夏广清，臧 皓，张露云，3，刘 伟，薛长松

鹿角是我国常用中药之一，药典规定鹿角为鹿科动物马鹿和梅花鹿已骨化的角或据茸后翌年春季脱落的角基.研究表明，鹿角的药效类似于传统的珍贵药材鹿茸，但是药效相对比较温和，在一定意义上，为药物替代提供了一个很好的选择方向［1-2］.研究表明，鹿角中含有氨基酸、多肽和蛋白质等活性物质，对人体没有毒副作用［3］，并具有免疫调节、抗癌、抗疲劳、抗炎、镇痛、抗病毒、抗应激、抗氧化、降血糖、抗骨质疏松、活血化瘀及治疗乳腺增生的疗效［4-7］.由于鹿角具有良好的药用价值，使其成为我国医疗保健之良药，但是由于人们对鹿角的不够重视，使得其研究和开发利用的深度都比较有限，严重阻碍了鹿角产业的发展.因此丰富的鹿角资源亟待深入研究探索.

本研究采用水提法和醇提法对梅花鹿角成分进行提取，对其抗氧化作用进行研究，为进一步促进梅花鹿角产业的开发，更好利用梅花鹿角这一传统中药提供理论依据.

1 材料与方法

1.1 试剂与耗材

鹿茸及鹿角由通化市东昌区王馨梅花鹿坊提供，ABTS试剂盒（江苏碧云天生物技术研究所），其余试剂为分析纯.

1.2 方法

（1）成分含量测定.取不同鹿产品100g，干燥，粉碎，得到梅花鹿角及鹿茸粗粉，将粗粉用超微粉碎机粉碎，过400目筛，得梅花鹿茸及鹿角超微粉的粒径，用于成分含量测定［8］.

（2）抗氧化实验研究.鹿茸、鹿角粉各取2g，分别加入20mL蒸馏水和甲醇，水煎煮4h，甲醇回流提取4h后减压抽滤得滤液，水提取液于水浴锅上蒸干，甲醇提取物蒸干溶剂，称重，用于抗氧化实验研究.

（3）鹿茸及鹿角水提取物体外抗氧化实验研究.分别配制5～30mg/mL不同浓度鹿茸及鹿角水提取物，超氧阴离子自由基清除率采用邻苯三酚自氧化法进行测定，羟自由基清除率采用FeSO-4水杨酸法.

（4）鹿茸及鹿角水提取物及醇提取物ABTS实验.参照文献方法［9］，取5μL样品加入到96孔板中，加入200μL ABTS自由基工作液，混匀，置暗处反应20min.用酶标仪在734nm处测定OD值.每份样品平行3次，取平均值，计算出抑制率.

2 结果与分析

2.1 鹿茸及鹿角成分含量比较分析

将鹿茸、鹿角经干燥、粉碎等处理后，测定成分含量，结果见表1.

表1 鹿茸及鹿角成分含量

从表1可以看出，鹿角中多肽、钙、铁、锌和锰含量高于鹿茸，尤其是锌和钙含量，分别比鹿茸高87.2%和40.94%（同一品种间差异不显著）.此外，鹿角中还含有少量的多糖和氨基酸，推测鹿角的温肾补阳作用可能与这些微量的物质有关［2］.

2.2 鹿茸及鹿角水提取物对DPPH、超氧阴离子自由基和羟自由基清除率的影响

不同浓度鹿茸及鹿角水提取物对DPPH、超氧阴离子自由基和羟自由基清除率不同，总体而言，鹿角对自由基清除能力低于鹿茸，并且没有呈现出剂量依赖效应（见图1～3）.

图1 鹿茸及鹿角提取物对DPPH清除率

图2 鹿茸及鹿角提取物对超氧阴离子自由基清除率

图3 鹿茸及鹿角提取物对羟自由基清除率

从图1～3可以看出，鹿角提取液浓度超过25mg/mL对DPPH清除率最高为24.58%，并且高于同等浓度下鹿茸提取物对DPPH清除率；对超氧阴离子自由基清除率鹿角提取物在10mg/mL时达到最高，为26.05%，与同等浓度下鹿茸对超氧阴离子自由基清除率（26.34%）基本相同，而对羟自由基清除率则两者均在5mg/mL浓度下效果最好，为23.62%.对比体外抗氧化实验结果得知，相比于鹿茸而言，鹿角抗氧化值较低，可能是鹿角产品纤维化高，大部分的营养成分不能被提取出来，而样品浓度增加使杂质含量增加，导致吸光值的减小.

2.3 鹿茸及鹿角水提取物及甲醇提取物ABTS实验研究

为进一步探讨鹿角抗氧化作用的药理作用的有效物质，在获得水提取物不同浓度对自由基清除的基础上，以甲醇为溶剂，对鹿茸及鹿角有效成分进行提取，采用ABTS法比较分析0～10mg/mL浓度范围内两者抗氧化效果，结果见图4.

图4 鹿茸鹿角水提取物及醇提取物ABTS抗氧化活性比较分析

从图4可以看出，鹿茸和鹿角的甲醇提取物为10mg/mL时，有明显的抑制活性，抑制率均超过50%，并且鹿角醇提取物抗氧化活性表现出一定的剂量依赖效应.

3 讨论

鹿角是完全骨化的实心角，其中无机元素是其药效的物质基础之一，鹿角的药理活性与其中含量丰富的无机元素密不可分.研究者通过对梅花鹿角无机元素的测定发现，梅花鹿角中钙、镁、磷的含量非常高，同时富含铁、铜、锌、锰等必需微量元素［4］.此外，梅花鹿角中还含有丰富的氨基酸，张德昌等以梅花鹿角为材料，测定其总氨基酸含量达30.24%［10］.对梅花鹿角药理作用研究表明，梅花鹿角可通过提高机体抗氧化能力，清除衰老机体产生过多的自由基，抑制机体组织、细胞的抗氧化过程，使机体的各项生命体征得到改善，从而延缓衰老［11-12］.

本研究以鹿角为实验材料，对其化学成分进行比较分析研究，结果表明梅花鹿角中多肽及无机元素钙、铁、锌及锰含量比较丰富，这一结果与前人的报道基本一致.体外抗氧化实验结果表明，鹿角醇提取物抗氧化活性较高，但其有效成分及其作用机制还需进一步探讨.参考文献：

［1］赵向上，赵文静，旺建伟.鹿角的药理作用及临床应用研究进展［J］.中医药信息，2008，25（2）：23-25.

［2］汪银银，彭蕴茹，方泰惠，等.麋鹿角与鹿角对于阴阳虚证模型小鼠选择性作用的实验研究［J］.江苏中医药，2008，40（1）：84-86.

［3］曹胜男.药材鹿角的性状鉴定及其抗骨质疏松的活性研究［D］.长春：吉林农业大学，2013.

［4］包海鹰，王全凯，王晓霞.东北产4种鹿角的无机元素分析［J］.经济动物学报，2000，4（2）：27-29.

［5］岳文超，王庆国，王雪茜，等.鹿角类药材的活血祛瘀作用［J］.中华中医药杂志，2018，33（3）：1033-1035.

［6］季锡中，方志军，徐志愿.中药鹿角活性成分的探寻［J］.中成药，2009，31（4）：640-641.

［7］徐国兵，王峥涛.鹿角对大鼠乳腺增生模型的治疗作用［J］.中国药科大学学报，2006，37（4）：349-352.

［8］黄彬彬，赵越，葛红娟.鹿花盘营养成分及蛋白多肽提取工艺的研究进展［J］.吉林医药学院学报，2013（4）：305-308.

［9］张倩茹，曾阳，喇晓琴.翁布中酚性化合物体外抗氧化活性的研究［J］.华西药学杂志，2017，32（1）：34-36.

［10］张德昌，曹谷珍，唐兆义，等.麋鹿角与鹿角的生药学比较［J］.中国中医药信息杂志，2001，8（5）：36-38.

［11］聂淑琴，梁爱华，薛宝云，等.鹿角胶新老剂型壮阳、补血作用的比较研究［J］.中国中药杂志，1996，21（10）：625-628.

［12］蒙海燕.鹿茸及鹿角胶主要传统功效作用机理研究［D］.长春：长春中医药大学，2008.