原平玫 张爱萍 王卓亚 唐菁 栾希英

【摘要】 目的 探讨外周血白介素（IL）-27水平在糖尿病肾病（DN）不同时期的临床意义。方法 40例糖尿病肾病患者， 其中早期糖尿病肾病患者22例（早期糖尿病肾病组）、临床糖尿病肾病患者18例（临床糖尿病肾病组）， 纳入同期健康体检者20例作为健康对照组。检测所有受试者外周血IL-27以及血清肌酐（CREA）、尿素（UREA）、胱抑素C（Cys-C）水平， 分析IL-27在糖尿病肾病中的变化以及IL-27与UREA、CREA、Cys-C的相关性。结果 糖尿病肾病患者血清IL-27水平为（22.48±7.63）pg/ml， 明显高于健康对照组的（8.78±3.98）pg/ml， 差异具有统计学意义 （P<0.05）。临床糖尿病肾病组血清IL-27水平为（29.57±5.98）pg/ml， 明显高于早期糖尿病肾病组的（17.76±4.13）pg/ml， 差异具有统计学意义（P<0.05）。采用Pearson相关性分析发现， 糖尿病肾病患者的血清IL-27水平与Cys-C（r2=0.632， P=0.000<0.05）、CREA（r2=0.387， P=0.034<0.05）、UREA（r2=0.363， P=0.049<0.05）水平呈显著正相关。结论 糖尿病肾病患者外周血 IL-27 水平与UREA、CREA、 Cys-C呈正相关， 且随着糖尿病肾病病程进展升高， 提示其在糖尿病肾病病程中发挥一定的作用， 且四者联合检测在糖尿病肾病的评估中有一定价值。

【关键词】 糖尿病肾病;白介素-27;胱抑素C;肌酐;尿素

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.01.029

近年来我国糖尿病的发病率急剧增加， 由此带来的相关慢性并发症的发病率也在同步增长。糖尿病肾病（diabetic nephropathy， DN）是糖尿病主要的慢性并发症之一， 是一种较为常见的疾病， 也是导致终末期肾病的主要原因[1]。大量研究表明， 免疫和炎症反应机制在糖尿病肾病的发生发展机制中起着重要的作用[2]。IL-27是新近发现的炎症因子， 属于IL-12家族成员之一， 是由EB病毒诱导蛋白3和P28 亚基组成的异二聚体细胞因子[3]， 来源于活化的树突状细胞[4]， 具有促炎和抗炎双向调控机体免疫炎症反应的功能[5]， 一方面IL-27可通过诱导T细胞向Th1细胞分化促进干扰素-γ（INF-γ）产生而参与炎症反应;另一方面， IL-27通过抑制 IL-17 及促进 IL-10 的产生发挥巨大的抗炎作用[6]。本研究通过检测糖尿病肾病患者血清中的IL-27水平， 并与疾病相关指标血清CREA、UREA、Cys-C比较， 探讨其在糖尿病肾病临床诊断中的意义， 为临床糖尿病肾病的发病机制及防治提供相应的理论支持。现报告如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2017 年 7 月～ 2018年4 月烟台业达医院收治的糖尿病肾病患者40例。符合中国2型糖尿病（T2DM）防治指南（2013 年版）糖尿病肾病的诊断标准[7]， 依据尿微量白蛋白/尿肌酐（UACR）不同将患者分成早期糖尿病肾病组（22例）：UACR为2.5～30.0 mg/mmol（男）， 3.5～30.0 mg/mmol（女）和临床糖尿病肾病组（18例）：UACR>30 mg/mmol。排除标准：①1型糖尿病或其他糖尿病（β细胞功能遗传学缺陷、胰腺外分泌疾病、胰岛素作用遗传缺陷及药物所致糖尿病）患者;②妊娠期或哺乳期糖尿病患者;③糖尿病急性并发症、肝病、肿瘤等因素导致的肾功能损伤和原发性肾脏疾病患者。同期随机选取本院体检中心20例健康体检人员作为健康对照组， 其血压、糖尿病相关指标均正常， 无心、肝、肾等重要脏器疾病， 无内分泌及代谢疾病且无自身免疫性疾病史。

1. 2 方法

1. 2. 1 标本采集 所有受试者空腹8～12 h， 于清晨空腹抽取静脉促凝血3 ml， 3000 r/min离心15 min， 收集血清后-80℃冷冻保存备用。

1. 2. 2 检测方法 采用人IL-27 酶联免疫吸附试验 （ELISA）试剂盒（ABcam， 美国）， 通过ELISA测定血清IL-27水平;采用瑞士罗氏生化分析仪， 德赛尿素测定试剂盒， 通过谷氨酸脱氢酶法测定UREA;采用罗氏肌酐检测试剂盒， 通过苦味酸法测定CREA;采用金斯尔Cys-C试剂盒， 通过胶乳免疫比浊法测定Cys-C;采用美国艾利尔干式免疫散射原理定量检测微量白蛋白。

1. 3 统计学方法 采用SPSS19.0和GraphPad Prism 5软件进行统计和作图， 连续性变量资料经检测符合正态分布， 数据以均数±标准差（ x-±s）表示 ， 组间比较采用t检验， 相关性采用Pearson相关分析， P<0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2. 1 IL-27在糖尿病肾病患者血清中的水平 糖尿病肾病患者血清IL-27水平为（22.48±7.63）pg/ml， 明显高于健康对照组的（8.78±3.98）pg/ml， 差异具有统计学意义（P<0.05）（见图1-A）。临床糖尿病肾病组血清IL-27水平为（29.57±5.98）pg/ml， 明显高于早期糖尿病肾病组的（17.76±4.13）pg/ml， 差异具有统计学意义（P<0.05）。

2. 2 IL-27與UREA、CREA、Cys-C相关性分析 采用Pearson相关性分析发现， 糖尿病肾病患者的血清IL-27水平与Cys-C（r2=0.632， P=0.000<0.05）、CREA（r2=0.387， P=0.034<0.05）、UREA（r2=0.363， P=0.049<0.05）水平呈显著正相关（见图1）。

3 討论

糖尿病患者中有20%～40%发生糖尿病肾病， 是糖尿病患者肾衰竭的主要原因。早期糖尿病肾病的特征是尿中白蛋白排泄轻度增加（微量白蛋白尿）， 逐步进展至大量白蛋白尿和血清肌酐水平上升， 最终发生肾衰竭， 需要透析或肾移植， 给患者带来巨大经济负担的同时也使患者生活质量大大下降。目前研究表明， 糖尿病肾病以炎症细胞浸润， 粘附分子、炎症趋化因子和致炎因子表达增强， 血清C反应蛋白（CRP）水平升高为特征的微炎症[8， 9]。本研究发现， 糖尿病肾病患者血清IL-27水平高于健康对照组， 临床糖尿病肾病组血清IL-27水平高于早期糖尿病肾病组， 差异具有统计学意义（P<0.05）。糖尿病肾病患者外周血中IL-27的水平明显高于健康对照组， 且随着糖尿病肾病病程的进展IL-27的水平逐步增高， 进而提示IL-27可能参与了糖尿病肾病的发生、发展。采用Pearson相关性分析发现， 糖尿病肾病患者的血清IL-27水平与Cys-C（r2=0.632， P<0.05）、CREA（r2=0.387， P<0.05）、UREA（r2=0.363， P<0.05）水平呈显著正相关。可以推论在糖尿病肾病中， IL-27在糖尿病患者体内的高表达可能加速肾脏的衰竭， 其原理可能是：①破坏Th1/Th2 细胞比例失衡， 上调炎症反应应答;②促进炎症因子的分泌导致肾小球系膜细胞生长增殖， 细胞外基质增加、增厚和系膜区扩张， 促进糖尿病肾病的发生、发展。

综上所述， IL-27的变化水平可以提示临床患者的病程情况， 其改变对其疾病进展及治疗缓解有重要临床意义， 与UREA、CREA、Cys-C联合检测能更好的提示临床患者病程情况， 为更好地指导临床治疗、评估疾病预后提供参考价值。

参考文献

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[2] Navarro González JF， Mora Fernández C. The role of inflammatory cytokines in diabetic nephropathy. Journal of the American Society of Nephrology Jasn， 2008， 19（3）：433.

[3] Villarino AV， Huang E， Hunter CA. Understanding the pro- and anti-inflammatory properties of IL-27. Journal of Immunology， 2004， 173（2）：715-720.

[4] Rabe K， Hurd SA， Barnes P， et al. Global strategy for the diagnosis， management， and prevention of chronic obstructive pulmonary disease： GOLD executive summary. American Journal of Respiratory & Critical Care Medicine， 2007， 176（6）：532-555.

[5] Aparicio-Siegmund S， Garbers C . The biology of interleukin-27 reveals unique pro- and anti-inflammatory functions in immunity. Cytokine & Growth Factor Reviews， 2015， 26（5）： 579-586.

[6] 段玉青， 贾云泷， 刘丽华. IL-27双向调节T细胞研究进展. 中国免疫学杂志， 2013， 29（4）：430-433.

[7] 中华医学会糖尿病学分会. 中国2型糖尿病防治指南（2013年版）. 中国医学前沿杂志（电子版）， 2015， 7（3）：26-89.

[8] 冯英凯. 糖尿病肾病微炎症及其抗炎药物的研究进展. 中国药房， 2014， 25（1）：85-88.

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[收稿日期：2018-11-01]