白小青, 张凤鸣, 陈 英, 涂 志

(1.重庆市畜牧科学院；2.农业部养猪科学重点实验室；3.重庆市养猪工程技术研究中心，重庆 402460)

分群分阶段精细化管理是现代养猪的一大特点.规模化猪场通常依据生理状态将母猪分为空怀期、妊娠期和哺乳期3个时期，而妊娠期又可细分为妊娠初期、妊娠中期和妊娠后期3个阶段.科学认识和了解不同时期不同阶段母猪的生理特点和免疫特性是实现精细化管理的前提和基础.动物血液的生理生化及免疫指标能直观地反映机体的生理状态、健康状况、代谢机能及免疫状态，是兽医临床诊断的重要依据.因此，研究不同生理状态下母猪血液生理生化及免疫指标的变化情况及其差异，对于探究母猪的阶段化生理生化及免疫特性，科学指导养猪生产有着重要的意义.以往围绕猪血液生理生化特性的研究，尽管涉及的地方猪品种广泛，但研究内容多集中于性别间的差异方面，研究结果也各不相同.如血液生理指标中的红细胞数方面，在荣昌猪中公猪高于母猪[1]，在滇南小耳猪中公猪低于母猪[2]，而在藏猪[3]和太湖猪[4]等猪品种中性别间无显著差异；血液生化指标中的葡萄糖含量方面，在荣昌猪中公猪高于母猪[1]，在安庆六白猪中母猪高于公猪[5]，而在莆田黑猪[6]、五指山猪[7]、合作猪[8]和皖南花猪[9]中未表现显著的性别差异.由此可见，同一血液生理生化指标性别间的比较具有明显的品种特异性.猪的免疫特性研究结果表明， 7～11周时猪的免疫系统已发育完全[10]，不同猪种间部分免疫性状存在明显差异[11]，且部分免疫性状与生产性状呈弱的正相关或负相关[12].目前，针对母猪不同生理状态下血液生理生化及免疫指标的差异化研究较少，仅限于磷、血清白蛋白等[13-14]少量指标.本试验拟通过对不同生理状态下荣昌猪母猪血液生理生化及免疫指标进行比较分析，从而获得荣昌猪母猪的阶段化生理生化及免疫特性基础数据，旨在为荣昌猪母猪的精细化管理提供参考.

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试验动物 在重庆市畜牧科学院荣昌猪国家级资源保护场保种核心群中随机选取56头7月龄以上的成年荣昌猪种母猪为试验动物.

1.1.2 仪器与设备 主要仪器与设备有Sysmex XT-2000i型全自动血液分析仪(日本东亚Sysmex公司)和Hitachi 7020型全自动生化仪(日本日立公司).

1.2 试验设计

将56头母猪按照生理状态划分为4组：哺乳期(产仔20 d至哺乳41 d)8头、妊娠初期(配种5 d至妊娠27 d)12头、妊娠中期(妊娠36～79 d)27头、妊娠后期(妊娠80～103 d)9头.妊娠期和哺乳期母猪分别饲养于妊娠舍和分娩舍.两舍结构类似，舍长均为46 m，舍宽均为11.2 m，顶棚均为保温彩钢，填充密度为18 kg·m-3，未吊顶.两舍均为双列式开放性猪舍，每舍有32个栏位，栏位宽4.5 m、长2.5 m.两舍均装有温度和湿度采集系统，每隔半小时记录一次温湿度.妊娠期母猪按消化能为12.75 MJ·kg-1、粗蛋白含量为13.85%的营养水平配制玉米—豆粕型日粮，4～5头为1栏小群饲养.哺乳期母猪按消化能为12.99 MJ·kg-1、粗蛋白含量为15.92%的营养水平配制玉米—豆粕型日粮，单栏饲养.试验猪均自由采食，自由饮水.饲养管理及免疫程序按猪场统一规定执行.

1.3 血样采集

试验猪分两批连续两天于上午7：00—9：00空腹前采血.两天采血期间分娩舍的平均温度分别为23.18和23.26 ℃，平均相对湿度分别为94.40%和92.02%；妊娠舍的平均温度分别为24.44和24.28 ℃，平均相对湿度分别为86.12%和84.44%.前腔静脉采血4～5 mL，其中的2 mL以EDTA.K2为抗凝剂制备抗凝血用于血液生理指标测定，其余非抗凝血经1 000×g离心20 min后分离获得血清，用于生化和免疫指标的测定.

1.4 指标测定

抗凝血送至重庆市荣昌区人民医院检验科测定白细胞数、红细胞数、血红蛋白含量、红细胞压积、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白含量、红细胞平均血红蛋白浓度、红细胞分布宽度标准差、红细胞分布宽度变异系数、血小板数、血小板平均体积、血小板压积和血小板分布宽度共13项血液生理指标.

按照血清常规操作测定谷丙转氨酶活性、谷草转氨酶活性、总蛋白含量、白蛋白含量、碱性磷酸酶活性、葡萄糖浓度、尿素浓度、总胆固醇浓度和甘油三酯浓度共9项生化指标及免疫球蛋白G含量和免疫球蛋白M含量2项免疫指标.

1.5 数据处理

应用SPSS 19.0软件，以生理状态为固定因子，在一般线性模型下进行单因素多因变量方差分析.数据以平均值±标准差表示，采用最小显著差数法(LSD)进行组间多重比较.

2 结果与分析

2.1 不同生理状态下荣昌猪母猪的血液生理指标

不同生理状态下荣昌猪母猪血液生理指标的测定结果见表1.主体间效应检验结果表明，13项生理指标中，白细胞数和红细胞分布宽度变异系数分别达到极显著水平(P<0.01)，红细胞分布宽度标准差达到显著水平(P<0.05)，其余指标均为不显著(P>0.05).多重比较结果表明:白细胞数以妊娠初期为最多，妊娠后期为最少，且妊娠初期极显著多于妊娠中期和妊娠后期(P<0.01)；红细胞分布宽度变异系数以妊娠后期为最大，妊娠初期为最小，且妊娠后期和妊娠中期均显著大于哺乳期(P<0.05)，极显著大于妊娠初期(P<0.01)；红细胞分布宽度标准差以妊娠后期为最大，妊娠初期为最小，且妊娠后期显著大于哺乳期(P<0.05)，极显著大于妊娠初期(P<0.01).

表1 不同生理状态下荣昌猪母猪的血液生理指标1)Table 1 Blood physiological parameters of Rongchang sows under different physiological status

1)同列数据后附不同大写字母者表示差异极显著(P<0.01)，附不同小写字母者表示差异显著(P<0.05)，附相同小写字母者表示差异不显著(P>0.05).

2.2 不同生理状态下荣昌猪母猪的血清生化指标

不同生理状态下荣昌猪母猪血清生化指标的测定结果见表2.主体间效应检验结果表明，9项生化指标中，谷丙转氨酶活性、白蛋白含量和碱性磷酸酶活性分别达到显著水平(P<0.05)，葡萄糖浓度和总胆固醇浓度分别达到极显著水平(P<0.01)，其余指标均为不显著(P>0.05).多重比较结果表明:谷丙转氨酶活性以妊娠后期为最高，妊娠初期为最低，且妊娠后期显著高于妊娠中期和哺乳期(P<0.05)，极显著高于妊娠初期(P<0.01)；白蛋白含量以妊娠后期为最大，妊娠中期为最小，且妊娠后期显著大于哺乳期(P<0.05)，极显著大于妊娠初期和妊娠中期(P<0.01)；碱性磷酸酶活性以妊娠后期为最大，妊娠初期为最小，且妊娠后期显著大于妊娠中期和哺乳期(P<0.05)，极显著大于妊娠初期(P<0.01)；葡萄糖浓度以哺乳期为最高，妊娠初期为最低，且哺乳期极显著高于妊娠后期、妊娠中期和妊娠初期(P<0.01)；总胆固醇浓度以妊娠后期为最高，哺乳期为最低，且妊娠后期显著高于妊娠中期和妊娠初期(P<0.05)，极显著高于哺乳期(P<0.01)，同时，妊娠中期显著高于哺乳期(P<0.05).

表2 不同生理状态下荣昌猪母猪的血清生化指标1)Table 2 Blood serum biochemical parameters of Rongchang sows under different physiological status

1)同列数据后附不同大写字母者表示差异极显著(P<0.01)，附不同小写字母者表示差异显著(P<0.05)，附相同小写字母者表示差异不显著(P>0.05).

2.3 不同生理状态下荣昌猪母猪的血清免疫指标

不同生理状态下荣昌猪母猪血清免疫指标的测定结果见表3.主体间效应检验结果表明，免疫球蛋白M含量达到极显著水平(P<0.01)，而免疫球蛋白G含量为不显著(P>0.05).多重比较结果表明，免疫球蛋白M含量以妊娠后期为最高，哺乳期为最低，且妊娠后期显著高于妊娠初期(P<0.05)，极显著高于哺乳期(P<0.01).同时，妊娠中期和妊娠初期均极显著高于哺乳期(P<0.01).

表3 不同生理状态下荣昌猪母猪的血清免疫指标1)Table 3 Blood serum immune parameters of Rongchang sows under different physiological status

1)同列数据后附不同大写字母者表示差异极显著(P<0.01)，附不同小写字母者表示差异显著(P<0.05)，附相同小写字母者表示差异不显著(P>0.05).

3 讨论

本试验测定的荣昌猪母猪13项血液生理指标中，生理状态对白细胞数等3项指标有显著影响，而对其他指标无显著影响.白细胞是非均一的血细胞群，包括中性粒细胞、嗜碱粒细胞、嗜酸粒细胞、单核细胞和淋巴细胞共5类细胞，其主要功能是参与机体防御反应.相对于非孕期而言，孕期妇女血液白细胞数会出现生理性的升高，且不同孕期间呈现先下降再上升的周期性变化规律[15].本试验结果表明，荣昌猪母猪的白细胞数在妊娠初期处于最高水平，至妊娠中期则显著下降，而妊娠后期和哺乳期均稳定在妊娠中期水平.这与妊娠30 d母猪白细胞数高于妊娠90 d母猪的兽医临床检测结果[16]一致.另有研究表明，妊娠期和泌乳期荣昌猪母猪的白细胞数均大于空怀期[17].

作为表征红细胞体积异质性的参数，红细胞体积分布宽度是红细胞体积大小离散程度的客观反映.红细胞体积分布宽度通常以红细胞体积分布宽度标准差和红细胞体积分布宽度变异系数的方式来表示.本试验结果表明，与妊娠初期比较，荣昌猪母猪红细胞体积的异质性在妊娠后期显著增加，而在哺乳期又回归到妊娠初期水平.临床大数据分析表明，孕期妇女随着孕期的增加，红细胞体积分布宽度变异系数常呈渐进性增大，而红细胞数和血红蛋白含量等呈进行性降低，妊娠期贫血的比率显著增高[18].随着妊娠期增加，胎儿需铁量增多及孕期血容量增加，储存铁逐渐耗尽，骨髓产生缺铁红细胞(低色素小红细胞)进入外周血，进而导致红细胞体积分布宽度上升，而红细胞平均体积下降，孕妇最终呈现小细胞不均一性贫血[19].

本试验测定的血清生化指标中，谷草转氨酶活性、总蛋白含量、尿素浓度和甘油三酯浓度在荣昌猪母猪不同妊娠阶段及哺乳期均无显著不同，谷丙转氨酶活性、血清白蛋白含量、碱性磷酸酶活性、葡萄糖浓度和总胆固醇浓度在不同生理状态下均有显著的差异.潘红梅等[20]在二元杂种母猪不同妊娠日龄间(30、60、90、110 d)曾发现谷草转氨酶活性和甘油三酯浓度无显著差异，且谷丙转氨酶活性、血清白蛋白含量、碱性磷酸酶活性和葡萄糖浓度也无显著差异.本试验中，与妊娠初期和妊娠中期比较，荣昌猪母猪在妊娠后期的谷丙转氨酶活性处于最高水平，而哺乳期又回到妊娠初期水平.血清白蛋白含量、碱性磷酸酶活性、葡萄糖浓度和总胆固醇浓度也呈现相似的变化规律.王宗元等[14]曾测定不同生理状态下太湖猪母猪的血清蛋白含量，发现相对于后备期后期母猪而言，妊娠初期的血清总蛋白含量和血清白蛋白含量显著下降，而至妊娠中期显著上升，妊娠后期和泌乳期均维持在较高水平.

碱性磷酸酶是一种含锌的水解酶，能水解各种磷酸单酯，是骨代谢常用的生化标志物之一[21].血清中的碱性磷酸酶来源于骨骼和肝脏，分别由成骨细胞和肝胆小管细胞合成、分泌.相对于非孕期而言，正常妊娠孕早期妇女血清碱性磷酸酶活性显著下降，孕中期又上升至非孕期水平，而孕后期又显著上升，即正常妊娠妇女血清碱性磷酸酶活性随着孕期的增加而显著上升[22].本试验结果表明，荣昌猪母猪血清碱性磷酸酶活性随着妊娠期的增加有上升的趋势，但仅在妊娠后期达到显著水平.另有碱性磷酸酶热保留率试验证实，妊娠后期(产前30 d至分娩)至哺乳期(分娩至产后30 d)母猪血清碱性磷酸酶的主要来源存在一个往复的变化过程，即母猪产前碱性磷酸酶从主要来源于肝脏逐渐变为主要来源于骨骼,产后又逐渐从主要来源于骨骼变为来源于肝脏[23].

本试验中，血清免疫球蛋白G含量在荣昌猪母猪不同妊娠阶段及哺乳期均无显著不同，该结果与二元杂种母猪不同妊娠日龄间无显著差异的结果[20]相一致.免疫球蛋白M是初次体液免疫反应中最早出现的免疫球蛋白，在感染初期发挥着先锋免疫作用[1].皖南花猪母猪各日龄阶段的血清免疫球蛋白M含量均显著大于同期的公猪[10]，此研究结果提示性别是影响免疫球蛋白M含量的一个重要因素.本试验中，荣昌猪母猪妊娠期各阶段的血清免疫球蛋白M含量均显著大于哺乳期，而妊娠后期显著大于妊娠初期，此结果提示生理状态也是影响免疫球蛋白M含量的另一重要因素.

4 结论

系统研究荣昌猪母猪血液生理生化及免疫指标在不同生理状态下的变化情况及其差异，证实生理状态显著影响荣昌猪母猪部分血液生理生化及免疫指标.