王新红

(广州医科大学附属口腔医院 广州口腔疾病研究所 口腔医学重点实验室，广东 广州 510140)

复方硼砂含漱液是口腔科非处方用药，含硼砂、苯酚等成分，多用于口腔黏膜溃疡类及感染类疾病的辅助治疗。该含漱液既有一定的消毒防腐作用，又有一定保护口腔黏膜的作用，且对患者口腔刺激弱，是常用口腔护理药物[1-2]。复方硼砂含漱液在口腔临床中广泛使用，但其抑制细菌生长繁殖作用少见报道。实验选择了金黄色葡萄球菌等5种标准菌株及5株临床分离MRSA菌株，检测了复方硼砂含漱液对上述各菌的抑制效果，结果显示，该含漱液在2倍稀释度下，可有效抑制各实验菌株的生长，4倍稀释亦有一定抑制效果。

1 材料与方法

1.1 实验材料

1.1.1 试剂

复方硼砂含漱液(上海运佳黄浦，批号190804)，0.9%氯化钠注射液(广东怡翔，批号：190125201 C5)、硫酸庆大霉素注射液(欣辰药业，批号：190126301)，营养琼脂(北京奥博星，批号20190607)，MH(B)肉汤(北京奥博星，批号20190512)。

1.1.2 菌株

金黄色葡萄球菌ATCC25923标准株及耐甲氧西林临床分离株(5株)，表皮葡萄球菌ATCC12228，铜绿假单胞菌ATCC27853标准株、大肠埃希菌ATCC25922标准株、肺炎克雷伯菌CMCC(B)46117标准株，总计共10株细菌，均由山东中医药大学微生物教研室提供。

1.1.3 主要仪器设备

麦氏比浊管(自行配制)，96孔无菌培养板(Corning)、90 mm一次性无菌培养皿(NEST)，电子天平(上海立辰FA-1004)，HH-2电热恒温水浴锅(杭州恒仪)，DNP-9300-BS-11恒温培养箱(上海和勤)，DNM-9602普朗酶标仪(北京普朗)，移液器(Dragon Lab)等。

2 实验方法

2.1 培养基制备

MH(B)肉汤和营养琼脂按照说明书配置后，121℃15min灭菌，营养琼脂制成无菌营养琼脂平板，MH(B)肉汤以无菌锥形瓶储存，均于4℃冷藏备用。

2.2 细菌培养

将上述细菌以营养琼脂接种培养，37℃24h后待其生长良好，挑取细菌，用MH肉汤洗脱，以麦氏比浊管配制成1×106cfu/ml浓度的菌液备用。

2.3 药液作用于细菌

依据NCCLS规定[3]，参照文献方法[4-5]，各菌株的MIC用微量肉汤稀释法进行测定。96孔培养板每孔加入100uLMH(B)肉汤培养液，A行中加入含漱液药液100uL，从A行中吸取混合液100uL加入第2行，按此操作进行二倍稀释至F行，依次得到药液含量为2-64倍稀释梯度，G行不加药物作为空白对照，H行加入大庆霉素注射液10uL作为阳性对照；1-12列各列的A-H行中分别加入配置好的菌液10uL，每株细菌重复3次。37℃下培育24h，将样品与对照孔进行对比，判断MIC：若当前孔中培养液清晰，而下一个浓度孔出现浑浊，则将当前孔的药物稀释度作为MIC；如当前孔与空白对照相同，均为浑浊状态，说明无抑菌作用。

3 结果

表1 复方硼砂含漱液对各菌株的MIC

表1结果显示，复方硼砂含漱液在2-4倍稀释度下对各菌株有一定抑制作用。在2倍稀释浓度下，实验所用各菌的生长均被复方硼砂含漱液所抑制；在4倍稀释浓度下，复方硼砂含漱液只能抑制表皮葡萄球菌ATCC12228、MRSA临床株2和4的生长。

4 讨论

硼砂分子式为Na2B4O7·12H2O，是中国药典记载的中药之一。研究显示，硼砂对金黄色葡萄球菌、结核分枝杆菌等细菌具有一定抑制作用，对真菌、病毒亦有抑制效果[6]。苯酚是人类最早使用的消毒剂之一，其主要杀菌作用的机制是使蛋白质变性，临床常用2%～5%苯酚水溶液作为消毒剂。硼砂含漱液含0.3%(体积分数)的液化酚，由苯酚加热后加入8%～10%的水制得。硼砂和苯酚均有一定的消毒作用，是复方硼砂含漱液抗菌作用的主要成分[7]。

金黄色葡萄球菌在人体口腔及鼻咽部均有分布，易产生耐药性变异，是重要口腔感染细菌之一[8-9]。MRSA是临床最常见的耐药菌之一，常致院内感染，亦属口腔常见感染细菌，对β-内酰胺类和头孢类抗生素具有较强耐药性[10-11]。表皮葡萄球菌是人体正常微生物群组成部分，在人体免疫力下降或侵入人体无菌部位等情况下也可引起感染。共生于人体皮肤和黏膜，可引起口腔感染[12]。大肠埃希菌主要引起腹腔感染、泌尿感染、呼吸系统以及皮肤感染等疾病，易发生耐药性变异。随着该菌耐药性的不断上升，其引起的感染问题也日益严重，近年来亦有引起口腔感染的报道[13]。肺炎克雷伯菌能引起肺炎、败血症等感染，常出现耐药性突变，在口腔感染者痰液标本中经常分离到，是口腔感染的常见病原菌之一[10-11]。铜绿假单胞菌在正常人体皮肤粘膜、呼吸道、消化道均有分布，属机会致病菌，是医源性感染的主要细菌之一，可引起口腔颌面外科患者术后感染[10-11]。该菌具有较强的天然耐药性，对常用碳青霉烯类抗生素抵抗力较强[14]。

临床常将复方硼砂含漱液用于口腔黏膜溃疡类及感染类疾病的治疗。本研究显示，复方硼砂含漱液2倍稀释时可有效抑制实验中所选全部菌株的生长繁殖；4倍稀释时依然能够有效抑制表皮葡萄球菌ATCC12228和部分MRSA临床株的生长。上述结果说明，该含漱液在其正常工作浓度下，对常见部分口腔感染细菌有较好的抑制作用，有较好的消毒效果。