李志锋，石荣亚，刘进忠，卞永生，孙明德

（河北省保定市第一医院 普外科，河北 保定 071000）

结肠腺癌组织中CDX2、OPN的表达及意义

李志锋，石荣亚，刘进忠，卞永生，孙明德

（河北省保定市第一医院 普外科，河北 保定 071000）

目的探讨尾型同源盒转录因子2（CDX2）与骨桥蛋白（OPN）在结肠腺癌组织的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法检测CDX2和OPN在58例结肠腺癌组织、30例结肠腺瘤组织、30例癌旁正常结肠组织中的表达，了解CDX2、OPN与结肠腺癌患者临床病理特征的关系，并分析两者的相关性。结果CDX2在结肠腺癌、结肠腺瘤、正常结肠组织中阳性表达率分别为62.1%（36/58）、86.7%（26/30）和93.3%（28/30），结肠腺癌组织中的阳性表达率低于结肠腺瘤和正常结肠组织（P＜0.05）。OPN在结肠腺癌、结肠腺瘤、正常结肠组织中阳性表达率分别为74.1%（43/58）、40.0%（12/30）和26.7%（8/30），OPN在结肠腺癌组织中的表达阳性表达率高于结肠腺瘤和正常结肠组织（P＜0.05）。CDX2阳性表达率与患者肿瘤浸润深度、分化程度相关（P＜0.05）；OPN阳性表达率与浸润深度、有无淋巴结转移相关（P＜0.05），与患者年龄、性别、肿瘤形态无关（P＞0.05）。通过Spearman相关分析，结肠腺癌组织中CDX2与OPN的表达呈负相关（P＜0.05）。结论CDX2、OPN的表达可能与结肠腺癌的发生、发展及预后相关，且两者在结肠腺癌组织的表达呈负相关，联合检测可能对结肠癌早期诊断、预后评估具有一定指导意义。

结肠肿瘤；结肠腺瘤；淋巴结转移；尾型同源盒转录因子2；骨桥蛋白

结肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤，其全球发病率位居恶性肿瘤第3位，近年来发病率呈逐年上升的趋势，严重威胁人类健康[1]。尾型同源盒转录因子-2（caudalrelated homeobox 2，CDX2）是同源盒基因家族中重要成员，能够调节肠上皮细胞的增殖、分化，对维持肠上皮细胞的表型起关键作用。骨桥蛋白（Osteopontin，OPN）是一种分泌性的磷酸化糖蛋白，在多种组织细胞中发现，具有促进细胞的黏附、迁移功能，参与细胞的增殖、浸润等病理过程。本文通过免疫组织化学法检测CDX2、OPN在结肠腺癌中的表达情况，探讨其与结直肠癌发生、发展的关系。

1 资料与方法

1.1 临床资料

选取2013年2月-2015年10月河北省保定市第一医院手术切除的58例结肠腺癌患者资料。其中，男性33例，女性25例；年龄33～78岁，平均63.8岁。病理类型：高、中分化腺癌35例，低分化腺癌23例。有淋巴结转移32例，无淋巴结转移26例。同时选取30例距结肠癌组织5 cm非癌结肠组织和30例结肠镜切除腺瘤组织作为对照。所有患者术前未做放、化疗等相关抗癌治疗。

1.2 方法

标本均中性甲醛固定，常规石蜡包埋后行4μm厚连续切片。石蜡切片经脱蜡、水化，按免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（streptavidin-perosidase，SP）染色，显微镜下观察切片染色。OPN兔抗人单克隆抗体购于上海研晶生物技术公司，CDX2鼠抗人单克隆抗体、SP通用型免疫组织化学法试剂盒及二氨基联苯氨显色试剂盒均购于福州迈新生物技术公司。

1.3 结果判断

CDX2蛋白阳性染色定位于细胞核，OPN阳性定位于细胞质，根据染色强度、阳性细胞数所占比例综合评分，由2位高年资病理医师盲法判读。着色强度：无着色为0分，浅黄色为1分，棕黄色为2分，深褐色为3分；阳性细胞百分率：阳性细胞百分数≤5%为0分，6%～25%为1分，26%～50%为2分，＞50%为3分；2项得分相加，0～2分为阴性（-），≥3分为阳性（+）。

1.4 统计学方法

数据分析采用SPSS 17.0统计软件，计数资料以率或百分比表示，两组用χ2检验（1＜T≤5时，校正），3组行列表资料的χ2检验，如差异有统计学意义则行两两比较用χ2检验，检验水准α=0.0125；CDX2与OPN的关系用Spearman相关性检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CDX2、OPN在结肠腺癌、结肠腺瘤、正常结肠组织中的表达

CDX2、OPN在肿瘤细胞胞核、胞质中为浅黄色、棕黄色、深褐色颗粒。CDX2在结肠腺癌、结肠腺瘤、正常结肠组织中的阳性表达率分别为62.1%（36/58）、86.7%（26/30）和93.3%（28/30），经χ2检验，差异有统计学意义（χ2=13.081，P=0.001），CDX2在结肠腺癌中阳性表达率低于结肠腺瘤和正常结肠组织。OPN在结肠腺癌、结肠腺瘤、正常结肠组织中的阳性表达率分别为74.1%（43/58）、40.0%（12/30）和26.7%（8/30），经χ2检验，差异有统计学意义（χ2=20.804，P=0.000），OPN在结肠腺癌的阳性表达率高于结肠腺瘤和正常结肠组织。见表1。

2.2 CDX2、OPN在结肠腺癌表达与临床病理特征的关系

CDX2在结肠腺癌阳性表达与患者肿瘤浸润深度、分化程度相关（P＜0.05），OPN阳性表达与浸润深度、有无淋巴结转移相关（P＜0.05）；与患者年龄、性别、肿瘤形态无相关性（P＞0.05）。见表2。

2.3 CDX2、OPN在结肠腺癌组织中表达的相互关系

CDX2阳性表达的36例结肠腺癌组织中OPN阳性表达23例（63.9%），CDX2阴性表达的22例结肠腺癌组织中OPN阳性表达20例（90.9%），结肠腺癌组织中CDX2表达与OPN表达呈负相关（r= -0.299，P=0.022）。

表1结肠腺癌、结肠腺瘤、正常结肠组织中C D X2、O PN的表达 例（%）

表2 临床病理特征与CDX2、OPN在结肠腺癌表达的关系例

3 讨论

尾型同源相关基因是调节胃肠组织增殖分化的基因家族，其中的CDX2基因及其相关蛋白CDX2在人体消化道肿瘤发生机制中发挥重要作用[2-3]。CDX2基因位于人体染色体13q12和13q13，全长22～23kb，由3个外显子和2个内含子构成。CDX2作为抑癌基因的角色存在于正常大肠黏膜中，对肠上皮细胞的分化过程起关键作用。CDX2参与调节肠上皮细胞的分化可能是通过调控Wnt信号转导通路来实现的。该通路的激活可募集胞质内游离的β连环素（β-catenin），β-catenin活化后转入细胞核，与转录因子T细胞因子（t-cell factor，TCF）/淋巴增强因子结合，导致细胞的异常增殖。CDX2通过抑制βcatenin/TCF活性调控Wnt信号的转导，从而影响细胞生长、发育及分化。CDX2还可以通过降低环氧合酶2转录而抑制肿瘤发生[4]。研究证实，在大肠腺癌患者的组织中CDX2呈低表达，CDX2的下调表达可能参与大肠腺癌的发生、发展，对临床临床诊断、判断预后具有较大的意义。但对于CDX2在大肠肿瘤中下调表达的原因尚未明确，还需进一步研究。

OPN是一种分泌型钙结合磷酸化糖蛋白，其存在于人体破骨细胞、成骨细胞、T细胞、巨噬细胞、肾、血管平滑肌细胞等多种细胞。OPN有2种受体：①钙依赖性的整合素受体，OPN可通过特有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列整合素受体位点与其结合；②细胞表面黏附分子CD44受体。OPN通过与2种受体结合，可增强细胞黏附，介导细胞移行，在肿瘤细胞的发生、浸润及转移等方面发挥关键作用[5]。

OPN通过与多种受体结合，活化基质金属蛋白酶，降解细胞外基质，可改变细胞骨架结构，引起细胞骨架蛋白重组，促使肿瘤细胞的趋化、黏附、移行，从而增强肿瘤细胞侵袭能力[6-7]。OPN还可以促进肿瘤血管形成。研究发现，在胃癌中OPN和血管内皮生长因子C均呈高表达且表达水平呈正相关[8]。

本实验发现，CDX2在结肠腺癌中的阳性表达率低于结肠腺瘤、正常结肠组织，而OPN的阳性表达率高于结肠腺瘤、正常结肠组织。CDX2在结肠腺癌阳性表达率与患者肿瘤浸润深度、分化程度相关；OPN阳性表达率与浸润深度、有无淋巴结转移相关。通过Spearman相关分析发现，CDX2与OPN在结肠腺癌组织中表达呈负相关。CDX2可能作为转录因子方式调节OPN的表达[9]，CDX2表达降低或者缺失可能会引起信号通路的调控异常，促使OPN表达升高，导致瘤细胞的增殖、浸润及转移。

恶性肿瘤的发生、发展是一个多基因、多因子共同作用的结果。CDX2与OPN在结肠腺癌的发生、浸润及转移过程中可能发挥重要作用。两者联合检测对于结肠腺癌诊断、鉴别诊断及预后评估具有重要意义。但结肠腺癌组织是通过何种机制造成2项指标的变化，以及两者在结肠癌的发生、发展过程中的作用关系，还有待进一步研究。

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（童颖丹 编辑）

Expressions and significance of caudal-related homeobox 2 and osteopontin in colon adenocarcinoma tissues

Zhi-feng Li,Rong-ya Shi,Jin-zhong Liu,Yong-sheng Bian,Ming-de Sun
(Department ofgeneral Surgery,Baoding First Hospital,Baoding,Hebei 071000,China)

ObjectiveTo explore expression and clinical significance of caudal-related homeobox 2 (CDX2)and osteopontin(OPN)in colon adenocarcinoma tissues.MethodsThe expressions of CDX2 and OPN in colon adenocarcinoma tissues of 58 cases,colon adenoma tissues of 30 cases and normal colon tissues of 30 cases were detected with immunohistochemical SP method.And their correlations with clinicopathological features were analyzed.MethodsThe positive expression rate of CDX2 in the colon adenocarcinoma,the colon adenoma and the normal colon tissues was 62.1%(36/58),86.7%(26/30)and 93.3%(28/30)respectively.The CDX2 positive expression rate in the colon adenocarcinoma was significantly lower than that in the colon adenoma and the normal colon tissues (P＜0.05).The positive expression rate of OPN in the colon adenocarcinoma,the colon adenoma and the normal colon tissues was 74.1% (43/58),40.0% (12/30)and 26.7% (8/30)respectively.The OPN positive expression rate in the colon adenocarcinoma was significantly higher than that in the colon adenoma and the normal colon tissues(P＜0.05).The CDX2 positive expression rate in the colon adenocarcinoma was related with tumor infiltration depth and differentiation degree(P＜0.05). The OPN positive expression rate in the colon adenocarcinoma was related with tumor infiltration depth and lymph node metastasis (P＜0.05).Neither CDX2 nor OPN was correlated with age,sex or tumor shape. Spearman correlation analysis showed that there was a negative correlation between the expressions of CDX2 and OPN in the colon adenocarcinoma (P＜0.05).ConclusionsThe expressions of CDX2 and OPN may be correlated to the occurrence,development and prognosis of colon adenocarcinoma.CDX2 and OPN are in anegative correlation in colon adenocarcinoma tissues.The combined detection is important for early diagnosis and prognosis assessment of colon adenocarcinoma.

colon adenocarcinoma;colon adenoma;lymph node metastasis;caudal-related homeobox 2; osteopontin

R735.35

A

2016-01-07

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.20.024

1005-8982（2017）20-0113-04