熊本华 谌伦富 陈 林 成国涛谈文辉 唐亚军 柴春利 杜华茂

(1. 重庆市蚕业科学技术研究院 重庆 400700， 2. 西南大学生物技术学院 重庆 400716)

蚕桑生产中消毒防病主要通过贯彻桑园管理，蚕前、蚕中、蚕后消毒等技术措施来实现养蚕无病高产的目标，目前消毒使用最多的是漂白粉、硫磺、甲醛、石灰，然而以上消毒药品存在如下弊端：漂白粉的强氧化性、腐蚀性会加快养蚕设施设备及蚕室的损坏速度，同时使用过程中产生的挥发性氯严重危害操作人员健康；硫磺在使用中产生的刺激性气味对人的呼吸系统会产生严重影响，它还属于公安部管控药品；石灰在使用过程中产生扬尘，极易吸入，危害健康。甲醛的毒害作用是众所周知。蚕业科研生产单位、蚕业工作人员、特别是广大蚕农迫切需求无毒、优质的消毒替代产品。为此，重庆市蚕业科学技术研究院与西南大学合作，探讨纳米银在蚕业制种过程中的消毒防病作用，现将试验结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 试验时间及地点

2017年春季(5-6月): 重庆市蚕业科学研究院第九蚕室。

2017年晚秋(9-10月): 合川原蚕基地，蚕桑专业合作社。

1.2 试验环境条件

蚕室蚕前消毒：用1%的漂白粉液浸泡蚕具并对蚕室及环境喷撒消毒；蚕具及蚕室用2%甲醛、硫磺熏烟消毒。对环境抽样镜检，无微粒子孢子检出算消毒合格。所有消毒工作在收蚁前7d完成。

1.3 试验设计

春季：以871，872为试验蚕种，每组10区。对照组是按常规消毒法，即桑叶用0.33%漂白粉浸洗(1-4龄)并脱水，蚕房每天用1%漂白粉液进行地面喷雾消毒，蚕体每天用石灰消毒。试验组仅用纳米银进行桑叶叶面喷雾消毒，每10kg桑叶喷1L纳米银胶体溶液(20mg/L),地面喷雾相同浓度的纳米银，每天一次，入眠时用焦糠除湿。

晚秋：以871、872为试验蚕种，对照组和试验组各20张原种。消毒方法与春季相同。

1.4 调查内容

春季：全龄经过、饲养及制种成绩、病蛾率检疫。

秋季：公斤茧颗粒数、饲养及制种成绩、病蛾率检疫。

2 试验结果与分析

2.1 春蚕全龄经过

2017年春季是首次用纳米银进行田间消毒试验，严格考查了消毒剂对家蚕龄期的影响(见表1)。调查结果显示，872的试验组在小蚕阶段(1-3龄)延长了52h，而在大蚕阶段(4-5龄)缩短了12h；871的试验组在小蚕阶段延长了72h，在大蚕阶段缩短了32h。这种情况在早期的小规模实验室添饲实验中没有出现，通过现场技术分析，主要原因是蚁蚕期饲养人员喷雾纳米银胶体溶液时剂量偏大，且喷雾后桑叶没有充分干燥，严重影响了蚁蚕发育和全龄经过。及时纠正后情况得到好转。大蚕阶段龄期缩短的原因还不明确。

表1 2017年春季试验各组蚕的龄期经过时间

2.2 饲养与制种成绩

春季试验饲养及制种成绩从总体上来看，纳米银消毒组上比常规的漂白粉消毒组差，主要表现为两个品种每公斤茧粒数分别增加了8.0%、11.0%，其中，872与此871的蛹重分别减轻了12.4%、4.0%；茧壳重分别减轻了15.3%、6.7%。就其原因可能是大蚕阶段缩短了13-36h。纳米银消毒组的死笼率比漂白粉消毒组高0.5%-2.5%，但发蛾率都达到99.0%左右。综合不良卵率与圈卵粒数，纳米银组依然略逊色于漂白粉组，872的正常卵数低1.0%，871的正常卵粒数低16.0% (见表2)。

表2 2017年春季饲养及制种成绩

2017年秋季在养蚕专业户进行了规模放大的对比试验，每组20张蚕种。本次试验没有发生龄期的影响，从结果来看，用两种不同消毒方法所饲养家蚕的生产性指标(包括公斤茧颗粒、健蛹率、茧层率、克蚁产茧量、公斤茧制种量等)无明显差异(见表3)。

表3 2017年秋季饲养及制种成绩

2.3 病蛾率检疫

分别将春、秋季各组的蚕制种，对一代杂交种按NY/T327-1997进行微粒子检验，结果见表4。检验结果显示，春季在重庆市蚕业科学研究院第九蚕室饲养的两个组蚕，制种后按22.2%抽样(共74个集团)，没有检出病蛾。秋季在养蚕专业户家饲养的蚕，制种后按12.2%抽样(共81个集团)，分别检出1、0、2、1个病蛾，但都小于NY/T327-1997规定的阳性域值3。所以，两批试验中纳米银消毒防微合格。

表4 母蛾集团检疫情况

2 讨论

纳米银是一种广谱的抗微生物材料，近30年来，大量的实验数据表明它对人源和动物源性细菌、真菌和病毒具有杀灭作用，特别是对耐药性细菌的杀灭作用引起业界的关注。纳米银已被广泛用于多种医疗植入性材料和烧伤敷料、包装材料、电子及日用品等。近年来，有学者报道纳米银对家蚕多角体病毒、白僵菌、粘质沙雷氏菌等有杀灭作用，本项目研究发现一定浓度的纳米银能抑制家蚕微粒子孢子出芽(另文报道)。因此萌生了将纳米银用于蚕业消毒，以替代对人和环境有较大影响的甲醛、硫磺、漂白粉等消毒剂。从实验室小规模饲养试验(结果未发表)及2017年春、秋两季的试验结果可以看出，对桑叶叶面和蚕室地面进行纳米银喷雾消毒，其防病效果接近目前广泛应用的消毒方法，但前者投入在消毒环节的劳动量较少，且干净轻松，无刺激性。除此以外，我们注意到纳米银消毒组公斤茧颗粒数增多，茧变小，这可能与5龄缩短有关，因为在实验室小试中并未出现该现象。两组间发蛾率、圈卵粒数和不良卵率三个指标因品种不同而表现不一致，暂不能分析其中原因，需要进一步试验。

本次试验未用纳米银作大面积的蚕前、蚕后的蚕室、蚕具及外周环境的消毒试验，也没有做详细的纳米银消毒经济成本分析。从环评的角度还应考虑纳米银在蚕沙中的蓄积量及处理办法。因此，今后需要反复试验，在传统蚕业消毒体系中整合上纳米银消毒环节，形成一个适合当代环保要求的新的家蚕消毒技术体系。