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高效液相色谱法同时测定蔬果中6种农药残留方法确认

2019-01-14 02:43:20 《吉林农业》 2019年24期

张佳音 王越

摘要:本文描述了用高效液相色谱法同时测定蔬果中的吡虫啉、多菌灵、除虫脲、灭幼脲、辛硫磷、阿维菌素6种农药残留的方法确认。结果表明,此方法标准曲线相关系数为0.99917~0.99999,方法检出限为0.006mg/kg~0.01mg/kg,相对标准偏差在0%~4.88%之间,平均加标回收率在97.8%~104%之间。本文提供了一种简便、高效的多农药残留检测方法,适用于大批量样品分析。

关键词:高效液相色谱;农药残留;同时测定;方法确认

中图分类号:TS255.7                                文献标识码:  A                    DOI编号: 10.14025/j.cnki.jlny.2019.24.038

1 仪器与材料

1.1 仪器设备

高效液相色谱仪带紫外检测器: LC 1260;电子分析天平: PL602E/02;匀浆机: FA25;水浴锅: XMTD-204;氮吹仪: TTL-DCII。

1.2 试剂材料

吡虫啉、除虫脲、灭幼脲、辛硫磷、阿维菌素标准品:农业部环境质量监督检验测试中心(天津),1000mg/L;多菌灵标准品:农业部环境质量监督检验测试中心(天津),500mg/L;乙腈、甲醇、二氯甲烷:色谱纯;水:纯净水;氯化钠:140℃烘烤4h;氨基柱;有机滤膜:孔径0.22μm;黄瓜。

2 方法

2.1前处理方法

将蔬菜水果样品充分粉碎混匀。称取35.0g,加70.0mL乙腈,高速匀浆1min~2min,经滤纸过滤,将滤液完全收集到装有6g氯化钠的100mL具塞量筒內,剧烈震荡使其充分萃取,室温下静置20min~30min,吸取10.0mL上层有机相溶液,转移至50mL烧杯中,放入水浴锅中70℃蒸发至近干,加入2.0mL甲醇+二氯甲烷(5+95),待净化。

用4.0mL甲醇+二氯甲烷(5+95)预淋洗氨基柱,弃去淋洗液,立即加入待净化溶液,将洗脱液收集到50mL烧杯中,用4.0mL甲醇+二氧甲烷(5+95)洗烧杯继续洗脱,重复一次。将盛有10ml洗脱液的烧杯放入水浴锅中,温度37℃,蒸发近干,用甲醇+水(3+2)准确定容至5.0mL。混匀后,过有机滤膜,待测。

2.2 高效液相色谱仪测定条件

色谱柱:C18(3.0mm×250mm);流动相:甲醇+乙腈(7+3),水;柱箱温度:40.0℃;进样体积:10μL;流速:0.8ml/min;外标法定量。

流动相时间程序:0.00min,水相+有机相(40+60);7.00min,水相+有机相(40+60);13.00min,水相+有机相(20+80);19.00min,水相+有机相(10+90);30.00min,水相+有机相(5+95);30.01min,水相+有机相(60+40);35.00min,水相+有机相(60+40)。

3 方法确认实验内容

3.1 线性及校准确认实验

3.1.1 分析步骤 将农药标准溶液用甲醇稀释配制成浓度分别为0.0mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、0.8mg/L、1.0mg/L的混合标准溶液。按照2.2条件测定,测定结果以峰面积为纵坐标,浓度为横坐标绘制标准曲线,计算回归方程与相关系数。

3.1.2 结果 吡虫啉线性方程为y=64.5x,r=0.99917;多菌灵线性方程为y=30.7x,r=0.99990;除虫脲线性方程为y=39.6x,r=0.99997;灭幼脲线性方程为y=41.4x,r=0.99999;辛硫磷线性方程为y=32.4x,r=0.99995;阿维菌素线性方程为y=29.8x,r=0.99972。

3.2 方法检出限和方法定量限确认实验

3.2.1 分析步骤 在黄瓜样品中加入一定量的标准溶液,制成一系列低浓度的加标样品,经2.1前处理方法处理,按2.2条件测定。记录待测农药的信噪比,当信噪比为3∶1时,则该溶液浓度为方法检出限,当信噪比为10∶1时,则该溶液浓度为方法定量限。

3.2.2 结果 吡虫啉、多菌灵、除虫脲、灭幼脲、辛硫磷、阿维菌素的方法检出限分别为0.006mg/kg、0.01mg/kg、0.008mg/kg、0.008mg/kg、0.008mg/kg、0.009mg/kg,方法定量限分别为0.02mg/kg、0.035mg/kg、0.025mg/kg、0.025mg/kg、0.025mg/kg、0.03mg/kg。

3.3 方法精密度试验

3.3.1 分析步骤 在黄瓜样品中按下述方法进行加标:吡虫啉、多菌灵、除虫脲、灭幼脲、辛硫磷、阿维菌素6种农药设置一倍定量限、两倍定量限、十倍定量限3个添加水平,每个浓度做6个平行。经2.1前处理方法处理,按2.2条件测定,计算RSD。

3.3.2 结果 一倍定量限、两倍定量限、十倍定量限3个添加水平下,吡虫啉的RSD分别为2.38%、0.99%、3.01%;多菌灵分别为1.17%、1.17%、1.59%;除虫脲分别为2.99%、1.48%、2.99%;灭幼脲分别为2.01%、1.04%、0%;辛硫磷分别为2.04%、1.66%、2.15%;阿维菌素分别为4.88%、0.87%、1.76%。

3.4 方法加标回收试验

3.4.1 分析步骤 在黄瓜样品中按下述方法进行加标:6种农药设置一倍定量限、两倍定量限、十倍定量限3个添加水平,每个浓度做1个空白样品和3个加标平行样品。经2.1前处理方法处理,按2.2条件测定,计算加标回收率平均值。

3.4.2 结果 一倍定量限、两倍定量限、十倍定量限3个添加水平下,吡虫啉的平均加标回收率分别为110%、103%、103%;多菌灵分别为100%、101%、99%;除虫脲分别为101%、101%、100%;灭幼脲分别为103%、100%、100%;辛硫磷分别为104%、103%、104%;阿维菌素分别为97.8%、100%、97.8%。

4 结果与讨论

本文建立了高效液相色谱法同时测定蔬菜水果中吡虫啉、多菌灵、除虫脲、灭幼脲、辛硫磷、阿维菌素的含量,并进行了方法确认。结果表明,应用此方法同时测定6种农药分离效果好,标准曲线相关系数高、方法检出限及方法定量限低、方法精密度高、方法加标回收率良好。符合《实验室质量控制范围 食品理化检测》(GB/T 27404-2008)检测方法确认的技术要求。本方法具有前处理过程简单、可操作性强的特点,可以快速、准确的同时测定大批量蔬果中6种农药的残留量,在一定程度上有助于提升实验室农残检测的工作效率。

参考文献

[1]GB/T 27404-2008,实验室质量控制范围 食品理化检测[S].

[2]刘谦,颜红,等.蔬菜、水果中的吡虫啉、多菌灵和5种氨基甲酸酯类农药残留测定[J].农药科学与管理,2013,34(02):24-28.

作者简介:张佳音,硕士研究生,实习研究员,研究方向:农产品检测;王越,硕士研究生,助理研究员,研究方向:农产品检测。