潘德彦

（辽宁省大连市普兰店区城子坦动物卫生监督所，辽宁 大连 116200）

粪便虫卵检查是寄生虫病、特别是蠕虫病生前诊断的重要方法，其原理是：大多数寄生性蠕虫寄生在消化道内，它们的卵、节片、幼虫或成虫随宿主粪便排至外界；某些寄生于呼吸道的蠕虫，它们的虫卵和幼虫随痰液到口腔又被动物咽下也随粪便排出；一些寄生于血液的蠕虫，它们的虫卵也可随血流到达肠壁，并进入肠腔而随粪排出.

1 应用范围

1.1 动物寄生虫病的生前诊断

适用于所有动物寄生虫病的诊断，尤其是不能剖检的珍贵和珍稀动物。

1.2 动物寄生虫流行区系调查

此项调查可确定感染率、感染强度，感染种类和优势虫种，为科学研究、监测预警、区域性寄生虫病防控服务。

1.3 驱虫效果评价

根据驱虫前后虫卵转阴率，判断驱虫效果。

2 仪器设备材料

2.1 器 材 铁架台、漏斗、粪筛、纱布、粪勺 、烧杯、玻璃棒、镊子、载玻片、盖玻片、粗天平、锥形瓶、吸管、铁丝圈等。

2.2 各种动物粪便

2.3 饱和食盐水溶液、自来水

2.4 普通显微镜

3 粪便的采集及保存

3.1 粪便采集的原则和方法

原则：新鲜未被污染。

方法：直肠采粪或排出的新鲜粪便，采集粪堆上面未被污染的部分。采集的粪便要装入洁净的容器中。

3.2 粪便的保存

采集的新鲜粪便应当天检查，不能当天检查的粪便要密封后放在4℃的冰箱中保存。如需转送别处检查，则可将粪样浸入5%～10%的福尔马林中，将虫卵固定，使其失去活力。

4 常用的粪便虫卵检查方法

4.1 粪便外观检查法

所有的吸虫、线虫的虫卵全部随着粪便排出体外，通过粪便外观检查，可以检出虫卵及成虫。

4.2 直接涂片法

适用于产卵量多的虫体的粪便检查，如球虫、消化道线虫卵等；本方法简便、快速，但检出率低。取1～2滴生理盐水放入载玻片上取少量被检粪便与之混合均匀，剔出粪渣加盖玻片镜检。

4.3 漂浮法

本方法适用于对大多数线虫卵、绦虫卵尤其是球虫卵囊，本法的应用原理是饱和盐水的比重（1.3～1.9）大于虫卵的比重（1.0～1.2）。

虫卵被漂浮在溶液的上层。操作方法：

（1）取粪：取5～10g粪便放入100mL烧杯中；

（2）化粪：加10～20倍的饱和盐水，用玻璃棒搅开；

（3）过滤：用3～4层纱布或铜筛网过滤；

（4）静置：40min左右；

（5）镜检：用直径0.5～1cm的金属环平着接触液面，提起后将液面抖落在载玻片上加盖玻片用显微镜检查。

4.4 自然沉淀法

本方法适用于各种蠕虫卵及幼虫检查，特别适用于比重较大的吸虫卵、棘头虫卵及比重较大的原虫卵囊。原理：虫卵的比重（1.2～1.5）大于水的比重（1.0），虫卵或包囊体沉于溶液的底部。

（1）取粪：取5～10克粪便放入100mL烧杯中。

（2）化粪：加10～20倍的自来水，用玻璃棒搅开。

（3）过滤：用 3～4层纱布过滤。

（4）静置洗涤：静置20min后，倒掉上清液，留取沉淀物，再次加水静置沉淀，每20min一次直至上清液透明为止。

（5）镜检：用吸管吸取沉淀物，将沉淀物滴1-2滴于载玻片上，加盖玻片用显微镜检查。

5 虫卵的基本形态结构

形状：圆形、卵圆形、椭圆形、三角形等。

结构：外层：2～4层膜，内层：有多个卵黄细胞和一个胚细胞。

颜色：黄褐色、黄白色等。

6 粪便虫卵培养技术

有一部分虫卵形态相似，在虫卵阶段很难区别，为了鉴定这些虫卵，需要做粪便虫卵培养。

培养条件：25℃恒温箱，有充足的氧气。

操作方法：培养皿底部加放滤纸一张，将粪便100g左右加水调成硬糊状并堆成半球形放在滤纸上，使半球形粪便顶部略高于培养皿高度，而后加盖另外一个培养皿，放入25℃恒温箱中一周左右，多数虫卵可以发育为幼虫，并集中在上面培养皿盖的水滴中，用吸管吸出幼虫在显微镜下检查鉴定。