金宇昌 冯 占，* 李峙净 杨永凯 李贺文 杨瑞恒

（1江苏华骏生物科技有限公司，江苏宿迁223700；2江苏华绿生物科技股份有限公司，江苏宿迁223700；3上海市农业科学院食用菌研究所，上海奉贤201403）

灰树花（Grifola frondosa）又称贝叶多孔菌、栗子蘑、千佛菌、舞茸（日本）等，是一种食药两用菌。新鲜灰树花肉质柔软味美，具有松口蘑（Tricholoma matsutake）的香味，有很高的药用价值[1]。灰树花子实体或菌丝体所含的多糖成分已被相关研究证实在抗 HIV 病毒[2]、抗肿瘤[3]、降血糖[4]及提高机体免疫功能等方面具有一定的功效[5-7]。

日本在20 世纪70 年代后期用木屑开始商业化栽培灰树花，并且于80 年代中期开始了大规模生产[8-9]。我国对灰树花的研究则起步较晚，始于20世纪80年代初，自主选育的适宜工厂化生产的灰树花菌株数量寥寥[10]，因此，工厂化栽培的灰树花菌株选育工作亟待加强。为此笔者进行4个灰树花菌株对比试验，以期筛选出适宜工厂化栽培的灰树花菌株。

1 材料与方法

1.1 试验材料

（1）供试菌株及其来源：试验菌株H1、H2 和H5购自日本公司，庆1购自浙江庆元，这些菌株适用于传统栽培方式，但未进行过工厂化模式栽培性能评价。所有菌株保藏于江苏华绿生物科技股份有限公司菌种保藏中心。（2）培养基配方：母种培养基为PDA 培养基。原种及栽培种配方为木屑50%，玉米芯15%，棉籽壳13%，麸皮20%，石灰1%，石膏1%。料含水量66%。

1.2 试验方法

1.2.1 平板培养菌丝及性状评价

用接种钩将平板菌种表面气生菌丝轻轻刮掉（避免触碰培养基表面），用打孔器从平板菌种中心接种点向外2 cm 处以同心圆的方向打孔取菌种块，接种至待接种的平板中心，置于培养箱中25 ℃恒温避光培养，空气相对湿度50%～60%。

在平板培养皿背面，以接种点为中心划十字坐标轴，自接种后每3 d 划线并拍照、观察气生菌丝生长长势。气生菌丝距离平板边缘4～5 mm 时视为满板，计算菌丝平均生长速度。

1.2.2 三角瓶培养菌丝及性状评价

从三角瓶培养基中间打孔至底部，将平板菌种用接种钩划边长2 cm 的三角块，将菌种块接入中心孔底部，置于培养箱中25 ℃恒温避光培养。观察菌丝生长及长势，记录满瓶时间，计算平均生长速度，菌丝性状评价等均参照平板培养的评价标准。

1.2.3 栽培试验

采用装袋机装料，每袋湿料重（1200±10）g。培养基灭菌方式为高温高压蒸汽灭菌，106 ℃保温60 min 后升温至121 ℃灭菌120 min。灭菌后接种，接种料温（23±2）℃，接种量每袋5～8 g。空气相对湿度50%～60%，25 ℃避光培养30 d。出菇期环境参数为温度19～21 ℃，空气相对湿度90%～95%，光照强度300 lx，二氧化碳浓度≤1 000 mg/mL，内循环风35～40 Hz。子实体叶片最外缘生长点消失，叶片背面菌管明显时采收。计算发菌速度、出菇时间和单产，比较子实体品质。

2 结果与分析

2.1 供试灰树花菌株的菌丝生长情况

2.1.1 PDA平板培养基上供试菌株菌丝生长表现

由表1可见，H1、H2和H5为菌丝生长速度较快的三个菌株，并与庆1菌株差异显著。但H2的菌丝长势偏弱且较稀疏，呈绒毛状。菌株H1 与H5 的菌丝生长速度并未呈现显著性差异。因此菌株H1 和H5可能是最适用于实际生产所使用的菌株。

表1 PDA平板上供试灰树花菌株的菌丝生长表现

2.1.2 三角瓶培养基上供试灰树花菌株菌丝生长表现

在三角瓶菌种培养基上，培养第21 天时，H1 的菌丝吃料速度最快，其次是H5、庆1、H2，菌丝长势同平板菌种基本一致（表2）。就菌丝生长速度而言，H1和H5可能更适合用于工厂化栽培。

表2 供试灰树花菌株在三角瓶培养基上生长情况

2.2 供试灰树花菌株栽培结果

栽培试验结果：H1生长速度最快，其与H5菌丝颜色为浓白色，菌丝强壮；4 个菌株的出菇时间无明显差异，H1 为5 d，其他三个菌株为6 d；子实体的成熟时间，H1 最短为 13 d，其次为庆1、H5、H2 最长为21 d，相对应H1 的整个栽培周期也较短为43 d；菌株H1 的平均袋产量最高，显著高于其他菌株，生物转化率为H1＞庆1＞H5＞H2（表3）。

表3 供试灰树花菌株的栽培结果

图3 供试灰树花菌株子实体

2.3 供试灰树花菌株子实体品质比较

子实体颜色：菌株H1 的子实体呈浅褐色为最优，其次是菌株H5 的子实体呈浅黄褐色；叶片展开率：菌株H5 的子实体叶片展开率最高，其次是菌株H1 的子实体；叶片形状：菌株 H1、H2 和 H5 的子实体叶片形状最优呈扇形或匙形，其次是庆1 的子实体；子实体气味：H1和H2的子实体松蕈样芳香味最浓郁，其次是菌株庆1 和H5 的子实体；叶片大小：4个菌株的子实体均较优，但H2 的子实体的叶片大小更为均匀，其次是H1的子实体（图3，表4）。综合考虑，H1 菌株的子实体品质相对最好，其次是菌株H5，更具商业化栽培的价值。

表4 供试灰树花菌株子实体品质

3 小结

通过对比试验，供试菌株H1 菌丝浓白，致密，在平板培养基及三角瓶培养基中生长速度最快，出菇期菌丝恢复最快，原基形成最早，表明该菌株生长周期短，单产统计结果其产量也最高。因此工厂化栽培该菌株增加单位时间内茬数并获得更多的产量，可大幅提高厂房利用率，降低生产成本，增加企业收益。此外，H1子实体品质也相对优于其他菌株，因此菌株H1 更适宜作为工厂化栽培的灰树花菌株，今后需在实际生产中进一步验证，并细化生产、工艺，逐步推广应用。