测定 给药30天后采用按摩法采精，记录采精量。取20微升精子悬液滴于载玻片上，倒置显微镜下镜检100个精子（5个视野），计数精子总数，向前快速运动、向前慢速运动、非向前运动和不运动精子数，计算精子密度、活力、活率和畸形率。

2 结果

2.1 比格公犬爬跨情况

两组有爬跨性行为的比格公犬数量比较见表1。五子衍宗丸组有爬跨性行为的比格公犬数量为6.20±1.69，显著高于对照组，且差异有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 睾丸、附睾系数

两组比格公犬的睾丸、附睾系数比较见表2。结果显示，五子衍宗丸组的睾丸、附睾系数与对照组相比，无明显差异（P＞0.05）。

2.3 精子品质测定

两组比格公犬的精子品质检测情况见表3。结果显示，五子衍宗丸组的采精量、精子密度、精子活力、精子活率与对照组相比都有显著增高，精子畸形率明显下降，且差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1 两组有爬跨性行为的比格公犬数量

表2 两组比格公犬的睾丸、附睾系数比较

表3 两组比格公犬的精子品质测定

3 讨论

3.1 比格犬繁殖体系现状

现阶段，我国宠物犬繁殖业仍处于较为初级的阶段，犬繁殖作为宠物犬行业的上游产业，其对于整个宠物犬产业链具有十分重要的意义。比格犬作为最受欢迎的十大宠物犬犬种之一，其繁殖将直接影响我国宠物犬行业的发展。然而目前，比格犬繁殖行业人员鱼龙混杂，饲养管理水平参差不齐，舍本逐利、不遵守科学繁殖、胡乱杂交的现象较为普遍。由于盲目迎合市场要求，常发生配种频繁、营养不科学、引入他系犬等情况，造成后代脱离原有品种及种公犬繁殖能力严重下降。另外，养殖户普遍文化水平普遍偏低，学习能力较差，没有科学的配种时间及方法，且比格犬的生活条件有限，其繁殖能力不能得到保障。

3.2 中药组方五子衍宗丸

中药五子衍宗丸最早源于唐代，《悬解录》《新唐书·艺文志》等书中均有记载，被誉为古今第一种子方。方由枸杞子、菟丝子、五味子、覆盆子、车前子5种中药组成，具有添精补髓、疏利肾气、种嗣衍宗之功，主治肾虚精亏所致的肾气不足、阳痿早衰、遗精早泄、尿后余沥等症。现代医学研究表明，五子衍宗丸在生殖系统、神经系统、肿瘤化疗、抗衰老、提高免疫力、记忆力等方面均发挥重要作用。在生殖系统方面作用尤为明显，可抑制睾丸细胞通路介导的细胞调亡过程，以及线粒体膜电位水平，从而提高睾丸细胞活率，增强精子活力，达到促进生殖功能的作用。目前，五子衍宗丸多用在人和大小鼠上，偶有兔子，还未见在犬类上使用。韩亮等对五子衍宗丸治疗肾精亏型男性不育进行临床观察，发现五子衍宗丸可提高精液量、精子密度、精子活动率，总有效率达81.7%，且对提高T、LH水平也有一定的作用；李培培等对五子衍宗丸影响夏季公兔生殖能力进行研究，通过切片可明显发现曲精小管排列紧密，管腔规则，附睾中精子面积增大，表明五子衍宗丸可以改善夏季公兔生殖能力低下的情况。

3.3 犬精液品质检查

母犬受胎率直接取决于公犬精液质量，即公犬精液质量的提高直接影响犬繁殖产业的发展。精液受孕能力可通过客观评价精子功能、观察形态学指标进行评估。比格犬单次发情，且乏情期长达6～12个月，故精液品质的提高可有效提高受胎率，降低繁殖成本。精液品质检查主要包含对犬精液量、精子密度、精子活力和精子形态学这几个方面的检测。本实验表明，五子衍宗丸能明显提高比格公犬的爬跨性行为次数，增加单次射精精子量、精子密度，提高精子活力和精子活率，精子畸形率明显下降，显著提高精液品质。此外，睾丸、附睾系数一直是动物毒理实验中常用的药物安全评价指标，睾丸、附睾系数增大表示发生充血、水肿或增生肥大等，表明药物对生殖系统存在一定的毒理作用。本实验初步验证五子衍宗丸未对睾丸、附睾系数造成一定影响，其药物安全性仍需其他药理毒理实验进一步验证。