谭松林

摘要：研究了反相超高效液相色譜法测定水质中乙酸含量的色谱条件。结果表明：在Waters T3（50 mm×3 mm×1.8 μm）色谱柱上，以NaH2PO4（20 mM/L，pH=2.6）/H3PO4缓冲液作为流动相，210 nm处紫外检测水质中的乙酸；其流动相流速为0.2 mL/min，柱温30 ℃，进样量1.0 μL。该方法简便快捷，样品加标回收率为68.5%～72.1%。

关键词：乙酸；反相超高效液相；紫外检测

中图分类号：X832

文献标识码：A文章编号：16749944（2017）20004002

1引言

水体中少量的乙酸不仅表现为酸性，而且使其化学需氧量增高，这对水系统的生态平衡和人的身体健康带来严重的危害，因此快速便捷的检测水质中的乙酸含量在环境监测中显得尤为重要。目前对乙酸的分析方法主要要有滴定法、薄层层析法、分光光度法、荧光法、气相色谱法以及酶法等[1～4]。而这些方法或需经预分离和衍生化等前处理，或精准度不高，而且操作繁琐。笔者采用反相超高效液相色谱法，直接进样测定水质中的乙酸含量，具有操作简单快捷、准确度高的优点。

2实验部分

2.1实验原理

水样经0.22 μm的水相滤膜或针式水相滤头过滤后直接进样，采用反相超高效液相色谱进行检测，以保留时间定性，峰面积定量计算样品中乙酸的含量。

2.2样品的采集与保存

水样采集于1000 mL棕色玻璃瓶中，1～5 ℃冷藏，尽快分析，分析前将样品自然升至室温。采样瓶预先用洗涤剂洗一次，自来水洗三次，蒸馏水洗一次。

2.3仪器及试剂

Waters ACQUITY UPLC超高效液相色谱仪；美国Millipore（simplicity 185）超纯水机；0.22 μm滤膜针式过滤器和0.22 μm水相滤膜；吉尔森移液枪（1000 μL、100 μL、10 μL）；868型酸度计。

配制1mg/mL的乙酸标准储备液，用时根据需要进行稀释。所用试剂均为分析纯及以上。

2.4色谱条件

流动相为NaH2PO4（20 mM/L，pH值为2.6）/H3PO4缓冲液，使用前用0.22 μm 滤膜过滤；色谱柱为Waters T3柱（50 mm×3 mm×1.8 μm）；柱温30 ℃；流速0.2 mL/min；最大吸收波长为210 nm；进样量1.0 μL。待测样品进样前经0.22 μm 滤膜过滤。

3结果与讨论

3.1紫外检测波长的选择

乙酸的紫外吸收为羟基上n→π*电子跃迁[5]，其最大吸收峰在210 nm处，所以将紫外检测吸收波长确定在210 nm。

3.2流动相的选择

Waters T3色谱柱是一种独特的超纯硅胶基质的反相C18色谱柱，乙酸要保持分子状态，才能在柱上被分离开来。乙酸在水中的pKa为4.76，假若有1.0%的乙酸解离以离子状态存在，根据下式计算，其流动相的pH值应该小于2.76。

pH=pKa+log（[Ac-]/[HAc] ）=4.76+log（0.01）=2.76

Waters T3柱的pH值耐受范围2.0～8.0，若将流动相的pH值逼近2.0则影响色谱柱的使用寿命；所以从延长柱子使用寿命和乙酸分离效果两方面综合考虑，最终确定流动相的pH值为2.6。

3.3标准曲线的绘制与检出限

根据以上2.4确定的色谱条件，采用流动相缓冲液分别配制含乙酸35.0、50.0、100.0、200.0、400.0、500.0 mg/L的标准序列，乙酸的保留时间为2.67 min。以乙酸标准浓度对响应峰面积绘制标准曲线，其曲线方程为：

y=177.9213x-1924.132，r=0.9997 （式中y为峰面积，x为乙酸浓度mg/L）。

其标准样品的图谱见图1。

根据《环境监测 分析方法标准制修订技术导则》（HJ 168-2010）中相关规定计算其检出限为7.75 mg/L，测定下限为31.0 mg/L。

3.4精密度和准确度的测试

配制浓度为50.0 mg/L、100.0 mg/L、200.0 mg/L的3组标准样品，分别测定6次，用外标法根据峰面积定量，记录其结果，见表1。

3.5加标回收率

在6份工业废水中分别加入标准样品，使其定容至1 mL时，标准样品加入量为200 mg/L，按照2.4确定的色谱条件做加标回收率实验，其结果见表2。

参考文献：

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[5]張玉奎，张维冰，邹汉法. 分析化学手册[M].北京：化学工业出版社，2000：79.

Determination of Acetic Acid in Waters by Reversed Phase Ultra Performance Liquid Chromatography

Tan Songlin

（Environmental monitoring center of Nanchong， Nanchong， Sichuan， 637000，China）

Abstract： This paper studied the chromatographic conditions for the determination of acetic acid in waters by reversed phase ultra-performance liquid chromatography.The chromatographic separation was carried out on Waters T3 column（50mm×3mm×1.8μm）and all components were monitored at 210nm.The mobile phase consisted of NaH2PO4 （20mM/L， pH=2.6）/H3PO4 buffer. Flow rate was kept at 0.2mL/min， the injection volume was 1.0μl for all injectionsand the column temperature maintained at 30 ℃. The new method is simple and quick and sample added recovery is 68.5%～72.1%.

Key words： acetic acid；RP-UPLC；ultraviolet detection.endprint