张克明，祁应才，屈凯强，戴丹菁2，张建文

(1.应城市人民医院胃肠甲乳外科，湖北 应城 432400；2.武汉大学人民医院汉川医院肿瘤科，湖北 汉川 431600)

乳腺癌发病率居恶性肿瘤的榜首[1]。据流行病学调查显示，2015年中国乳腺癌发病病例约有26.9万，死亡病例7.0万，分别占女性肿瘤发病的15%和死亡的7%，严重威胁着女性的健康[2]。城市女性乳腺癌发病率高于农村地区，且乳腺癌的发病呈现年轻化趋势[3]。目前认为，乳腺癌的危险因素主要包括家族史、遗传、生殖因素、不良生活习惯以及乳腺增生性疾病[4]。有研究认为，乳腺和甲状腺均属于激素应答器官，内分泌功能的紊乱与乳腺癌的发生发展密切相关[5]。测定促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)水平，分析甲状腺水平，对于乳腺癌的诊断具有一定的价值；肿瘤特异性生长因子(tumor specific growth factor,TSGF)是临床肿瘤诊断的重要依据；p185蛋白具有酪氨酸激酶活性，由于C-erbB-2基因的扩展，其在乳腺癌患者的表达可高达95%，是乳腺癌的重要诊断依据[6]。本研究通过探讨TSH、TSGF、p185蛋白表达水平与乳腺癌疾病的相关性，以期为临床诊断及预后评估提供依据。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选择2016年8月至2018年10月应城市人民医院收治的60例女性乳腺癌患者作为研究对象，年龄35～45岁，平均(42.88±2.33)岁；BMI平均(23.69±2.95)kg/m2。按照TNM分期分为Ⅰ-Ⅱ组(Ⅰ-Ⅱ期患者)和Ⅲ-Ⅳ组(Ⅲ-Ⅳ期患者)。Ⅰ-Ⅱ组36例患者，年龄平均(42.48±2.59)岁，BMI平均(24.06±2.76)kg/m2；Ⅲ-Ⅳ组24例患者，年龄平均(42.37±2.46)岁，BMI平均(23.91±2.48)kg/m2。另选取我院同期体检健康人群60例作为对照组，年龄平均(42.39±2.37)岁，BMI平均(23.39±3.08)kg/m2。3组患者年龄和BMI比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性(表1)。本研究经院伦理委员会论证通过，所有患者和健康体检人群均签署知情同意书。

纳入标准：①乳腺癌患者经过病理诊断，均符合中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范(2015版)[7]中关于乳腺癌的诊断标准，为首次发病；②对照组患者的血细胞计数、肝肾功能、血脂等均正常。排除标准：①复发转移的乳腺癌患者；②乳腺急性炎症期患者；③具有精神疾病或存在认知功能障碍者；④合并其他类型肿瘤者。

1.2 方法

3组患者入组后第2天均进行肘静脉采集血液4 mL，4 ℃静置20 min，5 000 r/min离心20 min，离心半径为20 cm，取上清液，置于-80 ℃下保存，血清TSH采用酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)进行检测，以酶作为标记物，使用非竞争反应模式，通过酶催化底物显色。TSGF检测在酸性环境中进行，标本中的TSGF可与试剂中的显色剂反应，测定470 nm处的吸光度，可通过标准品绘制标准曲线，从而计算出相应吸光度的TSGF含量，p185蛋白采用免疫组化，LSAB法(抗生蛋白链菌素-生物素标记法)进行检测。

1.3 观察指标

分别对不同病变性质以及对照组人群的血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率进行对比观察；对不同肿瘤直径、组织分级、分子分型及淋巴结转移情况的乳腺癌患者的TSH、TSGF水平与p185蛋白阳性率进行对比观察；对以上差异性指标与患者的TSH、TSGF、p185蛋白阳性率进行Spearman相关性分析；对不同病理分级乳腺癌患者的TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率进行Logistic多因素分析；TSH>1.0 mIU/L为阳性结果，TSGF>22.0 U/mL为阳性结果，p185蛋白抗体阳性视为阳性结果；使用ROC曲线对TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率的单独检测和联合检测诊断效能进行对比观察，联合诊断以TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率的串联诊断作为依据，计算指标包括：灵敏度=真阳例数/(真阳例数+假阴例数)×100%，特异度=真阴例数/(假阳例数+真阴例数)×100%，阳性预测值=真阳例数/(真阳例数+假阳例数)×100%，阴性预测值=真阴例数/(假阴例数+真阴例数)×100%，准确度=(真阳例数+真阴例数)/(真阳例数+真阴例数+假阴例数+假阳例数)×100%。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 3组血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率比较

3组患者血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率比较，差异有统计学意义(P<0.05)；经两两比较，Ⅰ-Ⅱ组和Ⅲ-Ⅳ组患者的血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率显著高于对照组，Ⅰ-Ⅱ组与Ⅲ-Ⅳ组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 各组患者血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率比较

LSD-t1：Ⅰ-Ⅱ组与Ⅲ-Ⅳ组比较；LSD-t2：Ⅰ-Ⅱ组与对照组比较；LSD-t3：Ⅰ-Ⅱ组与Ⅲ-Ⅳ组与对照组比较

2.2 不同病理特征乳腺癌患者血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率比较

不同组织分级、TNM分期以及淋巴结转移情况乳腺癌患者的TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率比较，差异有统计学意义(P<0.05)，而不同肿瘤直径和分子分型的乳腺癌患者的TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表2。

表2 不同病理特征乳腺癌患者血清TSH、TSGF、p185蛋白阳性率比较

病理特征nTSH(mIU/L)TSGF(U/mL)p185阳性[例(%)]肿瘤直径≥3cm281.14±0.1142.44±1.2714(42.86)<3cm321.16±0.1442.25±1.1115(46.88)t/χ20.6090.6180.058P0.5450.5390.809组织分级G1+G2330.92±0.2832.13±1.4510(30.30)G3271.18±0.2453.75±1.1719(70.37)t/χ23.81262.5589.552P0.0000.0000.002分子分型Luminal311.15±0.1642.12±1.3413(41.94)HER2291.14±0.1242.22±1.0816(55.17)t/χ20.2720.3171.052P0.7860.7520.305TNM分期Ⅰ+Ⅱ331.05±0.3633.12±1.6411(41.94)Ⅲ+Ⅳ271.24±0.2251.22±1.2818(55.17)t/χ22.39846.8306.607P0.0200.0000.010淋巴结转移无370.99±0.1732.22±1.0209(24.32)有231.27±0.1653.75±1.1920(86.96)t/χ26.34274.55222.281P0.00000.00000.000

2.3 病理特征与乳腺癌患者TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率的相关性分析

通过Spearman相关性分析发现，组织分级、TNM分期、淋巴结转移、病理状态与乳腺癌患者的TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率呈显著相关性，差异有统计学意义(P<0.05)，见表3。

表3 病理特征与乳腺癌患者TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率的相关性

病理特征TSHTSGFp185组织分级r0.3520.6990.756P0.0350.0020.002TNM分期r0.1650.3560.465P0.0450.0030.002淋巴结转移r0.2630.3620.175P0.0120.0220.002

2.4 Logistic多因素分析

通过多因素分析，血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率为乳腺癌的独立危险因素，差异有统计学意义(P<0.05)，见表4。

表4 乳腺癌的多因素分析

2.5 单独检测和联合检测对乳腺癌的诊断效能对比

通过对乳腺癌患者血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率单独检测和联合检测的诊断效能进行观察发现，采用联合检测患者的ROC曲线下面积高于单独检测，差异有统计学意义(P<0.05)，见图1、表5。

图1 单独检测与联合检测ROC曲线分析

表5 单独检测与联合检测对乳腺癌诊断效能比较

3 讨论

乳腺癌患者的临床分型主要包括团块型、结节型、导管型、囊肿型、弥漫型等[8]。乳腺癌早期症状不典型，当患者因临床症状就诊时，多数已经失去最佳治疗机会，所以对乳腺癌患者进行早期识别、干预、治疗具有积极的意义[9-10]。有学者认为，早期对乳腺癌进行识别干预，对于提升患者的生命质量具有积极的影响，能显著降低50～69岁女性患者的病死率[11-14]。因此，提高筛查诊断方法的特异度与敏感度对于早期发现、及时采取干预措施具较高的临床价值。有学者认为，检测患者的肿瘤标记物以及特异性癌变基因对于早期病变的发现具有重要意义[15]。

原癌基因HER-2是乳腺癌发病的关键表达基因，该基因与p185蛋白表达高度相关，因此p185蛋白与乳腺癌的关系受到广泛关注[16]。有研究认为，在对乳腺癌患者的治疗过程中，随着乳腺癌患者的预后转变，p185蛋白表达含量呈现一定的相关性变化[17]。p185蛋白水平的过度表达，预示着患者的复发风险显著升高。孙峰等[18]研究发现，75%的p185蛋白阳性表达患者随访期间出现复发或转移，25.6%的p185蛋白阴性患者出现复发或转移；41.7%的乳腺癌患者p185蛋白阳性，而在对照组阳性率为0，说明p185对乳腺癌的诊断及预后预测均有良好的应用价值。本研究中，相比正常人群，乳腺癌患者的血清p185蛋白阳性率显著升高，且随着患者的病理分期进展，其呈显著上升趋势。同时，针对患者的病理状态分析，p185蛋白阳性率含量水平与患者的组织分级、TNM分期及淋巴结转移呈正相关，提示在未来的诊断及治疗效果分析中，可将p185蛋白阳性率作为患者的指示性标准。许蓓妮等[19]通过对乳腺癌患者的p185蛋白阳性率进行分析发现，患者的血清p185蛋白阳性率与肿瘤临床分期显著相关，本研究与其相互印证。

在乳腺癌患者的肿瘤增殖过程中，周边的毛细血管大量增殖，且此类毛细血管与正常组织的毛细血管相比，畸形率较高，导致患者的血清TSGF含量显著升高。本研究中，相比健康人群，乳腺癌患者的TSGF水平显著升高，且随着疾病的不断进展，TSGF水平呈现上升趋势。本研究发现，淋巴结转移情况及病理分期与乳腺癌患者的TSGF水平呈显著相关性。黄远生等[20]在对乳腺癌的诊断中，使用TSGF作为诊断指标，发现其对乳腺癌患者具有较高的诊断灵敏度，本研究与其相互印证。

人体的乳腺和甲状腺同属于激素应答类器官，内分泌功能的改变会导致患者的相关器官出现相应的变化。在肿瘤患者中，甲状腺激素对于患者的局部病灶组织的新陈代谢水平具有一定的指示性作用，通过检测患者的TSH水平，可在一定程度上反映肿瘤患者的疾病活动情况，对于肿瘤细胞的增殖过程有一定的监控作用。本研究中，随着患者肿瘤程度的进展，患者的TSH水平呈现显著上升趋势。曾斌等[21]通过对患者的甲状腺激素以及乳腺癌的相关性分析，发现患者的甲状腺激素水平与乳腺癌的病理程度显著相关，本研究结果与之一致。

另外，通过对患者的联合检测进行分析，发现其ROC曲线下面积显著高于单独检测TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率的诊断效能，尤其诊断灵敏度及阳性预测值提高，提示在临床中，三者的联合检测可为乳腺癌的筛查提供可靠的依据。国外有研究报道指出，通过对患者的核酸物质以及特异性蛋白水平进行联合检测，对乳腺癌患者的诊断具有积极的意义[12]。

乳腺癌患者的血清TSH、TSGF水平及p185蛋白阳性率与病理分期显著相关，未来有望作为诊断的依据,但总体而言本研究中的血清指标对乳腺癌的诊断特异度偏低，限制了其在临床使用过程中的确诊功能。由于本研究样本量较少，且为单中心数据，未对血清指标进行动态监测，限制了本研究结果的实际使用价值，但本研究为将来大样本前瞻性研究作了铺垫，为临床诊断提供了科学依据。