魏盟智++郝晨光++赵子晨

一氧化氮是一种广泛分布在生物体内各处的信息分子。生物体内的每种信号分子，都有着自己明确的分工与任务，以此保证生物生命活动有序进行。一氧化氮就充当了生物的信使、效应分子和免疫调节分子，发别在生物的信息处理、应对与免疫系统上发挥着作用，其中最重要，也最显著的方面就是免疫调节功能。一氧化氮是一种化学物质，能通过其非特异性杀死细菌、病毒等对生物健康有害的物质，促进生物机体的非特异性免疫功能；同时，一氧化氮也因它信号分子的身份控制生物机体的特异性免疫。经研究表明，一氧化氮在许多病理状态下，可以充当调节许多免疫活性的介质，影响机体免疫功能。

一氧化氮的合成是由一氧化氮合酶催化。一氧化氮合酶催化L-精氨酸，在生物体内合成一氧化氮，可以改变机体的免疫能力。本文为研究副溶血弧菌感染常见养殖鱼类石斑鱼后体内一氧化氮合酶的变化情况，为今后人类合理使用副溶血弧菌提供数据。

材料与方法

材料。

（1）药品

副溶血弧菌，一氧化氮合酶测定试剂。

（2）实验鱼

取自同一水域，相同体长，相同体重，且无疾病的石斑鱼。

实验方法。

（1）设计方案

将石斑鱼都放在相同水位的培养桶里，分别注射浓度为6×10∧6cfu/ml、6×10∧7cfu/ml、6×10∧8cfu/ml的副溶血弧菌悬液，向对照组注射相同量的生理盐水，每组设置三个平行对照组。注射方法为腹腔注射，在注射后24h、48h、72h、120h用0.1ml一次性注射器采血，所取血液放于4℃恒温冰箱里一夜后，利用转速离心法以4000r/min离心5分钟，后储存于-20℃恒温冰箱里待测。

（2）检验方法

化学比浊法。利用试剂根据吸光值计算一氧化氮合酶活性。

（3）分析数据

利用方差比较各组之间的数据差异，找出规律，得出结论。

结果分析

注射副溶血弧菌后石斑鱼血清中，一氧化氮合酶的活性显著升高，而且随副溶血弧菌的浓度升高，一氧化氮合酶活性也越高，在注射副溶血弧菌24h后达到峰值，后来，随着时间的延长，一氧化氮合酶的活性逐渐减小。同时注射生理盐水也会引起一氧化氮合酶的活性变化，也是24h、48h的值大于72h和120h，统计结果表明，只有24h的结果与其他时间有差异。

讨论

一氧化氮合酶能催化L-精氨酸，在生物体内生成一氧化氮。一氧化氮合酶有三种同工酶亚型：神经元型一氧化氮合酶；内皮细胞型一氧化氮合酶和诱导形一氧化氮合酶，它们广泛分布在生物神经和内皮上，活性依赖钙离子，当钙离子浓度升高时，诱导型一氧化氮合酶被活化催化合成少量一氧化氮。诱导型一氧化氮合酶在炎症和免疫刺激下可以表达。）研究表明，一氧化氮可以抑制和杀伤病毒、细菌，在生物免疫中起着重要的作用。某些研究表明，诱导型一氧化氮合酶在虹鳟细菌攻毒后可进行表达。本次试验结果表明，注射副溶血弧菌后，石斑鱼体内一氧化氮合酶的活性显著升高，并且，浓度越高的活性越强。说明，副溶血弧菌刺激了石斑鱼体内的免疫系统，也刺激了一氧化氮合酶，产生了一氧化氮，提高了机体免疫力，是生物机体对于外来异物的一种免疫应答反应。

通过对常见养殖鱼类一氧化氮合酶免疫功能的研究，我们知道一定浓度、配上一定时间的副溶血弧菌会提高生物体一氧化氮合酶的活性，从而提高机体免疫力。利用这一特性人类可以进行人为调节一氧化氮在常见养殖鱼类体内的含量，可以增强鱼类的免疫力，保證鱼类的健康，减少养殖鱼类对抗菌药物的使用，提高鱼类的质量与数量，为今后的鱼类养殖提供了新技术。如今许多水产品的质量低下，使用了过量的化学药物和抗生素，对人类健康、生态系统的稳定都产生了极大的影响，利用副溶血弧菌提高鱼类免疫力，增强鱼类的抗病能力，对鱼类养殖很有益处。

作者简介：

魏盟智（1994-），男，河北辛集人，河北农业大学渤海校区，学生，水产养殖学；郝晨光（1995-），男，河北唐山人，河北农业大学渤海校区，学生，水产养殖学；赵子晨（1996-），男，河北石家庄人，河北农业大学渤海校区，学生，水产养殖学。