刘红云 许世富 张莉 吴蕾 明文庆 蔡一杰 许晓靖

摘要    本文介紹了近些年来饲料中沙门氏菌的检测方法，并提出了预防饲料中沙门氏菌污染的措施，具体包括饲料原料选择、生产加工过程的控制以及包装、运输、储存、使用过程的控制等方面内容，以期为饲料安全生产提供参考。

关键词    饲料;沙门氏菌;快速检测方法;预防措施

中图分类号    S816.17        文献标识码    A

文章编号   1007-5739（2020）14-0205-01

Abstract    This paper introduced the detection methods of Salmonella in feed in recent years， and put forward measures to prevent Salmonella contamination in feed， including the selection of feed materials， the control of production and processing， and the control of packaging， transportation， storage， and use processes，etc.， so as to provide a reference for the safe production of feed.

Key words    feed; Salmonella; rapid detection method; preventive measure

饲料行业是国民经济中的重要行业，我国饲料年产量从2012年开始连续7年位居世界第一。为加强饲料质量安全监管，国家发布了多项饲料标准。为帮助企业提高经济效益和检测水平，本文分析近些年涉及饲料中沙门氏菌的检测方法，制定了饲料中沙门氏菌快速检测方法——免疫色谱法。沙门菌属（Salmonella）是指一大群革兰氏阴性杆菌，其寄生于人类和动物肠道内，其生化反应和抗原构造相似，亦统称为沙门杆菌。沙门氏菌一词的由来是美国兽医微生物和病理学家DANIEL ELMER SALMON首次从病猪中分离出猪霍乱沙门氏菌，为纪念他而以他的名字命名的。目前至少有67种 O抗原和2 000个以上血清型，所致疾病称沙门菌病。

沙门氏菌是对人类和动物健康构成相当危害的一类致病菌，广泛存在于自然界，对外界环境有一定的抵抗力，在养殖过程中，被污染的饲料和水源是其主要的传染途径。食用这些被沙门氏菌污染的饲料，家畜、家禽会中毒患病。

目前沙门氏菌国内外的检测标准有《饲料中沙门氏菌的快速检测方法 聚合酶链式反应》（GB/T 2864—2012）、《饲料中沙门氏菌测定 实时荧光PCR方法》（DB22/T 2052—2014）、《饲料中沙门氏菌的测定》（GB/T 1309—2018）、《饲料中沙门氏菌的检测 EMA-PCR法》（DB41/T 1588—2018）、FDA（Food & Drug Administration）、AOAC（Association of Official Analytical Chemists）、FSIS（FOOD SAFETY AND INSPECTION SERVICE）、ISO、加拿大官方食品微生物分析方法等[1-2]。

1    检测方法

1.1    传统的沙门氏菌检测方法

沙门氏菌传统的检测方法有5个不同阶段或步骤：①前增菌;②选择性增菌;③选择性平板分离;④生化试验，鉴定到属;⑤血清学分型鉴定。沙门氏菌传统检测方法过程繁琐、费时费力，检测法全过程至少需要4～7 d，才能得出明确的诊断结果，在快速、敏感与特异性等方面有局限性。

1.2    免疫学沙门氏菌检测方法

该检测方法原理是利用抗原-抗体反应的显著特异性来鉴别细菌和血清学定型。目前的免疫学方法分为以酶标抗体（ELI-SA）、荧光抗体染色、同位素标记抗体为基础的方法及其他多种以抗体为基础的方法。ELISA法样品制备过程缩短了时间，方法本身仅需约2 h。而微量板ELISA法因用到特殊的仪器——酶标仪，不利于基层监管部门、饲料企业、养殖户更好地了解饲料中沙门氏菌的污染情况。但是近几年发展的免疫测试片，以经特异性抗体敏化的免疫色谱卡片为基础，将增菌液划线加到测试片上，可肉眼直接读出结果。同时为了提高沙门氏菌检测的准确率，在标记出推测新阳性的菌落后，加入确认反应片。免疫色谱卡片极易操作，且由于无需要特殊设备，很适合基层、中小企业的使用[3-4]。

1.3    分子生物学检测方法

PCR（聚合酶链式反应）技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由3个基本反应步骤（变性→退火→延伸）构成。PCR技术具有简便、快速、敏感性高和特异性强的特点，尤其对基质复杂、培养困难的样品，PCR具有与常规方法无法比拟的优越性。但是PCR检测费用高、易污染，对操作环境要求较高，不利于该技术的广泛推广。

1.4    其他检测方法

根据文献资料，沙门氏菌的检测技术还有电阻抗测定法、生物发光法、微量热量测定法等。微量热量测定法在建立参考温谱图时有一定难度;阻抗法所需时间过长;生物发光法需要专业仪器设备。

2    预防沙门氏菌污染的措施

2.1    飼料原料选择

动物性饲料原料特别是鱼类和血粉，因其含有丰富的营养成分，很容易滋生病菌引起腐败，造成沙门氏菌的污染。

因此，为了防止鱼粉和血粉变质，应快速加工处理。一般在不超过24 h内快速加工成鱼粉，或者有冷藏设备的条件下迅速在低温冷冻条件下储存。生产血粉不宜用过夜的血液。严格控制动物性饲料的含水量。如发酵血粉含水量应控制在8%以下，且包装材料要密封。饼粕、糠麸类植物性饲料用作载体的，也应严格控制其含水量。

2.2    生产加工过程的控制

动物性饲料原料的加工过程中应控制好温度、时间，确保加热效果。掌握正确的发酵方法、温度、时间，生产畜禽屠宰废弃物饲料。厌氧发酵必须在密闭状态下;发酵物中要添加足够的糖类物质;必要时添加发酵活菌制剂。平时做好生产车间及生产设备的清洁卫生和消毒工作。高温加工处理后的“熟料”，不得与生料接触，也不得用存放过生料的未经消毒的容器存放“熟料”。确保生产车间用水科学、卫生，避免生产车间用水污染。

目前，许多饲料企业为防止饲料腐败变质，在生产过程中加入防腐剂抗氧化剂。使用较多的是丙酸及其盐类（丙酸钙、丙酸钠）、苯甲酸、山梨酸及其盐类等，该类防腐剂对霉菌、需氧芽孢杆菌和包括沙门氏菌在内的革兰氏阳性菌的抑菌效果较显著。在使用过程中不能超剂量规范使用。例如丙酸添加量可为饲料总量的0.2%～0.4%。

2.3    包装、运输、储存、使用过程的控制

保证包装密封，一般包装分为内外2层，内层密封，外层耐磨。开封的饲料包装袋应及时扎紧袋口。运输过程中要防止包装袋破损和日晒雨淋。仓库必须通风、阴凉、干燥。袋装饲料应堆放在木制托板上，不能直接堆放在地面上。堆放要规范，以利于降温通风，料堆应与窗、壁之间保持一定的距离，控制好温度和湿度。仓库应定期清扫、消毒，防止发生霉变;做好防鼠、防蝇、防蟑等消杀工作。不宜在畜禽舍内堆放过多饲料，以免发生变质[5-6]。

3    结语

作为最常见的食源性传染病之一的沙门氏菌在动物的亚临床感染可导致轻度腹泻和生长缓慢，而严重的感染则会导致发病和死亡。饲料作为沙门氏菌的主要载体，提高快速检测能力，对降低企业养殖成本、保证食品安全具有重要意义，同时做好危险控制点工作，确保饲料安全[7-8]。

4    参考文献

[1] 杨怀珍，牟亚，罗薇.食源性沙门氏菌的研究进展[J].黑龙江畜牧兽医，2016（7）：69-71.

[2] 金雪花，吕淑霞，张超，等.EMA-LAMP方法快速检测鉴别副溶血性弧菌[J].微生物学杂志，2012（4）：6-12.

[3] 郑鸣，郑宝亮.食源性沙门氏菌PCR检测体系的建立及评估[J].郑州牧业工程高等专科学校学报，2010（1）：8-11.

[4] 郭耀东，韩晓江，张英华，等.沙门氏菌检测的研究进展[J].农产品加工，2019（9）：75-78.

[5] 李惠静.食品中沙门氏菌检测现状分析[J].现代食品，2019（9）：24-25.

[6] 章海通，邢家溧，傅晓，等.食品能力验证中沙门氏菌的分离鉴定和分型[J].食品研究与开发，2018（20）：166-171.

[7] 佘灵顺.基因芯片技术及其在食品检测中的应用[J].现代食品，2018（7）：91-93.

[8] 贺奋义.沙门氏菌的研究进展[J].中国畜牧兽医，2006（11）：91-95.