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山羊布鲁氏菌病的血清学调查

2018-02-16杨艳明李登峰

畜牧兽医科技信息 2018年10期
关键词:罗平县布病布鲁氏菌

杨艳明,李登峰

(1.云南省曲靖市罗平县畜禽改良工作站,云南 罗平 655800;2.云南省曲靖市罗平县动物疫病预防控制中心,云南 罗平 655800)

布鲁氏菌病(Brucellosis,简称布病)是由布鲁氏菌属细菌引起的人畜共患的常见传染病,世界动物卫生组织(OIE)将其列为B类动物疫病,我国将其列为二类动物疫病。布鲁氏菌是一种细胞内寄生的病原菌,主要侵害动物的淋巴系统和生殖系统,人主要是通过皮肤、粘膜、消化道和呼吸道感染,人感染布病主要表现为发热,全身无力及盗汗,四肢关节疼痛。转为慢性者伴有关节炎、脑膜炎,可能丧失劳动能力和生育能力,治疗很困难。感染牲畜平时无明显症状,只是在怀孕以后易流产,首次感染的群体常发生大量流产,流产前阴门排出黏液或带血的黏性分泌物。流产后常伴有结膜炎 、乳腺炎和跛行。以后个别母羊可能不孕 ,公羊表现为睾丸炎、附睾炎或关节炎。罗平县地处滇、黔、桂三省结合部,是全国著名的旅游胜地,为此,开展对罗平布病的调查具有重要的公共卫生意义。

1 材料与方法

1.1 样本来源

10274份被检血清由全县各乡、镇(街道)畜牧兽医站采集于13个乡(镇、街道)122个行政村434个自然村2749(场)户。采集分离的血清,-20℃保存备用。

1.2 检测试剂及仪器

布鲁氏菌病虎红平板凝集试验抗原(批号:2017/08/10),布病阳性标准血清、布病阴性标准血清;布鲁氏菌病试管凝集试验抗原(批号:2017/06/20),匀由中国兽医药品监察所生产,于2~8℃冷藏保存备用。洁净的一次性反应板,其上已有划好的4cm的圆圈,20~200μL单道移液器、500μL单道移液器、1000μL单道移液、200μL、500μL、1000μL吸头,试管、试管架、二级生物安全柜,恒温培养箱等。

2 检测方法

2.1 虎红平板凝集试验

实验前,将血清和抗原在室温放置30~60min。在一次性反应板上各格标记好被检血清号,然后加相应被检血清30mL。在被检血清旁滴加虎红平板凝集试验抗原30μL。用吸头搅动血清和抗原,换吸头,使之充分混合,在4min内观察结果,设阴性血清、阳性血清对照。

2.2 试管凝集试验

每份被检血清用4支试管,标记检验编号后第1管加1.15mL稀释液,第2~4管各加入0.5mL稀释液。取被检血清0.1mL,加入第1管,充分混匀后吸弃0.25mL弃去。从第1管中吸取0.5mL加入到第2管,混合均匀后,再从第2管吸取0.5mL,至第3管,如此倍比稀释至第4管,从第4管弃去0.5mL,稀释完毕。然后将0.5mL的20倍稀释的抗原加入各管中。山羊的血清稀释度 1:25、1:50、1:100、1:200。所有试管充分震荡混匀后,置37℃温箱培养24h。

3 结果判定

3.1 虎红平板凝集试验

在阴、阳性血清对照成立的条件下,方可对被检血清进行判定。受检血清在4min内,出现肉眼可见不同成度颗粒状或絮状凝集现象者判为阳性(+),无凝集现象,呈均匀粉红色者判为阴性(-)。出现阳性的再用试管凝集试验进一步检测。

3.2 试管凝集试验

当阴性血清对照和抗原对照不出现凝集(-),阳性血清的凝集价达到其标准效价±1个滴度,则试验成立,可以判定。否则试验应重做。山羊血清样品于1:50血清稀释度出现“++”以上的凝集现象时,被检血清判定为阳性反应。

4 结果

10274份山羊血清样品,检出阳性羊185只,全县平均阳性率为1.8%,羊布病血清学阳性分布范围涉及7个乡(镇、街道)12个行政村16个自然村,其中罗雄为6.45%,马街为2.39%,阿岗为1.54%,富乐为1.48%,旧屋基为0.23%,老厂为0.13%,大水井0.08%。本次试验调查结果表明,罗平山羊布病血清阳性率较高,

5 综合防控措施

5.1 进一步加强山羊布病流行病学调查,了解山羊养殖基本情况,存栏、布病防控、发病情况,有无症状,是否用过布病疫苗等。

5.2 每年进行2~4次的集中采样和布病清血学监测,应用虎红平板凝集试验(RBPT)做初筛,然后进行试管凝集试验(SAT)定性。

5.3 对检出的阳性山羊100%进行扑杀,并对扑杀山羊给予补助,每只补助标准小羊500元/只,大羊补1000元/只。

5.4 消毒灭源,对检出阳性羊的场、户厩舍、村社道路环境进行全面消毒,对污染场地及运输车辆进行消毒灭源,对扑杀的阳性山羊作深埋及无害化处理。

5.5 建立健全检疫制度 ,把好检疫关,加强县级边检站的验证检疫工作,严格检疫执法制度,严禁无证可疑畜及畜产品流入我县。

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