乔彦杰，张保军，梁小瑞，王丹阳，谷新利，刘贤侠

（石河子大学动物科技学院，新疆石河子 832003）

随着奶牛业的不断发展，不孕症防治引起更多重视，其中子宫炎是引起奶牛不孕症的病症之一。Tsousis等[1]报道，奶牛患子宫内膜炎会增加1.5 倍淘汰率；Goshen 等[2]报道，以色列奶牛患子宫内膜炎后其泌乳期产奶量平均降低300～500 kg，可见子宫炎严重影响奶牛的生产性能，易造成巨大经济损失。激素是动物内分泌细胞合成的一类化学物质，通过传递信息来调节组织细胞，从而影响动物机体的生理活动。雌二醇（E2）能诱发母畜发情，使子宫颈松弛开张，促进渗出物排出，使腺体分泌增加，防止子宫感染[3]；崔世泉[4]报道，黄体生成素（LH）可以促进黄体形成并维持黄体分泌雌激素和孕激素；祝晓丽[5]报道，促卵泡生成素（FSH）与E2、LH 的协同作用可促进卵泡发育、成熟、排卵。

健宫散是由石河子大学动物科技学院中兽医学研究室研制的超微粉散剂，采用活血化瘀、补血补气的原则，可调节机体内环境，促进机体恢复。健宫散配方中有益母草、桃仁、川芎具有活血祛瘀、活血行气作用[6-7]。本试验旨在研究健宫散对子宫炎奶牛E2、FSH、LH 的影响，探讨健宫散治疗奶牛子宫炎的作用机理，以期为中药防治奶牛子宫炎提供技术支撑，也为该药的临床应用提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计 试验于2017 年9 月—2018 年6 月在石河子西部牧业良繁中心奶牛场进行。选取18 头年龄、胎次、体况评分差异不显著的荷斯坦奶牛，通过50s 型Tringa Vet 兽用便携式B 超仪（荷兰Piemed ICAL 公司生产）检查，分为患病组、治疗组、正常组，每组各6头。治疗组平均年龄为5～6 岁，患病组平均年龄5～6 岁，正常组平均年龄为4～5 岁。正常组体况评分在2.8～3.8，其中2、3、5 胎各2 头。患子宫炎奶牛12 头，6 头作为治疗组，6 头作为患病组，其中2 胎和3 胎各3 头、4 胎和5 胎及6 胎各2 头，体况评分在2.9～4.5。

治疗组每日灌服中药健宫散400 g/ 头，患病组与正常组灌服生理盐水400 g/头。健宫散由益母草、当归、川芎、五灵脂、桃仁、甘草等中药组成。

1.2 试验方法

1.2.1 采血投药时间 治疗组在每天08:00—11:00 灌服健宫散400 g 1 次，连续1 个疗程（7 d）。治疗组灌服健宫散前通过尾静脉采血1 次（一次性采血管购自三门县民生医药有限公司），用药中期采血1 次（灌服中药的第3 天），灌服健宫散结束后第1、4、7、11、15、20 天各采血1 次，每次10 mL/头，共采血8 次。置于室温析出血清，收集血清-80℃超低温冰箱（美国赛默飞世尔科技公司生产）保存，待检。正常组、患病组则每天灌服无菌生理盐水400 g 1 次，灌药时间与采血时间同治疗组。

1.2.2 激素含量测定 采用双抗夹心ELISA 法检测血清E2、FSH 和LH 含量，检测试剂盒均购自上海蓝基生物科技有限公司。

1.3 统计分析 相关数据用SPSS 17.0 统计软件中的One-Way ANNOVA 的运算模块进行单因素方差分析，用Duncan's 法进行多重比较。结果以平均值± 标准差形式表示，以P＜0.05 表示差异显著。

2 结果与分析

由表1 可知，用药前正常组的E2水平与治疗组、患病组差异显著；用药中、停药后各时间点3 组之间E2水平差异显著。停药后1 d 患病组和正常组的FSH 水平差异不显著。3 组停药后4、7 d FSH 水平差异显著；停药后11 、15、20 d 治疗组FSH 水平高于患病组（P＜0.05）。用药前正常组LH 水平与治疗组差异显著，患病组与正常组、治疗组差异不显著；用药中、停药后1、4、7、11 d 3 组之间LH 水平差异显著；停药后15 d 治疗组LH 水平高于正常组、患病组（P＜0.05）；停药后20 d治疗组LH 水平与患病组、正常组差异不显著，患病组LH 水平与正常组差异显著。

健宫散治疗后，E2、FSH、LH 都显著上升，E2出现2 个峰值，即在停药后1 d 达到最高峰，峰值为1 438.33 pg/mL；停药后7 d 达到第2 个高峰，峰值为1 288.93 pg/mL；FSH 在停药后4 d 达到高峰，峰值为10.61 ng/mL；LH 在用药中达到高峰，峰值为14.74 ng/mL。其中治疗组E2、FSH、LH 的峰值显著高于正常组、患病组，而LH 的峰值比正常组、患病组峰值提前。

3 讨 论

3.1 健宫散治疗奶牛产后子宫炎的治则 中兽医认为，子宫内膜炎属湿热带下。湿为长夏之气，伤于湿者，带下污秽，黏腻停滞；热为阳盛所生，迫津液外渗，消灼阴液[8-9]。实际生产中由于奶牛围产期营养不良、产犊努责过度消耗、产后护理不当，会导致机体元气亏损、寒邪郁结、气血凝滞而发病[10]。根据中兽医辨证论治的理论，应理气化瘀、清热祛湿。中药复方健宫散采用活血化瘀、补血补气的原则，方中益母草、桃仁、川芎可活血祛瘀、活血行气，五灵脂可疏通血脉、散瘀止痛，当归能补血养血、活血止痛，甘草能补脾益气、清热解毒[6-7]。因此，健宫散可调节机体内环境，促进机体恢复，对奶牛子宫炎具有明显治疗效果。

3.2 健宫散治疗奶牛产后子宫炎的激素变化

3.2.1 中药复方治疗前后E2的变化 E2是生理活性最强的一种雌激素，可促进子宫平滑肌收缩，增加子宫血液循环和阴道内黏液的分泌，从而抵御外界细菌污染，提高子宫的免疫能力[3]。刘相洋[11]报道，奶牛E2水平在整个发情周期有2 次分泌高峰且伴大卵泡出现，分别在发情的第4 天和第12 天。高树等[12]报道，在奶牛的正常发情周期中E2有3～4次分泌高峰，到发情周期的后期E2分泌开始升高，接近排卵时达到峰值。魏学良[13]报道，奶牛产后5 周E2水平出现最高峰，为51.2 pg/mL；胡路锋[14]研究表明，奶牛子宫炎组E2水平在产后35 d 达到高峰660.49 pg/mL，而正常组E2水平在产后9 d 达到高峰645.11 pg/mL。本试验表明，患病组、正常组与治疗组E2水平高峰均出现在停药后1、7 d，且峰值显著高于前人[13-14]报道的水平，可能原因：①与直肠、B 超检查密集有关。通过直肠按摩奶牛内部生殖器官，能够改善局部血液循环与新陈代谢，增强有关激素的分泌，使生殖器官趋于正常活动，达到发情受孕的效果[15]；②营养情况、季节、胎次的差异[16]。有研究表明，胎衣不下是造成奶牛子宫炎的因素之一[17]，胎衣不下的奶牛血清中和胎盘中E2含量均低于胎衣正常排出的牛[18-19]。本试验表明，正常组E2水平显著高于患病组，与朱永刚等[18]、牟瑞营[19]研究结果一致，可能与部分奶牛存在胎衣不下有关。本试验中，治疗组用药前的E2水显著低于正常组，停药后E2水平显著高于患病组、正常组，表明中药复方健宫散具有升高子宫炎奶牛血液中E2含量的作用，这可能与健宫散方中含有益母草、甘草和当归等成分有关，通过药物互相作用，调控E2合成与分泌，从而达到免疫力增强的效果。王若光等[20]报道，益母草具有雌激素样作用，通过影响内源性雌激素合成及代谢过程，促进子宫恢复；陈蕙芳[21]报道，甘草兼有抗雌激素和雌激素活性功能，能影响雌激素代谢。体外甘草根提取物可促进E2与雌激素受体结合，在雌激素应答细胞中诱导转录活性，增强E2诱导的转录活性。邓毅等[22]研究发现，当归能显著提高大鼠血清E2浓度。

表1 中药复方治疗奶牛产后子宫炎对E2、FSH、LH 影响

3.2.2 中药复方治疗前后FSH 的变化 FSH 是垂体分泌的一种糖蛋白类激素，可调节性腺激素的合成和分泌，促进卵泡发育和排卵[23-24]。姚路连[25]研究了奶牛围产期血清FSH 水平的变化，发现在产后25 d FSH 水平达到峰值，为2.166 mIU/mL；高树等[12]研究了奶牛子宫复旧期间FSH 动态变化，发现FSH 在产后15 d 左右出现峰值，为7.74 mIU/mL；李桂芝等[26]研究发现在奶牛发情周期中FSH 水平出现2 个波峰，分别在第10～13 天（20.2 ng/mL）和第19～20 天（30.2 ng/mL）；魏学良[13]研究发现FSH 在产后2～3 周处于较高水平；胡路锋[14]研究发现正常组奶牛FSH 浓度在产后第21 天达到峰值，为1.52 ng/mL，而子宫炎组奶牛FSH 浓度在产后第15 天降至最低，而后缓慢升高。本试验中患病组、治疗组与正常组FSH 均呈现先上升后下降的趋势，FSH 水平均于停药后4 d 出现峰值，与魏学良[13]、胡路锋[14]报道一致。胡路锋[14]研究发现，产后13～25 d 正常组的FSH 浓度高于子宫炎组，与本试验结果一致，可能与健宫散中药有效成分黄酮有关。李炳奇等[27]研究发现黄酮能显著提高FSH 水平，增强垂体的内分泌功能，促进促性腺激素的合成和释放，利于卵泡的发育和卵巢的排卵。欧阳富龙等[28]研究发现复方中草药添加剂能提高围产期奶牛血清FSH、LH 水平。陈杨超等[29]研究发现益母草能显著促进FSH 分泌。

3.2.3 中药复方治疗前后LH 的变化 LH 是受下丘脑激素GnRH 调节，协同FSH 促进卵泡成熟并排卵的一种糖蛋白类激素[24]。魏学良[13]研究发现奶牛LH 水平在产后第3 周上升。高树等[12]研究奶牛子宫复旧期间LH动态变化规律，发现LH 从产后第21 天开始上升，到第24 天达峰值。姚路连[25]发现奶牛围产期血清LH 含量在整体上呈现逐渐下降的变化趋势，奶牛血清LH 含量从产前45 d 至产后10 d 缓慢下降，到产后20 d 急剧下降到0.108 mIU/mL，之后出现波动的变化。李桂芝等[26]对奶牛发情周期中生殖激素浓度与卵泡发育进行对比分析，发现LH 水平出现2 个波峰，波峰分别在发情周期中第1～2 天和第12～13 天。本试验表明，用药前治疗组与正常组LH 水平差异显著，正常组与患病组的LH 水平在停药后1 d 达到高峰，与前人[12-13]研究结果一致；而治疗组LH 水平在用药中达到高峰，峰值为14.74 ng/mL，且治疗组LH 水平显著高于患病组；用药后治疗组与正常组差异不显著。可能原因是健宫散作用于下丘脑-垂体-卵巢轴，促进FSH 和LH 的分泌，促进卵泡的成熟和排卵，使得卵巢分泌的E2与孕激素协同，发动下丘脑和垂体引起LH 释放触发排卵。

4 结 论

本试验中，中药复方健宫散可以促进性激素分泌，调节性激素代谢，提高E2、FSH 和LH 水平，因此对预防和治疗奶牛子宫炎起到一定的作用。