常正义 农雪娟 曾永龙 许桂丹 罗宏成 胡仁统 王俊利 罗斌

【摘要】目的分析桂西地区女性宫颈上皮细胞感染人乳头状瘤病毒（HPV）的状况与基因分布情况，为该地区预防HPV感染和宫颈癌诊治提供科学依据。

方法收集2012年1月～2016年3月桂西地区接受HPV分型检查宫颈标本5534例。采用PCR反向点杂交法（PCRRBD）对宫颈上皮细胞标本进行18种高危HPV和5种低危HPV基因型检测，分析女性宫颈HPV感染状况，同时与中国其他地区研究的女性宫颈上皮细胞感染HPV的基因分布情况比较。

结果5534例女性宫颈上皮细胞标本HPV总阳性率为34.64%，高危HPV型别前4位的分别是16、52、58和18;单型感染阳性率为24.77%，多重感染阳性率为9.87%，且以16型为主的多重感染阳性率为26.56%，以52型为主的多重感染阳性率为31.14%，与文献报道的中国其他地区HPV感染状况和基因分布有差异。

结论我国不同地区HPV感染型别分布不同，桂西地区女性23种基因型HPV阳性率为34.64%，高危HPV型别前4位的分别是16、52、58和18型。

【关键词】人乳头状瘤病毒;基因分型

中图分类号：R737.33文献标志码：ADOI：10.3969/j.issn.10031383.2020.06.007

【Abstract】ObjectiveTo analyze human papillomavirus（HPV） infection status and genotype distribution in female epithelial cells of cervix in western region of Guangxi，so as to provide evidence for the prevention of HPV infection and the diagnosis and treatment of cervical cancer in this region.

MethodsFrom January 2012 to March 2016，a total of 5534 cervical specimens were collected from participants who accepted HPV typing inspection.The genotypes of 18 highrisk types and 5 lowrisk types of HPV were genotyped by dot blot hybridization reversegene chip，and the infection status of women with cervical HPV were analyzed，then the results were compared with genotype distribution of HPV infection women in the other areas of China reported by literature.

ResultsThe total positive rate of HPV infection among 5534 cases of cervical epithelial cell specimens was 34.64%.The four tops of highrisk HPV type were 16，52，58 and 18.The infection rate of single genotype was 24.77%，and the infection rate of multiple genotype was 9.87%.In addition，the infection rate of multiple genotype with mainly HPV 16 subtype was 26.56%，and the infection rate of multiple genotype with mainly HPV 52 subtype was 31.14%，which were significantly different from results reported in the other areas in China.

ConclusionThe distribution of HPV genotypes in different regions in China is varies.The positive rate of 23 genotypes HPV women in western Guangxi is 34.64%，and the top 4 risk HPV types are 16，52，58 and 18.

【Key words】HPV;genotyping

人乳頭状瘤病毒（HPV）是已知最小的DNA病毒，可引起人类机体皮肤黏膜鳞状上皮增殖的球形DNA病毒[1]。HPV具有高度特异性，经常性接触引起一过性感染，机体不能清除的少数病毒核酸持续性感染整合到宿主细胞内，使宿主细胞发生突变，发展为癌。HPV为公认的宫颈癌主要致病因子，根据致癌潜能其型别分为高危型和低危型，高危型HPV的感染过程更容易呈持续性，且清除率较低。而关于HPV多重感染是否更易促进宫颈病变的发生发展，目前意见不一。本研究对来自桂西地区女性的宫颈癌组织进行HPV基因分型检测，探讨HPV的基因多态性与宫颈癌发生、发展的相关性，希望能对不同地区宫颈癌筛查与防治策略提供科学依据，为疫苗研制奠定基础。

1对象与方法

1.1研究对象

收集2012年1月～2016年3月桂西地区（户籍为百色、河池的常住居民）到我院接受HPV分型检查宫颈标本，共计5534例。患者年龄16～85岁，平均（36.68±9.09）岁。

1.2HPV基因分型检测

采集宫颈脱落细胞，提取HPV DNA，通过扩增其 L1 区目标序列，PCR反向点杂交法（PCRRBD）判断是否存在HPV并明确具体型别，该方法检测5种低危型HPV（81、43、42、11和6）和18种高危型HPV（Cp8304、83、82、73、68、66、59、58、53、52、51、45、39、35、33、31、18和16）。

1.3观察项目

观察HPV感染情况，HPV感染亚型分布，多重感染含主要HPV亚型分布，比较中国不同地区间的HPV感染率。

2结果

2.1HPV感染情况

5534例女性宫颈上皮细胞标本中阳性1917例，总阳性率为34.64%。单一型别的HPV感染者1371例，多重型别的HPV感染者546例。HPV感染情况见表1。

2.2HPV感染亚型分布

高危型HPV型别前4位的分别是16、52、58和18。低危型HPV 11型70例、HPV 43型55例、HPV 6型47例、HPV 42型43例、HPV 81型16例。多重型别的HPV感染者546例，多重型别感染率9.87%，其中四重型别的HPV感染者17例、三重型别的HPV感染者132例、双重型别的HPV感染者384例、四重型别以上的HPV感染者13例。见表2。

2.3多重感染含主要HPV亚型分布

多重型别的HPV感染者546例，以16、52、58、18占绝大多数，分布情况见表3。

2.4不同地区间HPV感染率比较

各地区HPV感染率不同，北京市HPV感染率最低，辽宁省HPV感染率最高;大部分地区型别分布存在差異，高危型前四位HPV亚型也不同。见表4。

3讨论

在女性群体恶性肿瘤中宫颈癌发病率排名第二，其中有近80.08%病例发生在落后国家和地区，我国每年新发病例约有11万，而死亡病例达2.3万[9～10]。宫颈癌的发病是一个复杂的，多因素、多阶段的长期渐进的过程。过早和或过度性行为往往导致女性阴道黏膜轻度损伤，HPV有机可乘，可能感染并潜伏于暴露的基底细胞层，独立的外源染色体HPV DNA游离于细胞核内，伺机整合到宿主细胞内并使其发生突变。HPV感染往往呈一过性，病灶自愈。少数宫颈癌持续者HPV基因线性化并与宫颈鳞状上皮细胞基因整合，为宫颈癌的最终生成提供必要条件。16、52、58、18等HPV高危型的感染清除率低，感染后易呈持续性，大大增加了癌变的危险性。2005年，国际癌症研究机构研究进一步证实，高危型HPV在机体的持续感染是癌前病变及宫颈癌的直接病因[11]。目前，已报道200多种HPV亚型，根据其致癌潜能分为低危型和高危型。已明确可检测5种低危型HPV（81、43、42、11和6）和18种高危型HPV（Cp8304、83、82、73、68、66、59、58、53、52、51、45、39、35、33、31、18和16）。由于不同HPV亚型外壳蛋白差异大，导致机体几乎不存在交叉保护性抗体，故极易发生不同HPV亚型多重感染或反复感染，加上不合理用药会导致自身免疫系统的超负荷，使部分HPV亚型很难及时清除，因而加速宫颈疾病的进程[12～13]。

本研究5534例女性宫颈上皮细胞标本中检测出23种HPV基因型别，HPV阳性感染者1917例，阴性者为3617例，总阳性率为34.64%，单一型别的HPV感染者1371例，单一型别的HPV感染率24.77%，高危型HPV 16 型322例、HPV 52 型236例、HPV 58型149例、HPV 18 型74例、HPV 33型48例、HPV 68型45例、HPV 66型42例、HPV 31型40例、HPV 82型38例、HPV 53 型32例、HPV 51型27例、HPV 59型30例、HPV 39型13例、HPV 35型18例、HPV 83型10例、HPV 45型9例、HPV 73型6例、HPV Cp8304型1例，高危HPV型别前4位的分别是16、52、58和18。低危型HPV 11型70例、HPV 43型55例、HPV 6型47例、HPV 42型43例、HPV 81型16例。多重型别的HPV感染者546例，多重型别的HPV感染率9.87%，其中四重型别的HPV感染者17例、三重型别的HPV感染者132例、双重型别的HPV感染者384例、四重型别以上的HPV感染者13例，表明随多重感染数目增加感染率明显下降。多重感染阳性率为9.87%，且以16型为主的多重感染阳性率为26.56%，以52型为主的多重感染阳性率为31.14%。综合我国部分地区研究文献，我们认为：①各地区HPV感染率不同，北京市HPV感染率最低，仅6.68%，而辽宁省HPV感染率最高达45.60%[8～13];②大部分地区型别分布存在差异，高危型前四位HPV亚型也不同。本研究桂西地区女性23种基因型HPV阳性率为34.64%，在全国处于较高水平;高危HPV型别前4位的分别是16、52、58和18型，与其他地区存在差异，仍是以 HPV 52、16为主要感染型别，这是一致的。

总之，HPV感染是可以预防的，Merck公司研制由HPV 16、18、6、11组成的Gardasil 四价疫苗与GSK公司研制由HPV 16和HPV 18组成的Cervarix二价疫苗在国外已应用。HPV发病因素、致病机理基本明确。由于HPV所致的宫颈癌与遗传易感性、生物学因素及行为因素相关，所以明确本地区的主要感染型别，即可为宫颈癌的早期诊断、早期治疗及随访监测提供准确的科学的依据，同时对治疗性疫苗的研发十分有必要。

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（收稿日期：2019-07-08修回日期：2020-03-30）