王平平

（山西省阳泉市第一人民医院病理科 山西 阳泉045000）

近些年来,因条件导致的致病性真菌所引发的系统性真菌感染不断增多,各种器官移植、导管技术的发展，各种抗肿瘤药物的应用都是其重要的因素。而肺真菌感染性疾病是其中主要的类型。肺真菌感染性疾病临床症状缺乏明显特征，较难鉴别，极其容易误诊，从而影响治疗。鉴于此，如何准确快速的诊断出真菌类型，是治疗的关键。

1.一般临床资料

1.1 一般资料

选取我院在近两年收治的最终确诊为肺真菌感染性疾病患者60例,其中男性患者34例，女性患者26例，年龄范围从20岁到84岁不等，平均年龄（52.2±7.3）岁。这60例患者，有15例患者支气管黏膜活检，有8例患者肺穿刺活检，有37例患者外科手术肺活检。60例患者中，有基础病的患者有48例，占比80%，其中高血压、糖尿病患者有30例，恶性肿瘤有10例，肺结核有5例，余下有气管炎、哮喘等基础病。经治疗后，有2例患者完全康复，有54例患者完全康复，有4例患者死亡。

1.2 试剂与方法

本实验采用4中方法进行分析：（1）常规HE染色法。（2）传统手工PAS染色法：将切片进行脱蜡，放入水中，用0.5%浓度的高碘酸液氧化10分钟，2分钟流水冲洗，蒸馏水洗2次，15分钟左右的雪夫试剂染，然后进行分化、返蓝、水洗、脱水、二甲苯透明、中性树胶封固等。（3）传统手工六胺银染色法：其试剂包括六胺银贮备液和六胺银蹦沙染色液。将切片进行脱蜡处理，放入水中，采用5%铬酸水溶液氧化1小时，5分钟流水冲洗；浸泡1%亚硫酸钠水溶液1分钟，使用自来水冲洗5分钟，蒸馏水洗涤，去除铬酸；放入六胺银硼砂染色液内60℃温箱1小时，待镜下观察切片呈黄褐色、真菌呈黑褐色为止，蒸馏水洗3次；进行5分钟的O.2%氯化金水溶液调色，自来水冲洗；随后利用乙醇进行脱水，二甲苯透明，中性树胶封固；（4）全自动特殊染色法染PAS和六胺银∶使用全自动特殊染色仪，PAS时长39分钟，六胺银时长120分钟，两种染色可同时进行，时长120分钟。

1.3 统计学意义

本实验数据采用SPSS 22.0软件进行统计学处理，计量资料用（平均数±标准差）来表示，采用t检验，计量资料以%加以表示；实验对比差采用χ2检验，当P＜0.05时，差异对比具有统计学意义。

2.结果

从实验结果上来看，全自动特殊染色法在操作步骤上更加的简单，化学试剂已经商品化，更加的规范，受温度、湿度、时间等外界因素影响要小，而且染PAS和六胺银所花费的时间更短，脱片和复染张数更少，全面优于传统手工特殊染色法。

从实验结果来看，肺真菌确诊率从低到高依次临床初步诊断（30%）、HE染色法（33.3%）、HE染色联合传统手工特殊染色法染PAS和六胺银（96.6%）、HE染色联合全自动特殊染色法染PAS和六胺银（98.3%）；真菌分型率从低到高依次是临床初步诊断（20%）、HE染色法（33.3%）、HE染色联合传统手工特殊染色法染PAS和六胺银（86.7%）、HE染色联合全自动特殊染色法染PAS和六胺银（93.3%）。除后两种方法在分型率差异对比上不具备统计学意义外，其他4种方法从确诊率和真菌分型率两方面比较具有统计学意义，P＜0.05。

经最终病理诊断，肺真菌感染共分出类型者58例，曲霉菌（36例）、隐球菌（11例）、毛霉菌（9例）位于前列。（详见表）

表 60例肺真菌感染确诊患者诊断真菌分布与最终病理诊断结果比较（n）

3.结论

由于肺真菌感染疾病的患者日益增多与临床误诊率居高不下的矛盾，临床医疗中迫切的需要一种规范化特殊染色技术对肺真菌感染疾病病理进行准确的诊断。本文以我院在近两年收治的最终确诊为肺真菌感染性疾病患者60例作为实验对象，发现HE染色联合全自动特殊染色法染PAS和六胺银更加规范，操作简单、流程规范、受人工环境影响小、耗时短、准确率高，对于肺真菌感染性疾病病理诊断具有重要的意义。

】

[1]陈志伟,谢惠康.特殊染色技术在肺部疾病中的应用[C]//长三角地区病理技术新进展研讨会暨浙江省第八次病理技术会议.2013.

[2]刘菲菲,李雪,金木兰.规范化特殊染色技术对肺真菌感染性疾病病理诊断的意义[J].临床与实验病理学杂志,2017,33(6):653-658.

[3]曾秋林,李长如,陈灵敏.真菌感染的临床病理分析及特殊染色检测诊断方法[J].中华医院感染学杂志,2011,21(9):1924-1924.

[4]刘德纯.感染性疾病的病理学诊断[J].临床与实验病理学杂志,2014,30(7):777-781.

[5]冯伟生,刁井地,侯思南,等.痰细胞学涂片检菌对ICU肺部真菌感染的诊断意义[J].中华临床医师杂志:电子版,2013(23):336-338.