李秀君

（胜利石油管理局临盘医院，山东 临邑 251507）

通过直接药敏试验对血液样本进行细菌鉴定的效果探析

李秀君

（胜利石油管理局临盘医院，山东 临邑 251507）

目的：探讨使用直接药敏试验对血液样本进行细菌鉴定的效果。方法：选取近期在胜利石油管理局临盘医院进行血液细菌鉴定的80例败血症患者和菌血症患者作为研究对象。这些患者均存在发热、全身性感染的情况。对这些患者的血液样本进行直接药敏试验和常规药敏试验。将这些患者使用常规药敏试验进行血液细菌鉴定的结果作为标准。观察这些患者使用直接药敏试验鉴定细菌种类的准确率、检测细菌对抗生素敏感度的准确率及进行细菌鉴定所用的时间。结果：这些患者使用直接药敏试验鉴定革兰阳性菌的准确率及鉴定革兰阴性菌的准确率与其使用常规药敏试验鉴定上述细菌的准确率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。这些患者使用直接药敏试验检测对抗生素敏感的革兰阳性菌、对抗生素敏感的革兰阴性菌、对抗生素中度敏感的革兰阳性菌、对抗生素中度敏感的革兰阴性菌、对抗生素耐药的革兰阳性菌及对抗生素耐药的革兰阴性菌的准确率与其使用常规药敏试验检测上述细菌的准确率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。这些患者使用直接药敏试验进行细菌鉴定的平均时间短于其使用常规药敏试验进行细菌鉴定的平均时间，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：使用直接药敏试验对血液样本进行细菌鉴定的效果与使用常规药敏实验对血液样本进行细菌鉴定的效果相似。使用直接药敏试验对血液样本进行细菌鉴定所用的时间更短。

直接药敏试验；常规药敏试验；血液；细菌鉴定

败血症患者和菌血症患者的死亡率均较高。在早期对败血症患者和菌血症患者进行血液细菌鉴定可明确其致病菌，有助于临床医生为其选择合适的药物进行治疗[1]。过去，临床上常使用常规药敏试验对血液样本进行细菌鉴定。但进行常规药敏试验的时间较长，易延误患者的治疗。相关的研究结果证实，使用直接药敏试验对血液样本进行细菌鉴定可快速、准确地明确病原菌的种类及耐药情况等。为探讨使用直接药敏试验对血液样本进行细菌鉴定的效果，胜利石油管理局临盘医院对近期收治的80例败血症患者和菌血症患者使用直接药敏试验和常规药敏试验进行血液细菌鉴定，并将其使用两种方法进行细菌鉴定的结果进行了对比。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本文的研究对象为2015年2月至2016年2月期间在胜利石油管理局临盘医院进行血液细菌鉴定的80例败血症患者和菌血症患者。这些患者均存在发热、全身性感染的情况。在这些患者中，有男性患者52例，女性患者38例；其年龄为12.5～84.6岁，平均年龄为（45.8±5.8）岁。在进行本次采血前48 h内这些患者均未使用任何药物，未接受任何治疗。这些患者均未患有凝血障碍、自身免疫系统疾病、血液病。

1.2 方法

在这些患者空腹的状态下采集其10 ml的静脉血。将血液样本接种在 BACTEC系统内，进行细菌培养。对这些患者进行细菌培养的结果均呈阳性。根据美国临床和实验室标准协会（NCCLS）推荐的选药标准，选择苯唑西林、四环素、红霉素及克林霉素作为进行药敏试验的药品。对血液样本进行直接药敏试验。具体的试验步骤为：将10 ml的血液样本放置到无菌试管内。将样本以1500 r/min的速度离心处理5 min。收集样本的上层清液。将上层清液以3000 r/min的速度离心处理15 min，弃去上层清液。将经过处理后的样本洗涤沉淀2次后重悬。取20 μl的悬液进行革兰染色，在高倍显微镜下观察细菌的形态[2]。如果细菌的形态为链状革兰阳性菌，则使用浓度为5%的羊血+MH琼脂进行初步药敏试验。然后将菌液的浓度调节为6.8×108 cfu/L，并将菌液放置在NC21 板内接种，进行药敏试验和细菌鉴定。如果细菌的形态为非链状革兰阳性菌，则直接将1滴或2滴混悬液接种在MH琼脂平板内，使用无菌拭子将其涂抹均匀，使用药敏试纸片进行药敏试验。对这些患者的血液样本进行常规药敏试验。具体的试验步骤为：将血液样本接种在 BACTEC系统内，进行细菌培养。从血液培养瓶内抽取少量的血液样本，将血液样本接种在血板、麦康凯平板及巧克力平板内。在二氧化碳培养箱内过夜培养血液样本17 h。对菌落进行革兰染色。使用VITEK2-compact 系统进行细菌鉴定和药敏试验。

1.3 观察指标

将这些患者使用常规药敏试验进行血液细菌鉴定的结果作为标准，观察其使用直接药敏试验鉴定细菌种类的准确率。记录这些患者使用不同方法进行血液细菌鉴定所用的时间。根据NCCLS制定的标准判定对血液样本进行药敏试验的结果。对抗生素敏感：细菌对本次研究中使用的两种以上抗生素的敏感度为敏感，或对两种抗生素敏感且对至少一种抗生素中度敏感。对抗生素耐药：细菌对本次研究中使用的两种以上的抗生素耐药，或对两种抗生素耐药且对至少一种抗生素中度敏感。对抗生素中度敏感：细菌对抗生素的敏感度不符合“耐药”或“敏感”的标准。

1.4 统计学原理

本次研究的数据均采用SPSS20.0统计软件进行处理，计量资料用均数±标准差（±s）表示，采用t检验，计数资料用百分比（%）表示，采用χ²检验。以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 这些患者使用两种方法鉴定细菌种类的结果

这些患者使用直接药敏试验鉴定革兰阳性菌的准确率及鉴定革兰阴性菌的准确率与其使用常规药敏试验鉴定上述细菌的准确率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。详情见表1。

表1 这些患者使用两种方法鉴定细菌种类的结果[n（%）]

2.2 这些患者使用两种方法检测细菌对抗生素敏感度的结果

这些患者使用直接药敏试验检测对抗生素敏感的革兰阳性菌、对抗生素敏感的革兰阴性菌、对抗生素中度敏感的革兰阳性菌、对抗生素中度敏感的革兰阴性菌、对抗生素耐药的革兰阳性菌及对抗生素耐药的革兰阴性菌的准确率与其使用常规药敏试验检测上述细菌的准确率相比，差异无统计学意义（P＞0.05）。详情见表2。

表2 这些患者使用两种方法检测细菌对抗生素敏感度的结果[n（%）]

2.3 这些患者使用两种检测方法进行细菌鉴定的时间

这些患者使用直接药敏试验进行细菌鉴定的时间为8.24～13.91 h，平均时间为（9.98±1.28）h。这些患者使用常规药敏试验进行细菌鉴定的时间为48.52～72.33 h，平均时间为（62.36±5.18）h。这些患者使用直接药敏试验进行细菌鉴定的平均时间短于其使用常规药敏试验进行细菌鉴定的平均时间，差异具有统计学意义（t=11.324，P＜0.05）。

3 讨论

菌血症和败血症是比较严重的感染性疾病。及时对菌血症患者和败血症患者进行血液细菌鉴定有利于临床医生为其选择合适的治疗方案，改善其预后[3]。

过去，临床上常使用常规药敏试验对血液样本进行细菌鉴定。但进行常规药敏试验通常需要2～3 d。在等待常规药敏试验结果时，医生仅能凭借临床经验对患者进行治疗。1973年，国外学者首次将直接药敏试验法用于临床检验。近些年，我国多家医院均使用直接药敏试验进行血液细菌鉴定，均取得了较好的成果。此外，直接药敏试验的操作更为简便，基层医院也可使用该方法进行血液细菌鉴定。

本次研究的结果证实，使用直接药敏试验对血液样本进行细菌鉴定的效果与使用常规药敏实验对血液样本进行细菌鉴定的效果相似。使用直接药敏试验对血液样本进行细菌鉴定所用的时间更短。

[1] 郭苏珊,林健雄,郭金镇,等.BACTECMGIT960用于结核分枝杆菌直接药敏试验的研究[J].中国病原生物学杂志,2014(10):946-948.

[2] 李珍,李从荣.细菌快速药敏试验方法研究进展[J].检验医学与临床,2016,13(8):1142-1144.

[3] 王书侠,张家明,周竞,等.血培养阳性标本直接药敏试验临床应用价值的评估[J].中华医院感染学杂志,2016,26(10):2270-2272.

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2095-7629-（2017）9-0127-02