试论ELISA技术在食品安全检测中的应用

2019-02-12陈霞

兽医导刊 2019年6期

陈霞

（河池市动物疫病预防控制中心，广西河池 547000）

食品安全问题是关乎国计民生的大事，不但会影响国民的身体健康与生命安全，对国家整体经济发展亦有所制约，ELISA技术属于免疫分析检测法，具有可靠性高、灵敏度高、操作简便等优势，目前广泛应用于农药残留、食品添加剂、畜产品微生物与生物毒素等项目的检测中，该技术的应用对于保障食品安全具有重要意义。

1 ELISA技术概述

ELISA技术，即enzyme linked immunosorbent assay，汉译为酶联免疫吸附技术。ELISA是20世纪60年代在组织化学与免疫荧光相结合的基础上被开发出来的新技术，ELISA技术是现阶段发展最快、使用范围最广的酶免疫技术。ELISA技术应用原理是把可溶性抗原或者抗体吸附到固相表面，同时保证抗原或者抗体的免疫活性，只有这样才能在化学反应后，仅通过固相洗涤，就能实现分离抗原或者抗体的目标，操作十分简便。

2 ELISA技术在食品安全检测中的应用分析

2.1 应用于检测食品添加剂与违禁用剂

使用ELISA技术检测包装食品添加剂是否违规的相关研究日益增加。具体而言，应用ELISA技术检测食品用剂包括下述几方面，一是检测食品中是否添加了苏丹红1号，直接将苏丹红1号作用于抗原，链接桥选择Sudan-C3-OVA中的OVA，然后将OVA与HRP相连，形成Sudan-C3-OVA-HRP，然后将单抗作为基础运用ELISA技术能够直接检测出苏丹红1号是否存在；二是采用黄原胶抗体，结合ELISA技术检测黄原胶。研究者通过对比检测多组烧烤酱与沙拉酱发现，黄原胶每组检测差异小于10%。另外，在应用ELISA技术方面还研究了检测食品中罂粟碱的可能性，发现引进样品稀释法进行检测具有良好的效果。由此可见，ELISA技术在检测食品用剂方面具有广阔的应用前景。

2.2 应用于检测畜产品微生物与生物毒素

（1）检测畜产品微生物

在保障食品安全方面，人们逐渐认识到了微生物的重要性，并逐步加强了对微生物的检测，畜产品极易被微生物污染。在检测实践中，应用EILSA技术检测畜产品微生物含量，通常能够检测出致病菌与一般污染，例如，某检测中心在监管鱼虾贝类养殖产业的过程中发现市场中大量鱼虾贝类产品都具有存在沙门氏菌污染的情况。对于这一现象，该检测中心使用了ELISA技术，希望能够防范鱼虾贝类产品与杆菌交叉反应。检测人员在实际工作中往往会受到多种因素影响，例如，复杂的检测环境，比方说检测大肠杆菌，在一般条件下难以培养出大肠杆菌，若改变条件进行培养有可能使其复苏，这会损害人体健康，因此，在检测该类微生物时要求较高且难度较大，一般技术难以满足检测需求，此时为了达到安全、高效、准确的检测目的，检测人员也可以采用ELISA技术，在短时间内通过固相载体吸附抗原实现对产品的检测，此法更科学安全有效。

（2）检测畜产品生物毒素

畜产品中含有生物毒素的根源在于食物链的作用，生物毒素对人体生命健康的威胁较大。使用ELISA技术能够发现致病生物毒素，例如，真菌毒素、藻类堵塞等。ELISA技术在检测生物毒素方面应用研究较为完善，技术应用效果良好，在检测工作中需要根据检测毒素的种类选取有针对的ELISA试剂盒。例如，检测黄曲霉素，黄曲霉素是畜产品中最为普遍的生物毒素，对人体危害较大，选择ELISA技术检测该毒素，早在1998年的检测实验中就得出仅需要2h左右就可以准确判断出产品内是否含有该毒素。该检测结论为后续ELISA技术在检测生物毒素方面的应用奠定了良好的基础。

3 应用于检测转基因食品

在检测转基因食品方面，目前美国FDA已经开发出使用双夹心ELISA技术检测转基因玉米产品。以检测转基因玉米为例，ELISA试剂盒具有检测Cry9C蛋白的功能，应用ELISA技术将CP4-EPSPS与抗体相结合，可得出检测结果。在检测大豆转基因方面，13个欧盟成员国与瑞典总计37个实验室表明，检测大豆转基因的准确度高达99%。ELISA分析检测技术较传统分析检测技术灵敏度更高、特异性更强，且对设备要求不高、检测成本低、自动化程度高。但是ELISA技术从学科角度看，其综合性较强，需要多种学科支持，在部分领域还存在问题。第一，由于待检测物质含量低、存在交叉反应，许多物质需要和OVA、BSA等物质结合后才拥有免疫原性，且并非所有物质都能够制出抗体，ELISA技术受到检测物质本身的制约；第二，ELISA技术自身不足，制备特殊抗体难度大，例如，制备单克隆抗体需要大量时间，且在反应条件、反应时间、酶标板等方面要求较高。另外，应用ELISA技术检测成分有限，对试剂要求高，检测人员必须认识到pH值、溶剂等因素对ELISA技术的影响。