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桔皮苷色谱条件改进探讨

2019-01-14 02:43:20 《吉林农业》 2019年24期

孙丽丽 于涛

摘要:本文探索了高效液相色谱法检测桔皮苷含量的色谱条件,通过对桔皮苷溶液紫外光谱的扫描结果,设定不同波长进行比对,并筛选出适合的波长;通过测定桔皮浸膏和桔红颗粒中桔皮苷含量,验证色谱条件的改进效果,为开展进一步分析提供理论依据。

关键词:紫外光谱;桔皮苷;实验研究

中图分类号:S816.2                                文献标识码:  A                    DOI编号: 10.14025/j.cnki.jlny.2019.24.035

桔皮苷,即维生素P黄酮类化合物之一,主要存在于柑橘属果实中,尤其是柑、橘、甜橙和柠檬等的果皮中含量较多。分离提取的桔皮苷精制品为白色粉末,微小针状晶体。桔皮苷能防治高血压、糖尿病、痔疮、坏血病等,同时具有抗菌、消炎、止痛等作用,其在医学、食品、化妆和运动营养等领域具有广泛的应用前景。

1材料与方法

1.1 样品准备

桔皮苷标准品,橘红颗粒,橘皮浸膏提取物。

1.2 主要试剂及仪器

流动相:甲醇、醋酸、水,色谱柱C18,岛津紫外检测器,普析TU-1901型紫外分光光度计。

1.3 样品处理

1.3.1 标准品溶液的制备 称取105℃干燥至恒重的桔皮苷标准品1.0000mg,置于100ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,移取1.50ml,置于10ml容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀得标准品溶液。

1.3.2 样品溶液的制备 取橘红颗粒(橘皮浸膏提取物),研成粉末,称取样品3.0000g,加甲醇15ml,超声处理15min,抽滤,反复提取5次,合并滤液,用少量甲醇分次洗涤容器,洗液滤入同一容量瓶中,加甲醇至50.00ml作为供试品溶液;移取出橘红颗粒(橘皮浸膏提取物)其他样品各5.00ml,各置于10ml容量瓶中,用80%甲醇稀释至刻度。

1.4 色谱条件

采用色谱柱C18(5μm, 150mm);流速1mL/min;柱温40℃;采用岛津LC-15C色谱工作站;进样量20μL。

1.5 实验方法

用紫外分光光度计测量桔皮苷的最大吸收波长:称取已干燥的桔皮苷标准品1.0mg,用甲醇溶解到100.00ml,移取5.00ml,置于50ml容量瓶中,加甲醇至刻度,在波长200~300nm范围内进行扫描。

2 实验结果

通过扫描紫外光谱可得出桔皮苷在波长283nm处有最大吸收峰。

2.1 流动相不同配比下,检测桔皮苷标准品

在波长为283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下进行检测,保留时间11.167min,峰面积:7938673.3。

在波长283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下进行检测,保留时间7.533min,峰面积:7760178.6。

在波长为283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下进行检测,保留时间5.883min,峰面积:8144820.3。

在波长为283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=50∶2∶50下进行检测,保留时间3.150min,峰面积:7412637.5。

通过流动相不同配比下检测桔皮苷标准品,可得在流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下,保留时间最合理,吸收峰强度最大,而当流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=50∶2∶50时,3分钟之内的色谱峰多为溶剂峰,故无参考价值。

2.2 流動相不同配比下,检测橘红颗粒

在波长为283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下进行检测,保留时间11.200min,峰面积:3001994.5。

在波长283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下进行检测,保留时间7.217min,峰面积:3351890.7。

在波长为283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下进行检测,保留时间6.117min,峰面积:2912005.2。

通过流动相不同配比下检测橘红颗粒,可得在流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下,保留时间最合理,吸收峰强度最大,色谱条件改进效果较好。

2.3 流动相不同配比下,检测橘皮浸膏提取物

在波长为283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=33∶2∶65下进行检测,保留时间12.883min,峰面积:1848281.8。

在波长283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=37∶2∶63下进行检测,保留时间7.650min,峰面积:13514011.2。

在波长为283nm,流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下进行检测,保留时间5.967min,峰面积:12657397.5。

通过流动相不同配比下检测橘皮浸膏提取物,可得在流动相配比为甲醇∶醋酸∶水=40∶2∶60下,保留时间最合理,吸收峰强度最大,色谱条件改进效果较好。

3 结论

本实验通过检测桔皮苷标准品筛选得到最适波长和最适流动相配比,并通过检测橘红颗粒和橘皮浸膏中桔皮苷的含量,进一步验证了色谱条件改进效果,测定结果稳定,有良好的重复性,为开展后续的分析提供理论依据。

参考文献

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[2]蔡梅超.HPLC测定橘红颗粒中柚皮苷的含量[J].化工时刊,2012,31:635-637.

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作者简介:孙丽丽,硕士,助教,研究方向:生物科学。