韦永江 汪洪发 梁国庆 汪勇 王洁 杨通会 李治芳

猪瘟俗称“烂肠瘟”，是一种由猪瘟病毒引起的具有高度传染性疫病，致死率高，是威胁养猪业的重要传染病之一。其临床典型特征是全身皮肤、浆膜、黏膜和内脏器官有不同程度的出血，而现在临床上的普遍情况是非典型化的、亚临床感染、持续感染及隐性感染等。 2017年起贵州省罗甸县猪瘟退出强制免疫范畴，为评估罗甸县生猪养殖场户猪瘟自主免疫效果，本次试验对养殖场、养殖大户、散养户三个来源不同的生猪血清样品开展猪瘟免疫抗体检测，结果表明养殖场猪瘟免疫抗体合格率明显高于养殖大户和散养户，养殖大户高于散养户。

为有效做好猪瘟的防疫工作，罗甸县在每年给各市县发放猪瘟疫苗，进行春、秋2季集中免疫。为切实了解2019年猪瘟疫苗免疫实施情况和评估免疫效果，根据免疫计划要求，所有发放疫苗的区（市）县的部分规模场、散养户和屠宰厂采集血清样品，采用猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒对采集样品进行免疫抗体水平的检测。

一、材料与方法

1、试验材料

猪瘟抗体检测试剂盒（生产厂家为深圳真瑞生物科技有限公司，批号为2019061802）、猪血清样品（共计307份样品）、酶标仪、移液器、吸头、量筒等。

本次试验集中采样时间为7天，采样范围覆盖全县9个乡镇、8个养殖场、15个养殖大户和49个散养户，被采样生猪均为60日龄以上健康猪，实验室检测时间为1天。

2、试验方法

采用阻断ELISA法，在酶标板条微孔上预包被猪瘟抗原。在试验中，加入稀释后的待检血清，经过温育后，若样品中含有猪瘟抗原特异性抗体，则与包被板上的抗原结合，经洗涤除去未结合的抗体和其它成分后，再加入酶标的抗猪瘟抗体，样本中的抗体阻断了酶标抗体与包被板上抗原的结合，经洗涤除去未结合的酶结合物，在微孔中加入TMB底物液，经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗体含量成反比，加入终止液终止反应后，用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度。

3、检测结果判定

用酶标仪于450nm读取吸光度OD值，试验成立条件为阴性对照（N）OD值>0.5，同时阳性对照（P）阻断率>50%，计算方法为PI（阻断率）=1-（样品OD值/阴性OD值）。当PI（阻断率）>40%则判断为阳性，当PI≦40%且>30%时为可疑，当PI≦30%则判断为阴性。

二、结果與分析

通过检测得出，养殖场、养殖大户、散养户受检样品的猪瘟免疫抗体合格率分别为85.44%、57.27%，23.4%，总体合格率为56.35%，结果表明不同来源样品的猪瘟免疫抗体合格率存在明显差异，养殖场高于养殖大户和散养户，养殖大户高于散养户，详见表一。

三、讨论

2017年猪瘟退出强制免疫范畴后，政府不再对猪瘟免疫作强制要求，猪瘟免疫模式变为养殖场户自主免疫。从检测结果来看，猪瘟免疫抗体合格率以养殖场、养殖大户、散养户逐渐呈“阶梯式”下降，出现这样的结果可能与养殖场户自身的防疫意识有很大关系。经调查了解，本次采样的养殖场均建有详细的免疫程序，场内各项管理制度相对规范，防疫设施较为齐全，且场主自身防疫意识较强;养殖大户有一定的防疫意识，但防疫措施落实效果不理想;而散养户基本上不主动实施免疫，防疫意识较为淡薄。截止目前，全国已发生多起非洲猪瘟疫情，其中大部分疫情发生在中小规模养殖场和散养户，中小规模养殖场和散养户由于防疫意识不强、 防疫设施不健全、 防疫措施落实不到位，对非洲猪瘟疫情防控工作带来重大隐患。因此，进一步提高全县养殖场户自主防疫意识及防疫条件迫在眉睫。

研究表明：在加强猪瘟诊断和免疫监测的同时，必须从源头控制，从种源入手扎实抓好种猪场猪瘟的防疫工作。为避免免疫失败，淘汰隐性感染或潜伏感染的种猪。同时制定科学合理的免疫程序，适当加大免疫剂量，保证猪群具有抵抗猪瘟病毒感染的抗体水平。加强饲料管理，优先选用配合饲料，保证猪群的营养全面，使机体拥有较强的免疫力。猪场必须实施严格的生物安全措施，定期对圈舍、垫草、粪水和用具等进行彻底消毒;来访人员和工作人员进入猪场必须经过淋浴等消毒程序;禁止外来人员或车辆进入猪场。需引进猪时，必须做好隔离观察和免疫检测。

综上所述： 本次试验对养殖场、养殖大户、散养户三个来源不同的生猪血清样品开展猪瘟免疫抗体检测，结果表明养殖场猪瘟免疫抗体合格率明显高于养殖大户和散养户，养殖大户高于散养户。因此，需要做好相应的预防和控制措施，只有这样，才能有效的确保养猪业的发展。

（作者单位：550100贵州省罗甸县农业农村局）