陈庚超 颜素娟

[摘要】本文建立了咸鱼中16种有机磷农药残留的超高效液相色谱串联三重四级杆质谱分析方法，线性范围在O.5～50ng/mL，线性相关系数均分布在0.991～0.999。本文前处理方法采用的是QuEC.hERS方法，该方法回收率在75.45～100.37%，结果表明，在处理咸鱼含有较多脂肪、蛋白质等复杂基质时，QuEChERS方法具有操作简便快速、准确率高、重复性好等优点，超高效液相色谱串联三重四级杆质谱的仪器方法与气相色谱法相比，具有灵敏度和准确度高的优点。[关键词]咸鱼;有机磷农药残留;QuEChERS;超高效液相色谱质谱联用

近年来，食品质量安全在我国引起了高度重视。咸鱼作为一种腌制食品，在加工过程中不法商贩为了防治蚊蝇、蛆虫等滋生会向咸鱼喷洒、浸泡有机磷农药，严重威胁广大人民的健康[1—2]。因此，建立准确、快速测定腌制类食品中有机磷残留的检测方法具有重要意义。国家标准关于肉制品中有机磷农药的前处理方法复杂，且除脂和净化效果不理想l 3】。近年来国际上最新发展起来的OuEChERS（Quick、Easv，Cheap、Effective、Rugged、Safe）方法是一种可应用食品中农药残留检测的快速样品前处理技术，此方法快捷简便，能将咸鱼样品中大量油脂去除，减少分析过程中的基质干扰[4]。超高效液相色谱串联三重四级杆质谱的仪器方法与气相色谱法相比，具有灵敏度和准确度高的优点。因此本文采用的QuEChERS前处理方法结合超高效液相色谱串联质谱法快速检测咸鱼中有机磷农药残留，具有重要的指导意义。

1 材料与方法

1.1 仪器

1290Ⅱ-6460型超高效液相色谱仪串联三重四级杆质谱仪：Agilent科技公司;ALY120型电子分析天平：日本岛津公司;Elmasonic P型超声波清洗器：德国Elma公司;Sigma 3k30型高速冷冻离心机：博励行仪器有限公司;Seven Easy pH汁：梅特勒一托利多仪器公司;ATR AutoVap S60型样品全自动氮吹仪：力德生物科技上海有限公司;Milli-Q型纯水仪：密理博公司。

1.2 试剂

甲酸、乙腈均为色谱纯：德国Merck公司;乙腈、丙酮、二氯甲烷、硫酸钠等均为分析纯：广州分析化学试剂厂;实验用水除特殊说明均为一级水;甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧乐果、久效磷、敌百虫、乐果、敌敌畏、杀扑磷、亚胺硫磷、甲基对硫磷、马拉硫磷、三唑磷、喹硫磷、倍硫磷、治螟磷、毒死蜱标准品的浓度均为lOOmg/L：农业农村部环境保护监测所。

1.3 标准溶液配制

准确移取上述16种标准品适量，用乙腈作溶剂，配置成l.OOmg/L的混合标准溶液，进一步配置成浓度依次为0.50μg/mL、1.00 μg/mL、-5.00μg/mL、10.00μg/mL、20.00μg/mL、50.00μg/mL的系列标准工作液。

1.4 样品前处理

准确称取制备好的咸鱼样品5.OOg，加入lOmL冰冻好的乙腈，混合摇匀或均质器匀浆，加入OuEChERS净化包的陶瓷均质子，加入Agilenl BondElut QuEChERS提取包（也可采用其他厂商的类似产品）。剧烈震荡3min后，在1000r/min、4℃条件下冷冻离心3～5min，之后移取上清液过0.22μm有机相滤膜，待上机测试[5—6]。

1.5 仪器条件

色谱条件：色谱柱AgilenlCl8（ 2.1×lOOmm），进样量lOμL，柱温45℃，流动相为0.2%甲酸水+乙腈，梯度洗脱程序见表1，流速为0. 3mL/min。

质谱参数：电喷雾离子源（ ESI），多反应检测MRM模式，离子对参数见表2[7]。

2结果与分析

2.1 线性范围及检出限

样晶经上机测试，在充分优化条件后得到浓度为10μg/mL的16种有机磷标准溶液的理想色谱图，具体见图1。

按1.3配制浓度为0.50ng/mL、l.OOng/mL、5.OOng/mL、lO.OOng/mL、20.OOng/mL、50.OOng/mL的混合标准系列溶液，按本方法分析，以16种有机磷农药浓度为横坐标，峰面积为纵坐标做线性回归方程[8]。本文所述方法在线性范围0.50～50.OOng/mL，16种有机磷农药残留的线性相关系数都很理想，均为0.991～0.999。在通过对各日标化合物的特征离子色谱峰信噪比（S/N）>10，可计算得到该方法各个目标化合物的定量检出限（ LOQ），具体见表3[9]

。2.2 精密度及回收率

称取不含待测组分的咸鱼样品50.Og共20份，其巾2份按照实验方法正常操作，另外18份分成3组，分别添加含有16种有机磷农药的混合标准溶液，制成1.00μg/kg、5.00μg/kg和20.00μg/kg的不同浓度的样品进行三水平六平行的添加回收试验。结果表明，16种有机磷农药的平均回收率为75.5%～100.5%，精密度为0.3%～2.O%（n=6），具体见表4[10-12]。

3 结论

本文采用QuEChERS前处理技术结合超高效液相色谱质谱联用的方法对咸鱼中16种有机磷农药进行检测，结果表明，该方法不仅具有前处理简单、操作方便、净化除脂效果好等优点外，还具有分离效果好、分析快速、检出限低、灵敏度和精密度高等特点，适用于对咸鱼中有机磷农药残留的检测。

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