巴合提古丽·胡那毕亚

摘要：胚胎移植是将具有优良遗传性状的早期胚胎从供体母牛体内取出，移植到另一头生理状态相同的母牛子宫内，使其继续发育形成胎儿直到顺利分娩的过程。胚胎移植涉及的技术环节较多，每一环节的工作都对胚胎移植的成功与否影响极大，需做好各环节的工作。

关键词：肉牛；胚胎移植；受体牛；供体牛；超数排卵；同期发情；饲养管理

中图分类号：S823. 3+6

文献标识码：B

文章编号：2095-9737（2018）08-0053-01

1 供、受体肉牛的选择与饲养管理

供体牛选择品种特征明显，具有较高生产性能的母牛，其遗传性状要求稳定，并且要系谱清楚。受体牛一般选择当地的黄牛品种，应选择14—15月龄，体重在360 kg以上的育成牛或者年龄在2.5～5岁的1—2胎的成年母牛。供、受体牛都要健康无病，繁殖性能良好，没有流产史，发情周期正常，并且性器官的发育也要求正常。

供、受体母牛都要进行科学的饲养管理，合理的饲喂，提供适宜的营养物质，营养是影响母牛繁殖能力的主要因素，所提供的饲料要求多样且品质优良，青饲料、粗饲料、精饲料以及各种饲料添加都要搭配合理，以保证肉牛摄入充足的营养物质，同时还要保证母牛摄入充足且清洁的饮水。

2 供体牛的超数排卵处理

胚胎移植需要对供体母牛进行超数排卵处理，以获得多枚胚胎，一般要求供体母牛的排卵数量要在10枚左右，如果排卵数量过多，会易起卵巢囊肿，并且排卵效果不稳定，如果排卵过少则会降低胚胎移植的意义，还会造成胚胎难以采集。超数排卵主要使用的药物有促卵泡素（ FSH）、氯前列烯醇（PG）或阴道栓（CIDR）等，超数排卵过程中在发情后的第9～13天，连续4天早晚肌注促卵泡素，中间间隔12 h，在注射后的第3天用氯前列烯醇处理。或者可以在供体牛发情期到来的前4天，即发情周期的第16天注射促性腺激素，然后在出现发情状况的当天注射绒毛膜促性腺激素。

3 受体牛同期发情技术

同期发情技术是胚胎移植的一个重要的环节，可为超数排卵的供体牛在同一时间内准备足够的用于移植的受体牛，通过与受体牛同期化处理可以使供、受体牛的生理状态保持相同。在同期化处理时，发情时间与供体牛最好提前一天，并且受体牛的处理头数一般为供体牛的5倍。常用的同期发情技术为前列腺法，可分为一次前列腺法和二次前列腺法，一次法是对处于发情周期第10天的受体牛一次肌注前列腺素2～4 mL，诱导其发情，发情后第7天再进行移植。二次法是对在第一次肌注前列腺素后的11天再次肌注前列腺素2—4 mL，在发情后第7天移植。实际表明，注射二次法的效果要优于注射一次法。

4 胚胎的采集与贮存

胚胎的采集在母牛发情配种后的第7天进行，将发情当天视为0天，实施冲胚，在冲胚前需要通过直肠法检查卵巢黄体的个数，以判断可冲出胚胎的个数，在冲胚前需要准备好器械和冲胚液，所有的器械都要严格的消毒，冲胚液则要提前在35～37℃的水浴锅内预热。在操作时采用直肠把握法将冲卵管插入一侧的子宫角的深部，注入冲卵液后将子宫角抬高，使冲卵液回流，并将其回收。一般一侧的子宫角需要反复冲7次左右。冲胚结束后需要直接从冲管向子宫角内灌注抗生素和氯前列烯醇。

采集的的胚胎需要进行检查，并对胚胎进行鉴定和分级。首先要将胚胎回收，一般使用沉淀法，将回收液静置20 min后将上清去除，吸到液面还有2—2.5 cm深时即可。胚胎的鉴定要在显微镜下观察胚胎分裂与否、形态色调、均匀度、细胞的密度等情况，并将胚胎分为A、B、C、D4级。其中A级的胚胎形态完整、轮廓清晰，为球形，分裂球大小均匀，结构紧凑，透明度适中，无细胞和液泡附着；B级轮廓清晰，色调及细胞密度良好，可见到一些附着的细胞和液泡；C级轮廓不清，色调发暗，结构较松散，游离的细胞或液体较多，变性的细胞达30% - 50%；D级未受精卵、16細胞以下受精卵、有碎片的退化卵及变性细胞超过一半的胚胎。其中A、B、C级胚胎为可用胚胎，并且A、B级为可冷冻胚胎，C级胚胎只能用于鲜胚移植，D级胚胎为不可用胚胎。

一般采集的鲜胚需要进行冷冻保存，以保持活力，可选择常规冷冻法，将胚胎置于防冻液中平衡一段时间，然后装管后以每分钟降低0.3～0.5℃的速度降低至-7℃，植冻后温度缓慢的降低至 35℃，平衡10 min后迅速置于液氮中保存。

5 胚胎的解冻与移植

胚胎移植可分为鲜胚移植和冻胚移植。冻胚在解冻后可直接移植，先从液氮中取出细管，置于空气中10 s，然后再将其置于35℃温水中10 s，将封口端剪去，装入移植枪。输胚采用直肠把握法，在输胚前要考虑胚胎的发育情况和受体牛的发情时间，一般输胚前需要确定受体牛处于发情周期的6～8天，并还要确定卵巢上有明显的黄体存在，并且输胚还要在有黄体一侧的子宫角深处，操作的方法与人工授精相同。

胚胎移植后要注意观察受、供体牛的健康情况以及发情情况，对于供体牛在下次发情时可正常配种，如果受体牛在胚胎移植后仍发情，则说明移植失败，如果未表现出发情，则要观察3～5个情期，并做好妊娠的诊断工作。