□ 张春宇 范翠翠 张晓蕊 徐长隆 汉臣氏（沈阳）儿童制品有限公司

嗜酸乳杆菌是乳酸菌的一种，在人体整个胃肠道中，调节微生态环境，抑制肠道不良微生物的增殖。生长因子是指能促进乳酸菌生长繁殖的一类结构和性质不同的物质[1]。本研究是筛选出能够促进嗜酸乳杆菌增殖的最适促生长因子及其添加量。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

菌株：嗜酸乳杆菌H0606，由汉臣氏（沈阳）儿童制品有限公司提供。

MRS培养基：用于嗜酸乳杆菌H0606增殖培养。

1.2 方法

1.2.1 菌种增殖培养

将活化后的嗜酸乳杆菌H0606，按照3%接种量，35 ℃、100 rpm振荡培养12 h，测其菌液活菌数。

1.2.2 促生长因子的筛选

采用单因素试验设计，将低聚异麦芽糖（按0.6%添加量）、大豆低聚糖（按0.5%添加量）、菊粉（按0.6%添加量）、维生素B1（按0.2%添加量）和维生素B5（按0.2%添加量）添加到嗜酸乳杆菌MRS培养基中，进行菌种培养，同时做空白实验，以菌液活菌数和菌泥收率为评价指标，筛选出具有明显促进作用的生长因子[2]。

其中，活菌数的测定方法：采用平板计数法。收率的测定方法：将培养后得到的菌液进行离心（10000 rpm、10 min），收集菌泥。收率=菌悬液离心后得到的菌泥质量（g）/培养基装液体积（mL）×100%。

1.2.3 促生长因子添加量的确定

向嗜酸乳杆菌MRS培养基中添加浓度递增的促生长因子，进行菌种培养，以菌液活菌数和菌泥收率为评价指标，确定促生长因子的最适添加量[3]。

2 结果与分析

2.1 促生长因子的初步筛选

不同促生长因子对嗜酸乳杆菌H0606培养的影响见表1。

由表1显示，低聚异麦芽糖和菊粉作为促生长因子培养嗜酸乳杆菌，菌液的活菌数和菌泥收率高于空白对照组，显现出明显的促生长优势，初步确定低聚异麦芽糖和菊粉作为嗜酸乳杆菌的促生长因子[4]。

2.2 促生长因子添加量的确定

分别向嗜酸乳杆菌MRS培养基中0.5%、0.6%、1%的低聚异麦芽糖和菊粉，在相同的培养条件下进行培养。不同浓度低聚异麦芽糖和菊粉对嗜酸乳杆菌H0606培养的影响见表2。

由表2显示，当低聚异麦芽糖的添加量为0.6%和1%时，嗜酸乳杆菌菌液的活菌数和菌泥收率较高，从成本角度考虑，确定低聚异麦芽糖的最适添加量为0.6%；当菊粉的添加量为0.6%时，嗜酸乳杆菌菌液的活菌数和菌泥收率最高。

表1 不同促生长因子对嗜酸乳杆菌H0606培养的影响

表2 不同浓度低聚异麦芽糖和菊粉对嗜酸乳杆菌H0606培养的影响

3 结论

通过研究不同种类的促生长因子对嗜酸乳杆菌H0606培养的影响，结果表明：低聚异麦芽糖和菊粉，对菌液活菌数和菌泥收率都具有优势作用，利于嗜酸乳杆菌的高密度培养；当低聚异麦芽糖和菊粉的添加量为0.6%时，效果尤为显著；尤其菊粉对嗜酸乳杆菌H0606培养的优势影响更为显著。本实验结果对于嗜酸乳杆菌进行放大生产试验具有参考价值。