陈荣伴 邹茂权 梁惠如 谭美仲 蔡美霞

急性髓性白血病是一种血液疾病，是由于骨髓积累大量白血病细胞，正常造血功能受到抑制，临床表现为贫血、发热、骨骼疼、出血等，具有较高的发病率[1]。引发白血病的因素有很多，如病毒因素、化学因素、放射因素等，随着人们生活方式与饮食方式的改变[2]，急性髓性白血病的发病率不断增加。机体在正常状态下，免疫细胞可对突变肿瘤细胞进行清除，促进机体维护正常的生理功能[3]，免疫功能与白血病发生与发展密切相关。对于发生白血病后的机体免疫细胞功能与细胞数量并非完全清楚，为了对此有更好的了解，本文将以我院2016年4月—2018年4月急性髓性白血病患者为对象，探究急性髓性白血病外周血T淋巴细胞亚群的研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年4月—2018年4月30例血液科急性髓性白血病患者，作为研究组，选取同期50例体检健康者，作为参照组。其中参照组患者中，男女患者分别为27例与23例，年龄为18～46岁，平均年龄为（32.73±5.35）岁。研究组患者中，男女患者分别为18例与12例，年龄为19～46岁，平均年龄为（32.89±5.21）岁。纳入标准：（1）资料齐全；（2）以1986年《全国血液学家综合国内外关于急性白血病分型》为诊断标准，研究组确诊为该疾病；（3）认知正常；（4）符合本次研究的标准，均熟知本次研究的标准，并表示自愿参加。排除标准：（1）研究组：药物过敏，精神障碍，其他恶性肿瘤；免疫性疾病；不配合研究者。（2）参照组：不配合研究者。在统计软件SPSS 19.0中将研究组和参照组患者的基本信息输入，组间差异无统计学意义，P＞0.05。

1.2 方法

检测方法：所有试验者晨起空腹，抽取3 mL静脉血，取无菌乙二胺四乙酸二钠抗凝管将其置入，混匀，并备用。于血氧采集后的2 h内，取无菌PBS缓冲溶液按照1∶1的比例对抗凝血进行稀释，对单个细胞核使用淋巴细胞分离液进行分析，取DMEM细胞培养液，将细胞浓度调整至2×106个/mL。随后，抽取上述的细胞悬液100μL，加入CD3抗体、CD4抗体、CD8抗体，在4℃的避光环境下静置0.5 h，进行离心操作，设定参数800 rpm，时间10 min，使用PBS缓冲液进行洗涤，共计2次，将上清取出，加入染色缓冲液适量，行上流式细胞仪进行分析。

1.3 观察指标

对比治疗前、完全缓解者、健康者的CD3+百分比、CD4+百分比、CD8+百分比，以及CD4+/CD8+比值，进行统计学分析。

表1 治疗前、完全缓解者、健康者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值比较 （±s）

表1 治疗前、完全缓解者、健康者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值比较 （±s）

注：研究组与参照组患者相比，t=8．108 7，6．821 9，6．358 9，3．303 7，aP＜ 0．05。研究组与完全缓解组患者相比，t=7．293 8，6．265 9，5．927 7，2．924 7，aP＜ 0．05

组别 n CD3+（%） CD4+（%） CD8+（%） CD4+/CD8+比值研究组 30 31．67±20．89a 18．27±12．69a 14．88±3．17a 1．23±0．87a参照组 50 64．82±15．51 40．43±14．82 24．37±7．78 1．79±0．64完全缓解 23 70．45±16．67 42．75±15．76 25．68±9．32 1．82±0．48

CD3+百分比、CD4+百分比、CD8+百分比：取标本放于高倍镜下进行观察，计数100～200个单数细胞核，对阳性细胞的百分率进行计算。

1.4 统计学方法

将研究中的各项数据结果输入软件SPSS 19.0进行证实，计数资料以（%）表示，组间予以χ2检验，计量资料以（±s）表示，组间予以t检验， P＜0.05，则表示差异有统计学意义。

2 结果

研究组30例患者在经过系列放疗后，完全缓解共23例。对比参照组与研究组的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值，研究组明显低于参照组，组间差异有统计学意义（P＜0.05）。对比参照组与完全缓解组患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值，组间差异无统计学意义（P＞0.05）。对比研究组与完全缓解组患者的CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值，研究组明显低于完全缓解组，组间差异有统计学意义（P＜0.05）。如表1。

3 讨论

白血病又称血癌，属于恶性肿瘤的一种，治疗困难，难以治愈，分为急性白血病与慢性白血病，其中急性白血病具有发病迅速、病程短等特点，慢性疾病病程长[4]。急性随性白血病的病因不明[5]，与多种因素有关，如病毒感染、化学物质、免疫功能、遗传因素、电离辐射等。大量临床实践表明，T淋巴细胞对肿瘤发生、发展与治疗具有重要作用。又有研究表明，急性随性白细胞患者多伴随T淋巴细胞亚群的数量改变与功能损害[6]。临床为此展开大量体外实验，表明CD4细胞能够非特异性或者特异性对肿瘤细胞进行杀死。不管免疫刺激因子是否存在，CD4细胞与白血病细胞放置于一起，并经过几天的孵育以后，均表现出特异性的抗白血病细胞毒的作用[7]。可对此结果证实的直接依据为淋巴细胞在去除后行骨髓抑制，白血病容易复发；在对骨髓移植后的复发者使用CD4淋巴细胞输注后，得到完全缓解。由此可得出，CD4细胞参与白血病的控制[8]，且具有重要意义。有研究提出，免疫缺陷患者极易并发肿瘤，高达10%，与白血病引发免疫功能异常可能存在相关性，对其发病机制、免疫监护功能障碍进行推测[9]，无法捕捉、消灭和区别与不正常细胞之间存在的关系。T淋巴细胞属于免疫效应细胞，也是免疫调节细胞，为细胞免疫中重要族群之一。临床以人体成熟T淋巴细胞表明的表达，将CD分子分为CD3+、CD4+、CD8+[10]，其数量与比值对免疫内环境维持稳定具有重要意义。

近年来，有研究表明，淋巴细胞参与了机体造血过程，血液病的发生与发展均对淋巴细胞亚群产生影响，使其发生变化。部分研究中显示，急性随性白血病患者的T淋巴细胞亚群存在改变，其中包括比例、功能与数量，这充分说明了髓性白血病患者的免疫功能存在缺陷[11]。

本次研究结果显示，研究组30例急性髓性白血病治疗前的CD3+、CD4+、CD8+、CD3+/CD4+比值低于50例健康者，组间差异有统计学意义（P＜0.05）；在经过系列化疗后，23例急性髓性白血病患者完全缓解，其CD3+、CD4+、CD8+、CD3+/CD4+比值明显高于治疗前，且与健康组相比，具有可比性。对此结果进行分析，急性髓性白血病患者机体免疫力表现为抑制，细胞免疫功能明显紊乱[12]，在病情缓解的同时，T淋巴细胞亚群数量逐渐恢复，直至正常。由此可见，急性髓性白血病病情与T淋巴细胞亚群数量与比例存在相关性，同时T淋巴细胞亚群能够作为判断白血病抗肿瘤的免疫情况有效指标之一，促进患者免疫功能调节，从而辅助疾病治疗。

综上所述：急性髓性白血病T淋巴细胞亚群具有明显变化，在经过有效治疗后恢复正常，证明了白血病发生、发展与转归均影响细胞免疫。