APP下载

补肾活血方对促排卵PCOS大鼠子宫内膜整合素ανβ3的表达调节

2020-04-13邓琳琳

国际感染病学(电子版) 2020年3期
关键词:整合素孕激素灌胃

邓琳琳

南阳医学高等专科学校,河南 南阳 473000

研究表明,无论是自然妊娠还是辅助生殖技术后妊娠,多囊卵巢综合征(PCOS)患者的自然流产率均高于健康女性[1]。因此寻求改善PCOS患者子宫内膜容受性的途径成为解决其生殖障碍的关键。本实验通过动物实验,验证补肾活血方是否能对促排卵PCOS模型大鼠的子宫内膜容受性产生正面作用。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 6周龄雌性SD大鼠30只,体质量220~240g。采购于河南省动物实验中心,生产许可证号SCXK(豫)2013-0001,适应性喂养3天(温度20~26℃,湿度40~60%,光照10小时/天)。随机分为正常组10只和建模组20只,正常组予以1%CMC溶液灌胃,模型组以来曲唑溶液连续灌胃21天。尾静脉取血行血清学检测,确定建模结果。将建模成功的PCOS大鼠随机分为对照组10只和方剂组10只,分别予以克罗米芬溶液、补肾活血方配合克罗米芬溶液灌胃,同时继续给与正常组1%CMC溶液灌胃,5天后寰椎脱臼法处死取子宫内膜。

1.2 实验药品及制备 来曲唑片(芙瑞,2.5mg/片,江苏恒瑞医药股份有限公司),溶于1%CMC溶液中,以1mg/kg·d给大鼠灌胃。克罗米芬片(枸橼酸氯米芬胶囊,50mg/粒,广州康和药业有限公司),溶于1%CMC溶液中,以5mg/kg·d给大鼠灌胃。补肾活血方(中药颗粒制剂,深圳三九医药公司)包含:菟丝子颗粒 0.5 克/包、桑寄生颗粒1克/包、续断颗粒1.5克/包、当归颗粒3克/包、熟地颗粒3克/包、丹参颗粒1.5克/包、白芍颗粒1克/包、黄芪颗粒1克/包、山茱萸颗粒1克/包、紫河车颗粒1克/包、盐杜仲颗粒 1克/包、制香附颗粒1克/包混合并加入30ml的沸水,充分溶解后以10ml/kg·d给大鼠灌胃。

1.3 检测方法 放免法测定大鼠血清性激素水平;免疫组化法检测大鼠子宫内膜上雌激素受体(ER)和孕激素(PR)受体的表达情况;RT-PCR法检测整合素ανβ3 mRNA在大鼠子宫内膜上的表达差异。

1.4 统计学处理 所有数据均运用SPSS17.0统计学软件处理。计量资料以均数±标准差(Mean±SD)表示,均数比较用t检验;计数资料进行卡方检验。统计学检验水准α=0.05。P<0.05为差异具有统计学意义,P<0.01为具有极显著性差异。

2 结果

2.1 各组大鼠子宫内膜ER、PR的表达结果 ER、PR表达于子宫内膜细胞的胞核(见图1),利用计算机图像分析技术,检测各物质表达的平均光密度,表达其阳性率,结果如下:

图1 各组大鼠子宫内膜ER、PR的表达情况

利用计算机图像分析技术,通过检测各物质表达的平均光密度,表达其阳性率,结果见表1。

表1 各组大鼠子宫内膜ER、PR的表达情况

正常大鼠子宫内膜ER、PR的表达低于其他组(P<0.05),在PCOS大鼠中,方剂组的ER、PR的表达低于对照组(P<0.05),与正常组相似(P>0.05)。

2.2 各组大鼠子宫内膜整合素ανβ3 mRNA的表达 用RTPCR检测各组大鼠子宫内膜整合素ανβ3 mRNA的表达,结果分别是:正常组1.52±0.35;对照组1.27±0.21;方剂组1.33±0.48。整合素ανβ3 mRNA在正常组的表达量最高(P<0.05),且在方剂组表达高于对照组(P<0.05)。

3 讨论

PCOS在中医古典文献中并无明确记载,但根据临床表现,PCOS当属中医学中“闭经”、“月经后期”及“不孕症”的范畴[2]。中医学者将其划分为三种证型:“肾虚血瘀型”、“脾虚痰湿型”和“痰瘀互结型”,其中“肾虚血瘀型”是最为常见的。考虑肾主生殖,故中医多采用“补肾”疗法来提高患者成孕。西医则通过做人工周期和促排卵作为解决PCOS患者排卵障碍的一线疗法,虽然经过治疗大多数患者能顺利的排卵和受精,但受精卵的低着床率却制约了妊娠的成功[3]。改善子宫内膜的容受性,提高着床几率成为治疗育龄期PCOS患者的关键所在。

目前研究较多的是整合素ανβ3,它在增殖期内膜中几乎无表达,而在分泌期中表达呈阳性[4],尤其是在胚泡植入前这段时间,表达量最高,说明它与内膜的容受性密切相关,参与调节胚胎着床[5]。而我们发现PCOS模型大鼠子宫内膜的整合素ανβ3的表达量是降低的,说明内膜允许胚胎着床的能力下降。在经过补肾活血方的治疗后,ανβ3的表达量有所增加,证明此方剂可以有效改善PCOS模型大鼠子宫内膜的容受性。

激素的作用在胚胎着床过程中广为人知,影响子宫内膜容受性的主要激素就是来源于卵巢的雌、孕激素,这两种激素通过各自的受体进行调节。有研究表明,子宫内膜整合素的表达受增加的雌/孕激素比值调节,其中孕激素受体在植入窗期子宫内膜的腺上皮内表达下降[6]。这与我们观察到的结果基本一致。所以说,孕激素的变化对子宫内膜整合素ανβ3的表达调节更为重要。

综上所述,补肾活血方可以调节促排卵PCOS大鼠子宫内膜上雌孕激素受体含量,并增加整合素ανβ3的表达,从而改善PCOS大鼠子宫内膜容受性,可以用来提高受精卵的着床几率,降低生殖障碍。

猜你喜欢

整合素孕激素灌胃
不同剂量孕激素治疗无排卵型月经不调的临床疗效对比
整合素αvβ6与牙周炎关系的研究进展
整合素α7与肿瘤关系的研究进展
保胎药须小心服
生大黄及轻质液状石蜡灌胃治疗急性胰腺炎的临床分析
脉血康胶囊联合雌孕激素治疗血瘀型原因不明的月经过少
小鼠、大鼠灌胃注意事项
雌、孕激素水平检测与过期妊娠分娩发动的关系
一种简易的实验兔灌胃方法
整合素αvβ6和JunB在口腔鳞癌组织中的表达及其临床意义