高海涛 穆俊晌 张璞 王欣 赵京 张勋

[摘要] 目的 就罗格利酮针对糖尿病大鼠内耳组织血管内皮生长因子（VEGF）及细胞间粘附分子—1（ICAM-1）水平的影响情况加以分析。方法 该次研究共计纳入糖尿病大鼠50只（按照相同方式进行动物模型建立），由该院在2016年2月—2017年6月自行培养，任意选取组内25只大鼠，给予罗格列酮处理，即观察组。余下25只大鼠则未采取其他药物处理。采集两组大鼠内耳组织样本，针对其VEGF以及ICAM-1水平比较。 结果 在未处理前，两组大鼠在VEGF以及ICAM-1水平，差异无统计学意义（P>0.05）；而在使用罗格列酮处理后，观察组大鼠VEGF水平为（4.52±1.02）μg/L，对照组为（7.43±1.32）μg/L，差异有统计学意义（t=12.937，P=0.000）；在ICAM-1水平上，观察组为（1.34±0.24）μg/L，对照组则为（2.56±0.31）μg/L，差异有统计学意义（t=9.927，P=0.000）。 结论 罗格列酮可有效针对糖尿病大鼠体内VEGF以及ICAM水平进行控制，进而达到对糖尿病所导致内耳微血管病变治疗的效果。

[关键词] 罗格列酮；糖尿病；VEGF；ICAM-1

[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2018）03（a）-0017-03

Observation of the Effect of Rosiglitazone on the Expression of VEGF and ICAM-1 in the Inner Ear of Diabetic Rats

GAO Hai-tao， MU Jun-shang， ZHANG Pu， WANG Xin， ZHAO Jing， ZHANG Xun

Third Hospital of Hebei Medical University， Shijiazhuang， Hebei Province， 050051 China

[Abstract] Objective The effects of rosiglitazone on the levels of vascular endothelial growth factor （VEGF） and intercellular adhesion molecule-1 （ICAM-1） in the inner ear tissues of diabetic rats were analyzed. Methods A total of 50 diabetic rats （according to the same animal model） were set up in this study from February 2016 to June 2017， and 25 rats were selected and treated with rosiglitazone as the observation group. The remaining 25 rats were not treated with other drugs. Samples of the inner ear tissue of two groups of rats were collected and compared to their VEGF and ICAM-1 levels. Results In the untreated group， two rats in the VEGF and ICAM-1 level had no significant differences（P>0.05）；and in the use of rosiglitazone treatment， the level of VEGF group rats （4.52±1.02）μg/L， the control group （7.43±1.32）μg/L，the difference was statistically significant（t=12.937，P=0.000）。In ICAM-1 on the level of the observation group was （1.34±0.24）μg/L， the control group was （2.56±0.31）μg/L，the difference was statistically significant（t=9.927，P=0.000）. Conclusion Rosiglitazone can effectively control the level of VEGF and ICAM in diabetic rats， so as to achieve the effect of diabetic microangiopathy.

[Key words] Rosiglitazone； Diabetes； VEGF； ICAM-1

糖尿病屬于我国主要慢性疾病，且在居民不良生活习惯以及饮食方式等方面因素的作用下，糖尿病的发生率更以极快的速度在增加。目前，临床尚缺乏对于该症的根治对策，需要长时间借助药物针对血糖水平加以控制[1-2]。其中内耳血管病变最为常见，而该并发症诱发机制临床尚未形成统一定论。借助罗格列酮针对该症进行治疗已逐步在临床得到推广[3-4]。该次研究以2016年2月—2017年6月自行培养50只大鼠，针对该药在改善内耳组织VEGF及ICAM-1表达水平方面的作用加以分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

该次研究共计纳入糖尿病大鼠50只，任意选取组内25只大鼠，给予罗格列酮处理，即观察组。余下25只大鼠则未采取其他药物处理。采集两组大鼠内耳组织样本，针对其VEGF以及ICAM-1水平加以比较。从两组大鼠构成情况来看，对照组月龄为2～4个月，中间值为（2.43±1.02）个月，体重在176～223 g，中间值为（192.83±1.98）g。观察组月龄为2～3个月，中间值为（2.76±10.67）个月，体重在179～228 g，中间值为（191.67±1.98）g。以上基本数据对比可知一般资料差异无统计学意义（P>0.05）。

1.2 方法

动物模型制备，在饲养过程中，需要借助高糖饲料进行饲养，同时进行链尿佐菌素滴注，使用剂量控制在60 mg/kg，促使本组大鼠成为糖尿病大鼠。进行该次研究时，采集两组大鼠血液进行测定可知，两组大鼠空腹血糖浓度均在16.6 mmol/l以上。随后，对照组大鼠按照常规方式继续进行喂养。而观察组则需要使用罗格列酮（国药准字H20061297），使用剂量为2 mg/kg，喂养3次/d。持续进行14 d喂养后，对两组大鼠双侧颞骨进行获取。随后，在咬骨钳的作用下，将颞骨多余骨质进行去除。并借助乙二胺四乙酸二钠进行脱钙处理。大约10 d后，按照免疫组化常规流程针对内耳组织样本进行制定。借由90%乙醇进行约2 h浸泡，然后借助对应模具顺着耳蜗轴水平的位置进行包埋。在显微镜的作用下进行切片，厚度控制在6 mm左右，并用30%酒精展开漂洗，将其放置在温水中展开，附着在涂抹有聚萘氨酸玻片上。待12 h后，将切片借助PBS进行冲洗。待上述操作完成后，借助常规DAB显色试剂盒对切片进行染色，染色6 min左右，进行冲洗。最后，借助苏木素进行复染，达到对细胞核进行染色的效果，依次进行脱水、透明以及封片操作。随后借助高倍显微镜，针对两组切片中VEGF、ICAM-1水平进行测定。该次切片观察工作由该院具备多年临床经验医师2名共同进行，以保障该计数结果的准确性。

1.3 观察指标

在该次研究中侧重需要对两组大鼠内耳组织切片VEGF、ICAM-1水平展開统计[5]。

1.4 统计方法

该次研究过程中，涉及两组大鼠各方面数据都采用SPSS 19.0统计学软件展开统计，以均值±标准差（x±s）的形式对计量资料加以表示，行t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

结合检测结果可以发现，在使用罗格列酮前，观察组大鼠VEGF水平、ICAM-1水平上与对照组差异无统计学意义（P>0.05）。在使用罗格列酮后，观察组大鼠VEGF水平为（4.52±1.02）μg/L，对照组为（7.43±1.32）μg/L；在ICAM-1水平上，观察组为（1.34±0.24）μg/L，对照组则为（2.56±0.31）μg/L（P<0.05），见表1。

3 讨论

在多中因素的共同作用下，糖尿病于国内的发生率正以极快的速度在增加，现已发展成为威胁国内中老年群体健康的主要病症。临床尚无针对该症的特效治疗对策，在病症持续发展下，将诱发患者出现其他方面并发症，其中以听力受损发生率居高[6-7]。

在临床研究持续推进的情况下，糖尿病慢性多脏器并发症主要诱发因素已逐渐被探明，即神经病变、微血管病变。在微血管病变的作用下，将直接对患者毛细血管基底厚度进行影响，促使其出现异常增厚的情况[8]。早在黄辉[9]研究中已经发现，毛细血管基底层厚同样会出现在内耳中。在基底膜异常增厚的情况下，自然会影响到内耳血液供应，出现血流不畅症状，促使营养物质无法充分运输到内耳神经组织中，导致患者内耳细胞处于缺氧状态，最终影响到内耳功能，临床表现为听力下降。

血管内皮细胞生长因子，在本质上为二聚体糖蛋白，其功能主要表现在加快血管生成速度、针对血管通透能力进行改善的层面。具体来讲其生物功能侧重体现在以下几方面：①提升葡萄糖在内皮细胞中的转运效率。在高水平VEGF水平的作用下，葡萄糖运载体经由细胞质进入到细胞膜中，促使细胞膜内葡萄糖水平异常上升，进而导致患者出现各种糖尿病并发症。②使得白细胞异常激活，促使其异常释放大量的活性物质，导致患者出现局部出血的情况，并诱发新生血管的形成。③促使血管通透性异常增加，导致血浆蛋白出现外渗。在健康状态下，ICAM-1处于水平较低状态，而在炎性介质等因素的作用下，将促使其异常表达，并促使其参与到血管内皮细胞以及白细胞的渗出等过程中，促使炎症进一步发展。早在赵凯亮等[10]研究中已经发现，ICAM-1以及VEGF水平与糖尿病内耳微血管病变存在有一定联系。

结合临床治疗可知，借助罗格列酮针对糖尿病内耳微血管病变患者展开治疗已在临床得到普及。在药物本质上，罗格列酮需归属到噻唑烷二酮的范围中。在该药的作用下，可直接对细胞内部与糖代谢有关的蛋白质表达情况进行影响，进而达到加速葡萄糖转向细胞内部的速度，进而达到增加患者胰岛素敏感性的作用，最终达到对患者体内血糖水平控制的效果。在罗格列酮的作用下，可针对糖尿病患者ICAM-1表达情况进行抑制的效果，更能达到对单核巨噬细胞诱发动脉粥样硬化斑块的速度。当前，针对罗格列酮降低糖尿病患者体内ICAM-1水平的机制尚未有统一定论。

在该次研究中，该院就以50只糖尿病大鼠为主要对象，针对罗格列酮在糖尿病大鼠内耳组织中ICAM-1以及VEGF水平表达中的影响情况展开分析。在使用罗格列酮处理后，观察组大鼠VEGF水平为（4.52±1.02）μg/L，对照组为（7.43±1.32）μg/L，差异有统计学意义（P<0.05）；在ICAM-1水平上，观察组为（1.34±0.24）μg/L，对照组则为（2.56±0.31）μg/L，差异有统计学意义（P<0.05）。结合统计可以发现，在罗格列酮的作用下，可有效减少糖尿病大鼠内耳组织细胞中ICAM-1以及VEGF表达水平，能达到对内耳细胞血液循环情况进行有效改善。早在李素艳等[11]研究中同样指出，在罗格列酮的作用下，可将糖尿病患者体内VEGF水平降低10%左右，与该次研究基本相符。可将该药运用于对糖尿病内耳微血管病变患者的治疗过程中，针对其内耳血液循环情况进行有效改善，实现对患者听力的有效改善，间接起到促进该部分患者快速恢复，提升其生活质量的效果。

[参考文献]

[1] 李甜甜，吕霄，李伟.AM251对糖尿病视网膜病变大鼠ICAM-1及VEGF表达的影响[J].中国老年学，2015，35（14）：3816-3818.

[2] 肖成，李燕，何本求，等.益气活血化痰汤对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织VEGF和ICAM-1基因表达的影响[J].广州中医药大学学报，2016（1）：75-79.

[3] 陈晓铭，郑坤杰，吴美芬，等.罗格列酮对2型糖尿病大鼠胰腺PDX-1基因表达的影响[J].广东医学院学报，2015，33（2）：144-146.

[4] 李卉，张雨洁，姚蓝，等.基于血清药物化学技术的新疆金鸡菊抗糖尿病物质基础和作用机理研究——两色金鸡菊乙酸乙酯提取物对糖尿病大鼠视网膜VEGF和ICAM1表达的影响[J].新疆医科大学学报，2017，40（4）：411-414.

[5] 胡丽叶，宋光耀，朱旅云，等.2型糖尿病大鼠肝脏LOX-1、eNOS、PPARγ蛋白表达及罗格列酮的干预作用[J].临床误诊误治，2015，28（6）：109-113.

[6] 张瑶.祛风舒筋丸对佐剂关节炎大鼠免疫调节及VEGF、ICAM-1表达的影响[J].安徽医药，2017，18（4）：653-655.

[7] 陈争跃，余雄伟，聂振禹，等.罗格列酮对人腹膜微血管内皮细胞AQP1、VEGF-A及COX-2表达的影响[J].中国病理生理杂志，2015，31（1）：44-48.

[8] 李荟芹，李竞，秦莹，等.NF-κB抑制剂对糖尿病大鼠肾组织ICAM-1和VEGF表达的影响[J].临床肾脏病杂志，2009， 73（5）：226-228.

[9] 黄辉.罗格列酮对糖尿病牙周炎大鼠炎症反应的影响研究[J].中国全科医学，2014，17（6）：645-647.

[10] 赵凯亮，陈辰，余佳，等.罗格利酮对伴高脂血症大鼠重症急性胰腺炎肺损伤的作用研究[J].中华急诊医学杂志， 2016，25（11）：24.

[11] 李素艳，谭林，覃蒙斌，等.人结肠癌组织中NIBP、VEGF及ICAM-1的表达及其意义[J].实用医学杂志，2015，31（14）：2315-2318.

（收稿日期：2017-12-02）