王相子 徐小艳 开 妍 陈昌海 邱 冬

（江苏省动物疫病预防控制中心，江苏南京 210036）

为更好地了解我省种畜禽场主要动物疫病免疫效果，掌握我省主要动物疫病免疫抗体变化情况，为科学防控动物疫病提供技术支撑，我省结合实际情况，开展了2018年种畜禽场主要动物疫病定点监测工作。

1 材料与方法

1.1 样品采集

1.1.1 采样范围。在本省的11个县、区选取了畜禽养殖密集区、水网地区、流通频繁地区的18个种畜禽养殖场作为定点监测点，其中种鸡场9个，种鸭场1个，种猪场8个（表1）。

表1 定点监测点分布情况表

1.1.2 监测频次和样品数量。每季度（1月、4月、7月、10月）由定点场所在县兽医站负责采集一次样品，并集中送至省疫控中心检测。每场每次采集30份血清样品。

1.2 实验器材

单道、8道、12道移液器；96孔U型反应板；全自动移液器；100ml量筒；超纯水仪；全自动洗板机；酶标仪；恒温培养箱。

1.3 疫苗种类与免疫程序

1.3.1 疫苗种类。10个种禽场均免疫禽流感病毒（H5+H7）二价灭活疫苗，9个种鸡场免疫了新城疫弱毒疫苗或灭活联苗；8个种猪场中7个免疫了口蹄疫灭活疫苗，1个免疫了口蹄疫合成肽疫苗；8个种猪场均免疫猪瘟活疫苗和高致病性猪蓝耳病弱毒疫苗。

1.3.2 免疫程序。各种畜禽场均按农业农村部推荐免疫程序开展免疫，并要求在疫苗免疫21d后进行采样。

1.4 监测方法及试剂

1.4.1 禽血清采用血凝及血凝抑制（HA/HI）方法检测。高致病性禽流感以GB/T 18936-2003为检验依据，将抗体效价≥24判定为合格，否则判为不合格[1]；鸡新城疫以GB/T 16550-2008为检验依据，将抗体效价≥25判定为合格，否则判为不合格[1]。H5亚型高致病性禽流感抗原和鸡新城疫抗原均购自哈尔滨维科生物技术开发公司。

1.4.2 猪血清采用ELISA方法检测。O型口蹄疫抗体液相阻断ELISA检测试剂盒，购自农科院兰州兽医研究所；高致病性猪蓝耳病抗体检测试剂盒，购自武汉科前生物股份有限公司；猪瘟抗体ELISA检测试剂盒，购自北京爱德士元亨生物科技有限公司。

操作方法按试剂盒说明书进行，抗体阳性判为合格，否则为不合格。

2 结果与分析

2.1 全省检测结果

2018年全省分季度共开展4次定点监测。全年共检测样品6248份，其中H5亚型高致病性禽流感检测样品1164份，平均免疫抗体合格率为99.74%；H7N9流感1163份，合格率97.08%；鸡新城疫1045份，合格率100%；猪O型口蹄疫956份，合格率88.49%；高致病性猪蓝耳病960份，合格率97.60%；猪瘟960份，合格率80.42%（表2、表3）。

表2 2018年全省种禽场定点监测结果汇总表

表3 2018年全省种猪场定点监测结果汇总表

从表2、表3数据看，我省定点监测点主要动物疫病整体免疫抗体水平优良，所监测病种的平均免疫抗体合格率均高于农业农村部要求的70%标准[1]。

2.2 种禽场抗体情况

对10个种禽场的1164份禽血清样品进行了H5亚型高致病性禽流感免疫抗体检测，合格1161份，合格率99.74%；共检测H7N9流感样品1163份，合格1129份，合格率97.08%。从表2看出，此两种疫病平均免疫抗体合格率全年各季度均保持在90%以上的较高水平。但是以场点为单位来看，各场点的H5亚型禽流感抗体抗体水平较高（图1），而H7N9流感的抗体水平虽然整体也保持在较高水平，但是M县监测点二季度的抗体合格率仅为46.67%（图2）。经查，可能与该场点禽群进行禽流感二价苗二免后3天即进行采样监测有关。

对9个种鸡场的1045份鸡血清样品进行了鸡新城疫免疫抗体检测，合格1045份，合格率100%。

图1 H5亚型高致病性禽流感免疫抗体分析

图2 H7N9流感免疫抗体分析

2.3 种猪场抗体情况

对8个种猪场的956份猪血清样品进行了O型口蹄疫免疫抗体检测，合格846份，合格率88.49%。结合表3看，二季度的平均免疫抗体合格率最低，为81.25%。四个季度种猪场的平均免疫抗体合格率均高于80%，整体免疫抗体水平优良。但是以场点为单位看，存在场点间的合格率差异较大，抗体水平不均衡情况。其中A区、E区、M县的场点，均有部分季度免疫抗体合格率未达到70%，尤其是一、二、四季度中各场点的免疫抗体合格率离散度较高（图3）。

对8个种猪场的960份猪血清样品进行了高致病性猪蓝耳病免疫抗体检测，合格937份，合格率97.60%。全年四个季度的平均免疫抗体水平均高于90%，整体处于优良的免疫抗体水平。以场点为单位分析，所有场点各季度合格率均高于70%（图4）。

对8个种猪场的960份猪血清样品进行了猪瘟免疫抗体检测，合格772份，合格率80.42%。四个季度的平均免疫抗体合格率均高于70%，其中二季度的平均免疫抗体合格率最低，为71.67%。以场点为单位看，同样存在场点间的合格率差异较大，抗体水平不均衡情况。其中A区、E区、J县、K区、M县的场点，均有部分季度免疫抗体合格率未达到70%。以一、二、四季度场点的免疫抗体合格率离散度较高，整体情况与猪O型口蹄疫免疫抗体情况相似（图5）。

图3 猪O型口蹄疫免疫抗体分析

图4 高致病性猪蓝耳病免疫抗体分析

图5 猪瘟免疫抗体分析

3 讨论

3.1 我省主要动物疫病整体免疫抗体水平较高

2018年四个季度的定点监测中，我省种畜禽场主要动物疫病的平均免疫抗体合格率处于较高的水平，说明近年来我省的主要动物疫病防控能力仍保持较高水平，使用免疫程序合理，种畜禽场管理严格，为保障全省商品代畜禽养殖提供良好基础。

3.2 种畜禽场的免疫程序应根据抗体水平及时调整

从场点分析中能看出，部分场点的免疫抗体水平在四个季度的监测中呈现出一、三季度较好，二、四季度较差的波动态势。通过追溯这部分场点的免疫记录，发现该部分场点存在春秋季集中免疫，而平时不开展群体抗体水平调查，造成二、四季度免疫抗体合格率较低的情况。这样易使群体形成免疫空档，增加畜禽群出现疫病感染后爆发疫情的风险。种畜禽场应根据需要建立群体免疫抗体水平监控机制，定期检测养殖场内不同群体的抗体水平，根据检测结果及时调整免疫程序，填补免疫空档。

3.3 猪的O型口蹄疫和猪瘟防控不容忽视

尽管此两种病的平均免疫抗体合格率均高于70%，但是场群间存在合格率差异较大的情况。经调查，问题主要表现在：各养殖场的防控意识水平不一，免疫程序不符合场群实际情况；免疫接种剂量不足；猪群存在疫苗免疫空档等方面。针对这两种动物疫病免疫抗体水平差异较大的情况，种猪场应加强生物安全措施，根据场群实际情况调整猪群免疫程序及剂量，定期开展抗体监测，提高动物疫病防控能力。

3.4 群体感染免疫抑制病会影响疫苗免疫效果

除去疫苗免疫程序不合理、存在免疫空挡等问题，群体的野毒感染也会对疫苗免疫效果构成威胁。通过对监测猪群开展猪伪狂犬病gE抗体ELISA试验发现，部分猪瘟免疫抗体不合格的场群存在猪伪狂犬病gE抗体阳性较高的情况，原因可能是群体感染猪伪狂犬病，会抑制或干扰其他疫苗的免疫，使猪瘟疫苗的免疫应答下降[2]。

3.5 下一步应同步开展病原学监测

通过对这些场点长达一年的定点监测发现，即使是生产管理更规范、疫病防控意识更强的种畜禽场，仍然存在疫病防控问题。目前，血清学监测帮助我们很好的掌握了全省种畜禽场免疫抗体水平，提示相关场点及时调整免疫程序、定期加强补免，但场点的疫病感染情况、全省的病原分布情况等还不能通过定点监测进行掌握。下一步，应考虑在定点监测中对种畜禽场同步开展病原学监测，进一步掌握全省的疫情动态，为全省的疫病防控提供数据支撑。