张三军 郑伟 陈奎 王艳

1.河南省驻马店市动物疫病预防控制中心; 2.河南省信阳市卫生监督所

近年来，猪病的混合感染越来越严重，笔者接诊了一例猪瘟、伪狂犬与副猪嗜血杆菌混合感染的病例，临床症状较典型，现将整个诊治过程介绍如下。

（一）发病及免疫情况

2018年2月7日某养殖场带病猪前来就诊。主诉：该场存栏1000多头，其中母猪120头，育肥猪832头，发病猪群主要为育肥猪。1月30日出现发病症状，截止就诊已出现发病症状的猪有100多头，死亡12头，母猪有5头出现流产。该批育肥猪在0日龄、7日龄分别滴鼻伪狂犬疫苗和胸腔注射支原体疫苗，24日龄、60日龄注射的猪瘟细胞冻干活疫苗4头份/头。

（二）临床症状及用药情况

育肥猪表现精神沉郁、食欲不振、扎堆躺卧，体温40℃左右，咳嗽、喘气等呼吸道症状特别明显，粪便时干时稀，有的病猪耳尖、四肢末端、会阴部等处有紫红色出血点或斑，个别猪关节肿胀、腿瘸、死前有神经症状；母猪出现一过性发热、不分胎次的流产，无意识的空嚼、鼻吻突有磨损性结茧现象。曾用氟苯尼考注射液和长效土霉素注射液治疗，连用3 d不见好转，然后改用头孢噻呋粉针，使用板蓝根注射液稀释治疗，效果不理想。

（三）病理变化

对病猪进行了临床剖检，可见膝关节有粘稠灰白色液体流出；周身淋巴结出血、溃疡，尤其颌下淋巴结较为典型；扁桃体出现坏死斑（如图1），横切扁桃体呈虎斑色；心包液增多、淡黄色，心脏表面呈现茸毛心状（图2）；肝脏表面有纤维素样渗出物和灰白色坏死点（见图3）；脾脏暗紫色，有纤维素样渗出物及多量粉红色坏死点（图4）；肾脏表面有少量针尖样出血点和灰白色坏死灶；回盲口处有溃疡灶。

图1 扁桃体出现坏死斑

图2 心脏表面呈现茸毛心状

图3 肝脏表面灰白色坏死点

图4 脾脏暗紫色，表面分布多量粉红色坏死点

（四）实验室诊断

1.细菌分离鉴定。

（1）病料涂片染色镜检：无菌采集肝脏、肺脏病料组织，分别进行革兰氏和美蓝染色。革兰氏染色镜检可见革兰氏阴性细小杆菌，呈多种形态，从单个的球杆菌到长的、细长的、以至细丝状的菌体。美蓝染色镜检可见两极浓染且有荚膜的小杆菌；

（2）细菌的分离培养：无菌采集发病猪新鲜的肺脏、关节液、心血等病料，划线接种于TSA固体培养基，置于5%的CO2培养箱，37℃培养24～48 h后观察结果，可见圆形、光滑湿润、无色透明、直径为0.5～1 mm的菌落。挑取上述单个菌落逐步纯化培养，将纯培养疑似菌株分别接种于并进行涂片，革兰氏染色后在显微镜下观察，细菌形态与组织触片镜检中看到的一致；

（3）生化试验：生化反应结果符合副猪嗜血杆菌的生理生化特性(见表1)。

表1 分离菌生化试验结果

2.病原学检测。采集部分扁桃体、淋巴结、肺脏、脾脏组织，放入U型离心管，加生理盐水、钢珠经组织捣匀仪（MM400）处理、凯特离心机（凯特TG16G）离心，取上清液送PCR室，采用荧光RT-PCR和荧光PCR方法检测，结果显示猪瘟病毒核酸阳性、伪狂犬病毒核酸阳性。

根据发病情况、临床症状、病理变化和实验室诊断确诊为猪瘟、伪狂犬与副猪嗜血杆菌病的混合感染。

（五）采取的控制措施

对发病猪立即隔离，按照国家有关规定处置。对于其他猪群紧急接种猪瘟和伪狂犬疫苗，在饲料中添加头孢噻呋和黄芪多糖，饮水中添加电解多维，控制副猪嗜血杆菌和提高猪只的免疫力。

（六）分析

1.该猪场猪瘟和伪狂犬病的发生与该场猪瘟、伪狂犬免疫方案有着直接的关系。该猪场采取免疫方案会造成猪只育肥阶段猪瘟、伪狂犬抗体滴度达不到要求，出现免疫空白。因此，根据当前疫病流行趋势和该猪场实际情况建议育肥猪在50 kg左右加强免疫一次猪瘟，免疫剂量适宜加大；35日龄和80日龄各加强免疫一次伪狂犬疫苗。

2.目前紧急接种是快速控制猪瘟和伪狂犬等病毒病的有效措施，虽然同时接种会造成猪瘟疫苗和伪狂犬疫苗之间出现相互干扰情况，对抗体滴度的有一定的影响，但对于猪场紧急控制疫病流行状态、减少损害，这种影响可以忽略不计。

3.猪一旦感染伪狂犬病，伪狂犬病毒就会定植于猪的三叉神经节，造成猪只终身带毒，不定时排毒；而猪瘟的发生与种猪带毒有着密切的关系，因此猪场想要摆脱猪瘟、伪狂犬病的困扰，除采取合理的疫苗免疫，还需建立严格的生物安全措施，并开展动物疫病净化工作。

4.副猪嗜血杆菌属于猪只的早期定居菌，单独发病较少，常继发于猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征、伪狂犬等病毒病，因此做好猪瘟、蓝耳病、伪狂犬等病毒病的免疫，是控制副猪嗜血杆菌病的有效措施。同时加强猪场饲养管理，减少各种应激，必要时猪场可把副猪嗜血杆菌疫苗加入到免疫程序。由于副猪嗜血杆菌血清型较多，各血清型交叉保护差，所以选购的疫苗要与猪场流行株相一致。