朱立娜 唐源 黄初军

[摘要]目的 探讨白介素-17（IL-17）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在慢加急性肝衰竭（ACLF）患者中的作用。方法 选取2015年1月～2018年6月在本院住院治疗的59例肝损伤患者作为对照组，59例ACLF患者作为观察组。ACLF患者根据疾病分期进一步分为早期组（20例）、中期组（20例）、晚期组（19例）3组。采用流式细胞仪方法检测所有患者的血清IL-17、IL-6及TNF-α的浓度并进行比较。结果 观察组血清IL-17、IL-6及TNF-α的浓度高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。ACLF不同分期患者的血清IL-17、IL-6及TNF-α浓度组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）;其中，晚期组的血清IL-17、IL-6及TNF-α濃度高于中期组及早期组，中期组血清IL-17、IL-6及TNF-α的浓度高于早期组，差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 IL-17、IL-6、TNF-α参与ACLF的发生与发展过程，是促进ACLF肝功能恶化的因素，并且其浓度高低与ACLF的分期相关。

[关键词]肝衰竭;白介素-17;白介素-6;肿瘤坏死因子-α

[中图分类号] R575.3          [文献标识码] A          [文章编号] 1674-4721（2019）12（c）-0044-03

[Abstract] Objective To investigate the effects of interleukin-17 （IL-17）， IL-6 and tumor necrosis factor-α （TNF-α） in patients with with acute on chronic liver failure （ACLF）. Methods A total of 59 patients with liver injury hospitalized in our hospital from January 2015 to June 2018 were selected as control group and 59 patients with ACLF as observation group. ACLF patients were further divided into early group （20 cases）， middle group （20 cases） and late group （19 cases） according to disease stages. The concentrations of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in all patients were detected by flow cytometry and compared. Results The concentrations of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in the observation group were higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. The levels of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in ACLF patients with different stages were different between groups （P<0.05）. Among them， the concentrations of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in the late group were higher than those in the middle group and the early group， and the concentrations of serum IL-17， IL-6 and TNF-α in the middle group were higher than those in the early group， the differences were statistically significant （P<0.05）. Conclusion IL-17， IL-6 and TNF-α participate in the occurrence and development of ACLF， which is a factor to promote the deterioration of ACLF liver function， and their concentrations are related to the stages of ACLF.

[Key words] Liver failure; Interleukin-17; Interleukin-6; Tumor necrosis factor-α

慢加急性肝衰竭（ACLF）是慢性肝病基础上发生的、短期内肝功能的急剧恶化，它是我国肝病的最常见死亡原因之一[1]。它是多因素作用的结果，主要有两个方面[2]：一是原发性损伤，包括免疫病理反应和近期加速肝功能恶化的因素;二是继发性损伤，即细胞因子等炎症介质对肝脏的连锁损伤效应。原发性损伤和继发性损伤叠加，导致大量肝细胞坏死，进而肝功能发生衰竭。促炎性细胞因子在肝功能恶化的加速期起到很关键的作用，既往研究显示促炎性细胞因子的浓度与肝损伤成正相关[3]，但白介素-17（IL-17）在ACLF中的作用研究较少。而白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）已证实参与肝损伤的发生、发展，是促炎性细胞因子。本研究对ACLF患者的IL-17、IL-6，TNF-α进行检测分析，进一步探讨IL-17、IL-6、TNF-α在ACLF的作用，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2015年1月～2018年6月在本院住院治疗的59例肝损伤患者作为对照组，59例ACLF患者作为观察组。观察组中，年龄34～69岁，平均（52.47±10.24）岁;男29例，女30例。对照组中，年龄39～73岁，平均（49.81±9.24）岁;男27例，女32例。两组的年龄、性别等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。其中观察组患者根据疾病分期进一步分为早、中、晚期组。早期组（20例），男12例，女8例;年龄（49.91±12.87）岁。中期组（20例），男11例，女9例;年龄（42.02±10.42）岁。晚期组（19例），男10例，女9例;年龄（45.63±11.52）岁。三组患者的年龄、性别等一般资料比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。纳入标准：患者诊断符合《肝衰竭诊治指南（2012年版）》[1]、《慢性乙型肝炎防治指南（2015版）》[4]的诊断与分期标准。排除标准：伴恶性肿瘤者;合并其他严重的全身性疾病和精神病患者。所有入选患者均签署知情同意书，且本研究经我院医学伦理委员会审核批准。

1.2方法

所有患者于入院后抽取空腹静脉血标本，经3000 r/min离心10 min，后取血清于-80℃超低温冰箱内保存待检。采用流式细胞仪方法检测患者血清IL-17、IL-6，TNF-α的浓度，所有流程按照说明书进行。

1.3观察指标

比较观察组与对照组及ACLF早、中、晚期组患者血清IL-17、IL-6，TNF-α的浓度。

1.4统计学方法

采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析，计量资料用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验，多组间比较采用F检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1观察组与对照组患者血清IL-17、IL-6、TNF-α水平的比较

观察组患者血清IL-17、IL-6及TNF-α的浓度均高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）（表1）。

2.2 ACLF不同分期患者血清IL-17、 IL-6、TNF-α水平的比较

ACLF不同分期患者的血清IL-17、IL-6及TNF-α浓度组间比较，差异有统计学意义（P<0.05）;晚期组的血清IL-17、IL-6及TNF-α浓度高于中期组及早期组，中期组的血清IL-17、IL-6及TNF-α浓度高于早期组，差异均有统计学意义（P<0.05）（表2）。

3讨论

ACLF是我国主要的肝衰竭类型[1]，ACLF发病仍主要由感染HBV引起，其发病机制十分复杂，尚未完全明确[5]。有研究表明肝衰竭发生发展过程中有大量的免疫细胞、细胞因子的参与[6]。以往研究发现，其对肝脏的损伤主要观点为“三重打击”学说[7-8]，即免疫损伤、缺血缺氧和内毒素血症。而细胞因子风暴在肝衰竭发生发展过程中起到至关重要的作用，不仅参与肝衰竭的免疫损伤过程，还参与缺血缺氧损伤及内毒素血症对肝细胞的打击过程，且与肝衰竭发展过程中肝细胞坏死和预后密切相关[9]。研究认为原发性肝损伤发生后出现内毒素血症，激活肝脏Kupffer细胞释放大量细胞因子（如：TNF-α、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17等）[10-12]，这些细胞因子在介导肝脏损伤的同时又进一步引起大量非特异性炎性细胞聚集于肝脏，从而对肝脏造成严重的二次损伤，同时出现了微循环障碍，即肝脏的缺血缺氧性损伤，最终导致肝衰竭。罗光成等[13]在ACLF患者中发现其IL-6、IL-8、TNF-α浓度明显增加，与患者的预后成负相关。这些细胞因子按功能可分为促炎细胞因子（IL-2、IL-5、IL-6、TNF-α、IFN-γ等）、抗炎细胞因子（IL-4、IL-10等）[14]。

近年来研究新发现Th17细胞是一类辅助性CD+4T细胞亚群，它受转化生长因子β（TGF-β）、白细胞介素-6（IL-6）和IL-23诱导分化，分泌IL-17[15-16]。IL-17A被认为是Th17细胞分泌的最具代表性的细胞因子。IL-17作为重要的炎症介质，主要通过刺激靶细胞释放前炎症细胞因子，诱导分化细胞因子IL-6、TNF等，促进炎症反应，IL-17在急性肝损伤中起促进作用[7]，有研究发现肝脏炎症反应与IL-17成正相关[17-18]，IL-6和TNF-α两者均是强效促炎细胞因子，肝细胞坏死程度与IL-6、TNF-α密切相关，IL-6、TNF-α的高表达，反应了肝衰竭严重程度和預后不良[3]。本研究结果显示，观察组IL-17、IL-6、TNF-α水平高于对照组（P<0.05），提示IL-17的作用与IL-6、TNF-α相似，均属于促炎性细胞因子，且IL-17、IL-6、TNF-α是ACLF发生、发展的促进因素。本研究结果还显示，在ACLF患者中，不同分期间存在统计学差异，晚期组的血清IL-17、IL-6及TNF-α浓度高于中期组及早期组，中期组的血清IL-17、IL-6及TNF-α浓度高于早期组，差异均有统计学意义（P<0.05），提示IL-17、IL-6、TNF-α促炎性细胞因子与ACLF的病情程度密切相关。

综上所述，IL-17、IL-6、TNF-α参与ACLF的发生与发展过程，是促进ACLF肝功能恶化的因素，其浓度与ACLF的分期相关，该结果与以往研究结果一致[19]。因此，临床上清除ACLF患者的炎性细胞因子IL-17、IL-6、TNF-α，对肝细胞功能恢复、病情缓解有很大帮助。可进一步观察IL-17、IL-6、TNF-α对ACLF患者预后的影响，为ACLF提供更多的治疗方法。

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（收稿日期：2019-06-13   本文编辑：李二云）