胡 熠，周 伟，唐 艳，张进杰*，徐大伦，楼乔明，杨文鸽

（宁波大学海洋学院，浙江 宁波 315211）

可食性膜是以天然可食性物质（蛋白质、多糖、脂类等）为原料，添加可食用的活性功能成分，通过分子间的相互作用而形成的具有网络结构的薄膜，能够防止气体、水分和溶质等的迁移，保持食品质量，延长食品货架期，因而，可食性膜已成为食品保鲜与包装领域研究的热点[1]。明胶是由多种氨基酸组成且具有蛋白质结构的大分子，可由动物的骨头或皮肤胶原经过热变性或物理和化学降解得到，由于其无毒并且可降解等特性，在食品和医药领域得到广泛应用[2]。目前全球大部分明胶来源于猪、牛等哺乳动物，但由于携带致病因子的威胁等问题，导致此类明胶的应用受到限制[3]。因此寻找并开发新的明胶来源进行代替就显得尤为重要。

鱼类明胶是一种丰富、安全的胶原蛋白来源，尤其是鱼类在加工过程中产生的废弃鱼皮鱼鳞下脚料，都可进行进一步提取利用。目前，相关研究人员已从狭鳕鱼[4]、秘鲁鱿鱼[5]、罗非鱼[6]等鱼皮中提取明胶制膜并改性，证明鱼类明胶具有良好的成膜性。但目前国内外对鱼鳞明胶的成膜性能研究相对较少，Weng Wuyin等[7]在不同pH值条件下从罗非鱼鱼鳞中提取明胶制膜，研究所得明胶膜的性质；继而又研究了转谷氨酰胺酶和大豆分离蛋白对罗非鱼鱼鳞明胶膜的改性作用[8]。然而我国是一个渔业大国，其中罗非鱼的产量占据很大比例（2014年产量高达170万 t），加工过程中产生大量鱼鳞下脚料，约占全鱼质量的60%～70%，是很好的鱼鳞明胶来源[9]。

研究表明，不同来源的酚类化合物可与蛋白质发生相互作用或反应，使得明胶材料的凝胶或成膜性能得到改善[10]。Benbettaieb等[11]在鱼明胶膜中加入槲皮素和阿魏酸等多酚，发现膜具有较高的拉伸强度和断裂生长率；Musso等[12]制备了姜黄素牛明胶膜，发现其具有抗氧化活性。香豆素是自然界中很重要的一大类天然多酚，存在于黑香豆、香蛇鞭菊、野香荚兰及兰花中，实验研究发现其具有抗菌、消炎、抗肿瘤及抗氧化等多方面生物学活性[13]，且酚类化合物和蛋白质共价键产生的共价交联作用很强，热稳定性也更强[14]。但是，关于酚类化合物对鱼鳞明胶膜结构及其性能影响的报道很少。本实验以鱼鳞明胶为原料、甘油为增塑剂，添加具有蛋白交联作用的香豆素，制备鱼鳞明胶-香豆素可食性膜，主要研究添加香豆素对鱼鳞明胶膜结构及其性能的影响，为开发应用新型可食包装技术提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

罗非鱼鱼鳞明胶 广东欧帝玛生物工程有限公司；香豆素（纯度＞98%） 上海阿拉丁生化科技股份有限公司；甘油 国药集团化学试剂有限公司。

1.2 仪器与设备

78-1型磁力加热搅拌器、HH-4型数显恒温水浴锅 常州国华电器有限公司；DHG-9070AS电热恒温鼓风干燥箱宁波江南仪器厂；Jasco傅里叶红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy，FTIR）仪 日本分光公司；S-3400N扫描电子显微镜（scanning electron microscope，SEM） 日本日立公司；数显千分测厚规 上海川陆量具有限公司；200F3差示扫描量热仪（differential scanning calorimetry，DSC） 德国NETZSCH公司；5567万能材料试验机 美国英斯特朗公司。

1.3 方法

1.3.1 可食性膜的制作

将3 g明胶溶解在100 mL去离子水中，吸水溶胀20 min，然后于45 ℃加热并搅拌20 min制备3 g/100 mL单一明胶成膜溶液，再分别加入0、0.03、0.06、0.09、0.12、0.15 g/100 mL的香豆素，磁力搅拌20 min溶解混合均匀；再加入质量分数40%甘油作为增塑剂，将溶液再次于45 ℃加热并搅拌15 min。将成膜液4 000 r/min离心5 min脱除气泡；将20 mL成膜液倾倒入100 mm×100 mm的自制玻璃平板中，置于4 ℃冰箱，待成膜液成凝胶态时，放入25 ℃的鼓风干燥箱中干燥20 h，取出揭膜。将膜在25 ℃、相对湿度50%的恒温恒湿箱中放置48 h以平衡水分，再进行各项性能指标的测试[12]。

1.3.2 指标的测定

1.3.2.1 膜厚度测定

膜厚度采用千分测厚规进行测定，在每张膜的中心、离膜中心对称的四角等位置上随机取9 个点测定厚度，取平均值[15]。

1.3.2.2 含水量测定

称取一定质量的膜，置于105 ℃鼓风干燥箱中干燥至恒质量。含水量可根据两次质量之差计算求出，每组膜平行测定3 次[16]。含水量按公式（1）进行计算：

式中：mi为初始膜质量/g；mf为干燥后膜质量/g。

1.3.2.3 水蒸气透过率（water vapor permeability，WVP）测定

在5 mL烧杯中注入4 mL去离子水，用膜包覆杯口并用透明胶固定，置于含有无水硅胶（相对湿度0%）的干燥器中，10 h内每2 h用分析天平进行一次称质量。通过线性回归获得质量相对于时间变化的斜率[17]。WVP按公式（2）计算：

式中：WVP为水蒸气透过率/（（g·mm）/（kPa·h·m2））；ΔM为质量相对于时间变化的斜率/（g/h）；L为平均膜厚度/mm；S为封口膜面积/m2；ΔP为膜两侧水蒸气分压差/kPa；由于膜两侧环境湿度梯度为100%，ΔP=3.179 kPa（22 ℃）。

1.3.2.4 机械性能测定

膜的机械性能参照GB 13022—1991《塑料 薄膜拉伸性能试验方法》[18]采用万能材料试验机测定抗拉强度（tensile strength，TS）、断裂伸长率（elongation at break，EAB）和弹性模量（elasticity modulus，EM）。将膜裁剪成20 mm×50 mm的条状，初始夹距设定为30 mm，拉伸速率设定为30 mm/min。每组膜平行测定10 次。

1.3.2.5 透光度及透明度测定

参照Hosseini等[19]所述的方法：将膜裁剪成10 mm×40 mm的膜条贴于比色皿一侧，用空白比色皿作为对照。在200～800 nm波长范围内测定吸光度，测定透光度，确定膜对紫外和可见光的阻隔性能；在600 nm波长处测量吸光度确定膜的透明度。每组膜平行测定3 次。透明度按公式（3）计算：

式中：A600nm为600 nm波长处膜的吸光度；x为膜的厚度/mm。

1.3.2.6 DSC测定

参考Javidi等[20]方法略作修改。将待测膜在含有硅胶的干燥器中放置2 周以脱除水分。用分析天平称量10～15 mg样品，置于铝制坩埚中并压片封口，放入DSC中，空铝皿作为参照。N2作为保护气和吹扫气，流量分别为60 mL/min和20 mL/min。以10 ℃/min的升温速率从20 ℃加热到150 ℃。

1.3.2.7 SEM观察

参考Hosseini等[21]方法略作修改。取10 mm×40 mm膜样品，用液氮浸没之后人工折断，将样品黏贴于固定盘上，真空状态下喷金，置于SEM中，电子束加速电压为10.0 kV，观察膜截面微观结构（×900）和膜表面微观结构（×5 000），并拍照截图。

1.3.2.8 FTIR测定

膜在干燥器中放置2 周后，在20%相对湿度环境下，取剪碎的膜片0.2 mg，加入2 mg KBr在研钵中研磨，取适量进行压片，固定于样品架上，用FTIR在400～4 000 cm-1的波数范围进行全波段扫描测定吸光度，分析FTIR图确定鱼鳞明胶和香豆素之间的相互作用。

1.3.2.9 二级结构计算

对膜FTIR图进行傅里叶变换去卷积，利用PeakFit 4.11进行二阶导数拟合，得到子峰数目在8～12之间，其残差（r2）大于0.99。确认峰位归属，计算各分峰面积的相对含量。

1.4 数据分析

采用IBM SPSS Statistics 21进行数据分析，Duncan多重检验进行数据间的显著性差异分析，用Origin 9.0软件作图。

2 结果与分析

2.1 香豆素添加量对明胶膜厚度、含水量及WVP的影响

表1 添加香豆素对明胶膜厚度、含水量及WVP的影响Table1 Effect of coumarin on thickness, moisture content and WVP of gelatin fi lms

厚度是计算明胶膜WVP和机械性能的关键参数，主要依赖于制备方法、干燥条件及膜的成分组成和相互间的作用[22]。如表1所示，对照组明胶膜的厚度为95.33 μm，添加0.15 g/100 mL香豆素明胶膜厚为101.44 μm，随着香豆素添加量的增加，明胶膜的厚度变化并不显著。便于SEM观察膜横截面微观结构，本实验设置膜厚度约100 μm为宜。

含水量是明胶膜的一项重要特性，与截留在膜网络结构中的水分子密切相关。含水量在一定程度上反映膜内部明胶与香豆素的相互作用[21]。如表1所示，对照组明胶膜的含水量为12.75%。Fakhreddin等[17]制备的冷水鱼皮明胶膜含水量为13.24%，Li Jianhua等[23]制备的冷水鱼皮明胶膜的含水量为14.40%，与此鱼鳞明胶膜的含水量相当。在明胶膜中加入0.03 g/100 mL香豆素后，含水量提高到14.52%，之后随着香豆素添加量的增加，含水量逐渐降低。

膜的WVP受酚类物质中的羟基和明胶中多肽的极性基团共价键以及水分在膜中扩散行为的影响。此外，也与材料、混合相之间的相容情况以及膜的微观结构有关[24]。如表1所示，与对照组相比，添加香豆素明胶膜的WVP显著降低（P＜0.05）。在逐渐增加香豆素添加量的过程中，WVP先减小后增大，添加0.09 g/100 mL香豆素时WVP最小。可能是因为香豆素的加入，使得膜的结构更加紧密且存在有序的分散分子，改变了分子结构，从而降低了WVP。在明胶膜与不同添加量香豆素之间发生相互作用时，添加量为0.09 g/100 mL时二者相互间作用最强。

2.2 香豆素添加量对机械性能的影响

表2 添加香豆素对明胶膜机械性能的影响Table2 Effect of coumarin on mechanical properties of gelatin fi lms

如表2所示，TS和EAB是评价包装材料机械性能的重要指标，包装材料需要较强的机械强度以承受包装、物流过程中的压力。膜的机械性能的强弱与其结晶结构分子间作用力有关[25]。根据Kim等[26]指出包装膜的TS必须超过3.5 MPa的标准。香豆素明胶膜的TS在9.15～11.69 MPa范围内，不仅符合该标准，还远大于该标准。Musso等[12]在成膜液pH 6的条件下制备的纯明胶膜和姜黄素明胶膜的TS均为3.4 MPa；Li Jianhua等[23]制备的鱼皮明胶膜的TS高达23.42 MPa，加入绿茶提取物后明胶膜的TS降至20.79 MPa。添加0.09 g/100 mL香豆素后，复合膜的TS、EAB显著增加（P＜0.05），可能是因为香豆素与明胶分子间发生了相互作用，有利于明胶分子的规整排列，并使结构发生了变化。而添加0.12 g/100 mL和0.15 g/100 mL香豆素后，复合膜的TS、EAB却显著下降（P＜0.05），可能是因为香豆素添加量太高，空间位阻增大，减弱了水分子与蛋白质间的交联作用，从而造成TS、EAB的降低。EM表示单位应变所需的应力，反映包装膜的刚度。随着香豆素添加量的增加，EM逐渐降低（P＜0.05），形成了刚性较低的膜，改善了膜的弹性。

2.3 透光度和透明度分析

表3 香豆素明胶膜的透光度和透明度Table3 Light transmission and transparency of fi sh scale gelatin fi lms containing coumarin

如表3所示，在200～280 nm波长的紫外区内，对照组明胶膜的紫外透光度为0.98%～7.02%，这是因为鱼鳞明胶中含有带苯环的芳香族氨基酸，如苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸，对紫外吸收从而造成透光度低。这与Fakhreddin[17]、陈书霖[27]等研究的鱼皮明胶膜在紫外区的低透过率结果相一致。添加不同质量浓度香豆素复合膜的紫外光透过率更低，这是因为香豆素的苯环结构和不饱和键对紫外的吸收。由于紫外光能使食品发生劣变，尤其是脂质氧化，因此膜的透光度降低对食品有利。在可见光范围内（350～800 nm），对照膜的透光度为65%～85%，添加香豆素后导致膜的透光度逐渐降低。透明度随着香豆素添加量的增加呈现先降低后增加的趋势。

2.4 DSC分析

图1 香豆素明胶膜DSC图Fig.1 DSC thermograms of fi sh scale gelatin fi lms containing coumarin

从图1可知，单纯经甘油增塑的鱼鳞明胶膜的玻璃化转变温度（Tg）为62.24 ℃，略高于Fakhreddin等[17]的冷水鱼皮明胶膜的Tg值56.9 ℃和Jridi等[28]鱿鱼皮明胶膜的Tg值60.26 ℃。加入不同添加量的香豆素后，复合膜的Tg值不断升高，分别为64.10、66.00、66.65、67.25、67.81 ℃，可知香豆素明胶膜的变性温度高于单一组分明胶膜，这表明完全打断膜内化学键需要更高的温度，反映了膜内分子连接增强，明胶蛋白分子和香豆素之间形成了稳定的结构。Hosseini等[29]在明胶壳聚糖复合膜中加入牛至精油后，Tg值比对照组的Tg值升高了3 ℃，与本实验有类似的结果。

2.5 FTIR结果

图2 香豆素明胶膜FTIR图Fig.2 FTIR spectra of fi sh scale gelatin fi lms containing coumarin

由图2可以看出，未加入香豆素的明胶膜在3 358 cm-1（酰胺A带）对应于O—H键的伸缩振动，加入不同添加量的香豆素后，红外光谱吸收峰明显向低波数方向（3 323 cm-1）偏移，说明添加的物质之间存在氢键相互作用。2 940 cm-1和2 887 cm-1处分别是—CH2和—CH的伸缩振动峰，加入香豆素后振动增强，导致部分键能增强，可以造成复合膜力学性能的改变[30]。1 654 cm-1（酰胺I带，C＝O键的伸缩振动）和1 547 cm-1（酰胺II带，N—H键的弯曲振动）是明胶膜的特征峰[21]，且1 654 cm-1和1 547 cm-1处对应于芳香环骨架上的C＝C键振动，与香豆素属于芳香族化合物相吻合，表明其与明胶氨基间存在分子间作用力[31]。

2.6 SEM分析

图3 香豆素明胶膜截面及表面SEM图Fig.3 SEM of surface and cross-sectional images of fi sh scale gelatin fi lms containing coumarin

由图3可知，未加入香豆素的鱼鳞明胶膜，断裂截面组织不均匀，表层与内层不均一，表面出现褶皱及大的孔洞。这与Hosseini等[21]关于冷水鱼皮明胶膜的描述一致。加入0.03 g/100 mL香豆素后，复合膜的微观结构发生变化，截面平滑度增加，但膜中部明显见一裂纹；表面平整不一，依旧出现大小不一的孔洞，加入0.06 g/100 mL香豆素后，复合膜截面光滑紧致，但明显发生分层，且裂痕较宽；表面平整，孔洞减少。加入0.09 g/100 mL香豆素后，截面紧致，出现规则纹路，致密性较好；表面更为均一，孔洞大小一致且很小。说明香豆素与明胶分子结合良好，膜内分子排序有序性提高，因此导致其TS、EAB增大（表2）。随着香豆素添加量的继续增大，复合膜截面及表面变得粗糙，尤其加入0.15 g/100 mL香豆素后，复合膜截面及表面凹凸不平，沟壑纵横，因此导致其TS、EAB急剧降低（表2）。明胶与香豆素分子间相互作用，宏观上表现为机械性能上的改善，微观上表现膜的微观结构的显著区别。

2.7 蛋白质二级结构分析

图4 香豆素明胶膜二级结构相对含量Fig.4 Contents of secondary structures of fi sh scale gelatin fi lms containing coumarin

蛋白质分子在400～4 000 cm-1红外光谱区有若干个吸收带，其中酰胺I带的谱峰研究较为成熟[32]。酰胺I带（1 600～1 700 cm-1）是蛋白质分子骨架肽链羰基伸缩振动的红外吸收带，与蛋白的二级结构相关[33]。利用PeakFit 4.11软件将蛋白质酰胺I带的光谱图进行傅里叶红外去卷曲，求二阶导数进行高斯拟合分析，可以将蛋白质二级结构的谱峰分开。其中波数在1 600～1 639 cm-1处峰面积百分含量代表β-折叠结构，1 640～1 650 cm-1处峰面积百分含量代表无规卷曲结构，1 651～1 660 cm-1处峰面积百分含量代表α-螺旋结构，1 661～1 700 cm-1处峰面积百分含量代表β-转角结构[34]。由图4可知，加入0.03 g/100 mL香豆素后，β-折叠的相对含量由30%提升到44%，后随着香豆素添加量的增加，开始不断降低；无规则卷曲和β-转角在加入0.03 g/100 mL香豆素后相对含量明显降低，后随着香豆素质量浓度的增加逐渐升高；α-螺旋相对含量在加入0.06 g/100 mL香豆素时达到最大，后随着香豆素质量浓度的增加而不断减小。这可能是加入0.03 g/100 mL香豆素后，明胶蛋白链间甘油与香豆素发生相互作用，导致明胶链间氢键作用增强，使得与二级结构相关的峰由高波数向低波数转变[35]，因而较高波数的无规卷曲、α-螺旋、β-转角相对含量减少，而低波数的β-折叠相对含量增加。而当香豆素质量浓度增加至0.06 g/100 mL之后，由于香豆素中的羰基和羟基与明胶链的羰基和氨基发生相互作用，导致明胶链内部的羰基氧和氨基氮的静电相互作用以及羰基氧和氨基氢的氢键受到破坏，引发复杂的二级结构β-折叠、α-螺旋难以维持，从而转变为更多的简单形式的无规则卷曲和β-转角，如图4所示，香豆素添加量大于0.09 g/100 mL时，检测的蛋白二级结构中β-转角相对含量显著性增加，而β-折叠和α-螺旋相对含量显著性降低。

3 结 论

在鱼鳞明胶成膜基质中添加香豆素制备可食性膜，基本不影响明胶复合膜的厚度和含水量，但可有效改善明胶膜的机械性能，降低膜的WVP。SEM、DSC和FTIR检测发现，香豆素与明胶分子间有交联相互作用的发生，在香豆素0～0.09 g/100 mL添加量范围内，随着香豆素质量浓度的增加，香豆素与明胶之间的分子作用越强，明胶膜的内在结构越紧实均匀，膜表面越光滑紧致，膜的机械性能（TS和EAB）越优良。当香豆素添加量大于0.09 g/100 mL时，随着香豆素质量浓度的增加，明胶膜内蛋白二级结构进一步发生改变，导致复合膜机械性能和结构发生劣变，膜的整体品质逐渐下降。添加香豆素对明胶膜的透光度产生影响，在紫外和可见光范围内，增加了膜的阻光性，有利于防止包装食品的脂质氧化。多酚香豆素的添加可以优化明胶膜的品质，但香豆素与明胶的相互作用对明胶膜的优化作用存在一定的饱和度，综合本实验各指标变化结果可以看出，添加0.09 g/100 mL香豆素的复合明胶膜性能最优。

[1] 陈丽. 可食性狭鳕鱼皮明胶复合膜的制备、性质与应用研究[D].青岛: 中国海洋大学, 2009. DOI:10.7666/d.y1503213.

[2] 曹娜, 符玉华, 贺军辉. 明胶膜的制备及性能[J]. 华东理工大学学报(自然科学版), 2006, 32(10): 1192-1196. DOI:10.3969/j.issn.1006-3080.2006.10.011.

[3] 王书展, 陈复生, 杨宏顺, 等. 鱼明胶的功能特性与应用[J].明胶科学与技术, 2013, 33(3): 109-114. DOI:10.3969/j.issn.1004-9657.2013.03.001.

[4] 陈丽, 李八方, 赵雪, 等. 可食性狭鳕鱼皮明胶-壳聚糖复合膜的制备与性质[J]. 水产学报, 2009, 33(4): 685-691. DOI:10.3321/j.issn:1000-0615.2009.04.021.

[5] 刘俊豪, 杨文鸽, 黄珊. 响应面法优化秘鲁鱿鱼皮明胶-壳聚糖可食膜的制备工艺[J]. 核农学报, 2014, 28(12): 2215-2222.DOI:10.11869/j.issn.100-8551.2014.12.2215.

[6] 唐兰兰, 赵阳芳, 翁武银, 等. pH和双醛淀粉对罗非鱼鱼皮明胶膜性质的影响[J]. 食品工业科技, 2014, 35(1): 98-101.

[7] WENG W Y, ZHENG H B, SU W J. Characterization of edible fi lms based on tilapia (Tilapia zillii) scale gelatin with different extraction pH[J]. Food Hydrocolloids, 2014, 41(20): 19-26. DOI:10.1016/j.foodhyd.2014.03.026.

[8] WENG W, ZHENG H. Effect of transglutaminase on properties of tilapia scale gelatin films incorporated with soy protein isolate[J]. Food Chemistry, 2015, 169: 255-260. DOI:10.1016/j.foodchem.2014.08.012.

[9] 中国水产科学研究院. 中国渔业统计年鉴[M]. 北京: 中国农业出版社, 2015.

[10] CAO N, FU Y H, HE J H. Mechanical properties of gelatin films cross-linked, respectively, by ferulic acid and tannin acid[J].Food Hydrocolloids, 2007, 21(4): 575-584. DOI:10.1016/j.foodhyd.2006.07.001.

[11] BENBETTAÏEB N, KARBOWIAK T, BRACHAIS C H, et al.Coupling tyrosol, quercetin or ferulic acid and electron beam irradiation to cross-link chitosan-gelatin films: a structure-function approach[J]. European Polymer Journal, 2015, 67: 113-127.DOI:10.1016/j.eurpolymj.2015.03.060.

[12] MUSSO Y S, SALGADO P R, MAURI A N. Smart edible fi lms based on gelatin and curcumin[J]. Food Hydrocolloids, 2016, 66: 8-15.DOI:10.1016/j.foodhyd.2016.11.007.

[13] 张韶瑜, 孟林, 高文远, 等. 香豆素类化合物生物学活性研究进展[J]. 中国中药杂志, 2005, 30(6): 410-414. DOI:10.3321/j.issn:1001-5302.2005.06.002.

[14] 曹云刚. 植物多酚对肉蛋白氧化稳定性和功能特性的影响机理及应用[D]. 无锡: 江南大学, 2016.

[15] 陈珊珊, 陶宏江, 王亚静, 等. 葵花籽壳纳米纤维素制备工艺优化及其表征[J]. 农业工程学报, 2015, 31(15): 302-308. DOI:10.11975/j.issn.1002-6819.2015.15.041.

[16] HUI Y, XIAO L W, SHAN G G, et al. Physical, antioxidant and structural characterization of blend fi lms based on hsian-tsao gum (HG)and casein (CAS)[J]. Carbohydrate Polymers, 2015, 134: 222-229.DOI:10.1016/j.carbpol.2015.07.021.

[17] FAKHREDDIN H S, REZAEI M, ZANDI M, et al. Preparation and functional properties of fish gelatin-chitosan blend edible films[J]. Food Chemistry, 2013, 136: 1490-1495. DOI:10.1016/j.foodchem.2012.09.081.

[18] 国家质量监督检验检疫总局, 国家标准化管理委员会. 塑料 拉伸性能的测定总则∶ GB/T 1040.1—2006[S]. 北京: 中国标准出版社,2016.

[19] HOSSEINI S F, REZAEI M, ZANDI M, et al. Fabrication of bio-nanocomposite films based on fish gelatin reinforced with chitosan nanoparticles[J]. Food Hydrocolloids, 2015, 44: 172-182.DOI:10.1016/j.foodhyd.2014.09.004.

[20] JAVIDI Z, HOSSEINI S F, REZAEI M. Development of flexible bactericidal films based on poly(lactic acid) and essential oil and its effectiveness to reduce microbial growth of refrigerated rainbow trout[J]. LWT-Food Science and Technology, 2016, 72: 251-260.DOI:10.1016/j.lwt.2016.04.052.

[21] HOSSEINI S F, REZAEI M, ZANDI M, et al. Development of bioactive fish gelatin/chitosan nanoparticles composite films with antimicrobial properties[J]. Food Chemistry, 2016, 194: 1266-1274.DOI:10.1016/j.foodchem.2015.09.004.

[22] PEREDA M, PONCE A G, MARCOVICH N E, et al. Chitosan-gelatin composites and bi-layer fi lms with potential antimicrobial activity[J].Food Hydrocolloids, 2011, 25(5): 1372-1381. DOI:10.1016/j.foodhyd.2011.01.001.

[23] LI J H, MIAO J, WU J L, et al. Preparation and characterization of active gelatin-based films incorporated with natural antioxidants[J].Food Hydrocolloids, 2014, 37(1): 166-173. DOI:10.1016/j.foodhyd.2013.10.015.

[24] 彭勇, 李云飞, 项凯翔. 绿茶多酚提高壳聚糖包装膜的抗氧化性能[J]. 农业工程学报, 2013, 29(14): 269-276. DOI:10.3969/j.issn.1002-6819.2013.14.034.

[25] VAN DEN BROEK L A M, KNOOP R J I, KAPPEN F H J, et al. Chitosan films and blends for packaging material[J].Carbohydrate Polymers, 2015, 116(13): 237-242. DOI:10.1016/j.carbpol.2014.07.039.

[26] KIM Y J, LEE H M, PARK O O. Process abilities and mechanical properties of surlyn-treated starch/LDPE blends[J]. Polymer Engineering & Science, 1995, 35(20): 1652-1657. DOI:10.1002/pen.760352012.

[27] 陈书霖, 陶忠, 吴菲菲, 等. 鱼皮明胶蛋白膜的制备及其性质改良[J].集美大学学报(自然科学版), 2012, 17(5): 335-342. DOI:10.3969/j.issn.1007-7405.2012.05.003.

[28] JRIDI M, HAJJI S, AYED H B, et al. Physical, structural, antioxidant and antimicrobial properties of gelatin-chitosan composite edible films[J]. International Journal of Biological Macromolecules, 2014,67(3): 373-379. DOI:10.1016/j.ijbiomac.2014.03.054.

[29] HOSSEINI S F, REZAEI M, ZANDI M, et al. Bio-based composite edible films containing Origanum vulgare L. essential oil[J].Industrial Crops & Products, 2015, 67: 403-413. DOI:10.1016/j.indcrop.2015.01.062.

[30] 张赟彬, 王景文, 李月霞, 等. 薰衣草精油改善壳聚糖基食品包装膜的应用品质[J]. 农业工程学报, 2014, 30(2): 286-292. DOI:10.3969/j.issn.1002-6819.2014.02.037.

[31] STAROSZCZYK H, SZTUKA K, WOLSKA J, et al. Interactions of fi sh gelatin and chitosan in uncrosslinked and crosslinked with EDC films: FT-IR study[J]. Spectrochimica Acta Part A: Molecular &Biomolecular Spectroscopy, 2014, 117(1): 707-712. DOI:10.1016/j.saa.2013.09.044.

[32] 冯蕾, 李梦琴, 李超然. SPI挂面特性与其蛋白质结构特征的相关性[J].现代食品科技, 2014, 30(1): 55-62.

[33] DEFLORES L P, GANIM Z, NICODEMUS R A, et al. Amide I’-II’2D IR spectroscopy provides enhanced protein secondary structural sensitivity[J]. Journal of the American Chemical Society, 2009,131(9): 3385-3391. DOI:10.1021/ja8094922.

[34] DOGAN A, SIYAKUS G, SEVERCAN F. FTIR spectroscopic characterization of irradiated hazelnut (Corylus avellana L.)[J].Food Chemistry, 2007, 100(3): 1106-1114. DOI:10.1016/j.foodchem.2005.11.017.

[35] 高红艳, 蒋士龙, 莫蓓红, 等. 涂抹再制干酪中蛋白质的二级结构及其对质构的影响[J]. 中国乳品工业, 2009, 37(1): 36-39.DOI:10.3969/j.issn.1001-2230.2009.01.009.