张高翔，金涛，王利

(1.西藏职业技术学院 农业科学技术学院，西藏 拉萨 850000；2.西藏自治区农牧科学院 农业资源与环境研究所，西藏 拉萨 850000)

·中药农业·

西藏加查县濒危药材桃儿七真叶分化研究

张高翔1*，金涛2，王利1

(1.西藏职业技术学院 农业科学技术学院，西藏 拉萨 850000；2.西藏自治区农牧科学院 农业资源与环境研究所，西藏 拉萨 850000)

目的探索一种促进野生桃儿七真叶分化的一种方法。方法以采自西藏加查县经过自然休眠的野生桃儿七种子为试材，首先分别用0、25、50、100、150、200 mg·L-1的GA进行处理，筛选出最适合真叶分化浓度；用0、25、50、100、150、200 mg·L-1的6-BA进行处理，筛选出最适合真叶分化的浓度；再用 100 mg·L-1GA与不同质量浓度6-BA配比对桃儿七真叶分化的影响。结果100 mg·L-1质量浓度GA处理下真叶的分化率最高，分别为84.1%；同时真叶畸形率仅为3.3%，是比较理想的处理浓度。结论在桃儿七种子萌发过程中添加适量的GA、6-BA，及二者的配比，能够有效的提高桃儿七真叶的分化率，但过高的激素含量会造成较高的真叶畸形率，畸形苗不能够存活。

西藏加查；桃儿七；真叶；分化

桃儿七 Sinopodophullumhexandrum为小蘖科植物，多年生草本，稀有种。残存于东亚，呈零星分布，是东亚和北美植物区系中的一个洲际间断分布的物种，对研究东亚、北美植物区系有一定的科学价值。通常生于高海拔地带的平坦山谷及透光度好的林下、林缘或草灌丛中，海拔下限 2700 m，海拔上限4300 m。桃儿七的根茎与果实均有较高的药用价值 。在西藏主要分布在昌都、察隅、波密、林芝米林、亚东、定结、隆子、吉隆和加查等地[1]。

笔者在开展桃儿七的人工栽培研究过程中发现桃儿七的种子具有较强的休眠性，带帽出土现象严重，并且具有真叶分化困难等特性。桃儿七为双子叶植物，在种子萌发时由胚中的子叶提供营养物质，众所周知子叶是种子在形成时胚就具有的一部分，而之后的生长依赖于分化形成的真叶进行光合作用提供营养，因而真叶的分化对其存活和生长至关重要。针对桃儿七在人工栽培过程中真叶不分化的问题，笔者以西藏加查县桃儿七为对象，进行了认为干扰促进真叶分化的研究，以为大规模人工栽培奠定基础，并合理保护桃儿七野生资源。

1 材料与方法

1.1 材料选择

选用2015年8～9月在西藏加查县崔久沟采集的野生桃儿七种子。该实验选择棕红色，呈卵状三角形，饱满紧实、无病虫害的种子。在实验室内经过6个月的自然休眠，于2016年4月中旬进行播种。经过发芽实验证实，通过自然休眠期的桃儿七种子，其发芽率可达95%以上。

本实验的营养土选用蛭石、草炭、珍珠岩，按照1∶1∶1等比例进行配制，并对配制好的营养土进行121 ℃高温灭菌20 min。

2 方法

2.1 不同浓度GA对真叶分化的影响

选取0、50、100、150、200 mg·L-1的GA溶液，在播种后用喷壶每天清晨喷洒一次(每个处理约20 mL)，直至分化出真叶。其中每个处理用直径23 cm的花盆播种10粒种子，覆土深度约1 cm，并重复3次，30～50 d后统计真叶分化情况：

2.2 不同浓度6-BA对真叶分化的影响

选取0、25、50、100、150、200 mg·L-1的6-BA溶液，在播种后用喷壶每天清晨均匀喷洒一次(每个处理约20 mL)，直至真叶分化出。其中每个处理用直径23 cm的花盆，播种10粒种子，覆土深度约1 cm，并重复3次，30 d后统计真叶分化情况：

2.3 100 mg·L-1GA与不同质量浓度6-BA配比对桃儿七真叶分化的影响

选取100 mg·L-1GA并与0、25、50、100、150 mg·L-1的6-BA溶液相配合，在播种后用喷壶每天清晨喷洒一次(每个处理约20 mL)，直至真叶分化出。其中每个处理用直径23 cm的花盆，播种10粒种子，覆土深度约1 cm并重复3次，30 d后统计真叶分化情况：

3 结果与分析

3.1 不同浓度GA对真叶分化的影响

由表1可知，在空白对照(CK)，三个处理未能观察到明显的真叶分化，但出苗率高达97.1%；在100、150 mg·L-1两个质量浓度GA处理下真叶的分化率最高，分别为84.1%、83.5%；随着GA质量浓度的升高，真叶分化率反而有所下降，并且真叶的畸形率也有所上升。

在100、150 mg·L-1两个质量浓度GA处理下真叶的分化率比较高，但150 mg·L-1质量浓度处理下，虽得到了较高的真叶分化率，但畸形率也较高。

表1 不同浓度GA对真叶分化的影响

3.2 不同浓度6-BA对真叶分化的影响

由表2可知，五个质量浓度的6-BA对桃儿七进行处理，50、100 mg·L-1处理的情况近似，分别为80.6%、78.9%；低质量浓度下(25 mg·L-1)真叶分化率较低，为19.3%；同时畸形率也比较低，为6.7%；而随着质量浓度的升高(150 mg·L-1)真叶分化率有所下降，为72.0%，同时畸形率也比较高，为34.8%。

表2 不同浓度6-BA对真叶分化的影响

3.3 100 mg·L-1GA与不同质量浓度6-BA配比对桃儿七真叶分化的影响

由表3可知，100 mg·L-1GA与50 mg·L-16-BA配比时真叶的分化率较高，为82.5%，但此浓度配比下的真叶畸形率也比较高，为达为54.3%；而在其他配比浓度时此基础上不管是浓度升高还是减低，真叶分化率都有所降低；100 mg·L-1GA与不同质量浓度6-BA配比，真叶的畸形率都较高，都占到该配比浓度真叶分化率的一半以上。

表3 100 mg·L-1GA与不同质量浓度6-BA配比对桃儿七真叶分化的影响

图1 桃儿七种子

图2 桃儿七经过100 mg·L-1 GA处理后的真叶分化情况

图3 濒临死亡的畸形真叶

图4 养分殆尽的桃儿七子叶

4 讨论

本实验通过对不同浓度GA对真叶分化的影响、不同浓度6-BA对真叶分化的影响、100 mg·L-1GA与不同质量浓度6-BA配比对桃儿七真叶分化的影响的研究，可以看出在100 mg·L-1质量浓度GA处理下真叶的分化率最高，分别分别为84.1%；同时真叶畸形率仅为3.3%，是比较理想的处理浓度。

众所周知子叶是种子在形成时胚就具有的一部分，一般在种子萌发时提供营养物质，营养消耗殆尽便自然脱落；真叶才是植物真正意义上的叶子，为植物生长发育提供物质基础。在野生条件下桃儿七的真叶能够正常分化，但在人工栽培过程中，桃儿七真叶不分化或分化率低的是一个大问题。具体原理原因目前尚不没有比较明确的结论，可能是野生环境和人工栽培环境在温度、湿度、光照上的不同所造成的。

在实验过程中还发现有些试材经过处理后分化出了真叶，但真叶为畸形(特别是在前期进行浸种处理的预实验)，该部分植株也不能够长时间存活，在栽培过程中多枯萎死亡，有些高浓度的处理，如100 mg·L-1GA与50 mg·L-16-BA配比，虽然可以获得82.5%的真叶分化率，但真叶畸形率同时也高达54.3%，后期死苗率较高，也不适用。

本实验通过对西藏加查县桃儿七真叶分化的研究，找到了适于桃儿七真叶分化的浓度，为桃儿七人工栽培奠定了基础，对更好的保护和开发西藏桃儿七资源具有重要的现实意义。

[1] 泽仁旺姆，于顺利，尼珍，郭尚磊.独一味等 13 个藏药植物种在西藏的分布和资源量调查[J].北京农业，2010：56-59.

[2] 虞泓.桃儿七[J].植物杂志，1999(3)：6-7.

[3] 刘海军，徐艳，苏国庆，等.桃儿七的研究进展[J].中草药，2004，35(1)：98- 100.

[4] 陈毓亨.我国鬼臼类植物资源的研究[J].药学学报，1979，14(2)：101-107.

[5] 马绍宾，徐正尧，胡志浩.桃儿七繁殖生物学研究[J].西北植物学报，17(1)：49-55.

[6] 鲍隆友，杨晓梅，刘玉军.西藏野生藏药材驯化技术研究[J].中国林副特产，2008，2(1)：22-25.

StudyonLeafDifferentiationofEndangeredMedicinalMaterials-Sinopodophyllumhexandrum

ZHANG Gaoxiang1*，JIN Tao2，WANG Li1

(1.TibetVocationalTechnicalCollege，CollegeofAgriculturalScienceandTechnology，Lhasa850000，China； 2.TibetAcademyofAgricultureandAnimalHusbandryScience，AgriculturalResourceandEnvironmentResearchInstitute，Lhasa850000，China)

Objective：The study is aimed to find a method for leaf differentiation ofSinopodophyllumhexandrum.MethodsThe natural dormant seeds of wildS.hexandrumharvested in Jiacha of Tibet were collected.GA was added to screen the optimal concentration，then 6-BA was used to screen the optimal concentration for study of leaf differentiation ofS.hexandrum.ResultsThe leaf differentiation ofS.hexandrumwas 84.1% under 100 mg·L-1of GA，and the malformation rate was 3.3%.ConclusionGA and 6-BA could promote leaf differentiation ofS.hexandrum，however high concentration of plant hormones may result in the malformation of the leaf.

Tibet Jiacha；Sinopodophyllumhexandrum；leaf；differentiation

10.13313/j.issn.1673-4890.2017.9.012

2016年度西藏自治区自然科学基金项目(2016ZR-ZX-05)

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张高翔，讲师，研究方向：濒危藏药人工繁殖及栽培；E-mail：365069645@qq.com

2017-03-06)