益母草炮制方法的历史沿革及现代药学研究进展Δ

2017-09-03郭小红重庆市中医院药剂科重庆400021

中国药房 2017年22期

刘霞，徐冲，郭小红，孙全，杨敏，冷静（重庆市中医院药剂科，重庆 400021）

刘霞＊，徐冲，郭小红，孙全，杨敏，冷静#（重庆市中医院药剂科，重庆 400021）

目的：为进一步研究和开发益母草炮制品提供参考。方法：以《历代中药炮制资料辑要》一书为线索，回溯核查本草原著8部；对新中国成立以来共10个版本的《中国药典》与《全国中药炮制规范》以及18个省、市、自治区制定的地方炮制规范进行文献调查；以“益母草”“炮制”“Leonurus japonicus Houtt.”“Processing”等为关键词，组合查询1990－2016年在PubMed、ScienceDirect、中国知网、万方、维普等数据库中的相关文献，对益母草炮制方法的历史沿革和益母草的现代研究进行综述。结果：古代记载益母草炮制方法多样，包括炒制、制炭、酒制、醋制、蜜制和四制益母草等，但沿用至今的有生品、酒制品和益母草炭，其他方法现已很少用或不用。在炮制对益母草的化学成分影响方面，益母草药材经过炮制后生物碱及黄酮类含量明显降低；经酒炙后活血祛瘀、调经止痛作用增强的有效成分是丁香酸，而不是芦丁；炒炭后益母草总生物碱（有效成分）损失36%，认为益母草因止血而炭炒是不合理的。在炮制对益母草的药理作用影响方面，传统的将益母草晒干和煎煮入药的方法可能造成其有效成分的损失，用新鲜的益母草取代传统的干草入药在药效上具有合理性。在炮制对益母草的毒副作用影响方面，炮制可降低益母草的毒性，但不同炮制方法的减毒作用存在差异。结论：目前对益母草炮制品研究较少，基础研究非常薄弱，发挥功效的药效物质基础尚不明确，质量控制方法和技术手段仍比较落后。今后应深入研究益母草炮制品的物质基础、质量控制方法以及炮制机制。

益母草；炮制；历史沿革；现代研究

益母草为传统常用中药，来源于唇形科植物益母草（Leonurus japonicus Houtt.）的新鲜或干燥地上部分。其味苦、辛，性微寒，归肝、心包、膀胱经，具有活血调经、利尿消肿、清热解毒之功效，常用于月经不调、痛经闭经、恶露不尽、水肿尿少、疮疡肿毒[1]。

益母草始载于《神龙本草经》，名“茺蔚”，列为上品，但无炮制方法记载。历代医方本草对益母草炮制方法记载颇多，但尚无文献对其作系统阐述。笔者以《历代中药炮制资料辑要》一书为线索，回溯核查本草原著8部；对新中国成立以来共10个版本的《中国药典》与《全国中药炮制规范》以及北京、上海、重庆、四川、陕西、河南、黑龙江、贵州、云南、浙江、湖南、福建、吉林、江苏、山东、安徽、江西、广西等18个省、市、自治区制定的地方炮制规范进行文献调查；以“益母草”“炮制”“Leonurus japonicus Houtt.”“Processing”等为关键词，组合查询1990－2016年在PubMed、ScienceDirect、中国知网、万方、维普等数据库中的相关文献。现对益母草炮制方法的历史沿革和益母草的现代药学研究进行综述，以期为进一步研究和开发益母草炮制品提供参考。

1 益母草炮制方法的历史沿革

1.1 古代炮制方法

综合历代本草制法，其炮制方法大致分为净制、切制和炮炙3类。

1.1.1 净制最早提及益母草须净制的是明代张浩的《仁术便览》，载有“去根，枝叶子全用，忌铁器”[2]；明代武之望在《济阴纲目》中也提出了“东流水洗净，烘干为末”的净制方法[3]。

1.1.2 切制明代陈嘉谟在《本草蒙荃》中最早记载了“细剉”的炮制方法[4]；随后明代张介宾在《景岳全书》中也提出了“不见铁器，晒，杵为末”[5]。

1.1.3 炮炙炒炭法始载于宋代王怀隐的《太平圣惠方》[6]。明代陈嘉谟在《本草蒙荃》中记载“细剉醋炒，马啮堪敷”[4]。清代屠道和在《本草汇纂》中载有“微炒”[7]。清代鲍相璈在《验方新编》中有“烧灰存性”的记载[8]。清代严西亭的《得配本草》中载有“蜜水炒”“酒拌蒸”[9]。

1.2 现代炮制方法

与古代炮制方法比较，益母草的现代炮制方法并不复杂，但由于历史等多方面的原因，炮制方法目前尚没有完全统一，各地在继承传统经验时均保留了地方特点。在净制和切制方面比较统一，即除去杂质、洗净、略润、切段、干燥。在炮炙方面，主要沿袭了古代的酒制方法。笔者通过对文献进行调查发现，酒制法全国有6个地区沿用，但酒制方法和酒的种类不完全相同，各地用酒量也不统一，详见表1[10-16]。

2 益母草的现代药学研究

2.1 炮制对益母草化学成分的影响

目前从益母草属植物中分离鉴定出的化合物约140个，主要包括生物碱类、黄酮类、二萜类、苯乙醇（苷）类、脂肪酸类、环形多肽等[17-18]。生物碱是益母草主要化学成分，也是其主要活性成分。但到目前为止，从益母草中仅分离鉴定出益母草啶、益母草宁、益母草碱和水苏碱4个生物碱类化合物[19]。其中，益母草碱和水苏碱是研究最多的，除两者同时被2010年版和2015年版《中国药典》（一部）收载用于作为益母草质量控制的考察指标外，水苏碱也常被用于作为含益母草复方制剂的质量控制指标[20-21]。

表1 益母草酒制方法

程轩轩等[22]对益母草不同炮制方法下的益母草碱、芦丁和金丝桃苷含量采用高效液相色谱法进行测定发现，不同炮制品中有效成分含量比较生品＞醋炙品＞酒炙品，表明益母草药材经过炮制后生物碱及黄酮类含量明显降低。江海燕等[23]采用紫外分光光度法对益母草不同炮制品的生物碱含量进行对比分析发现，不同炮制方法下益母草生物碱的含量比较醋炙品＞生品＞酒炙品＞炒黄品；不同温度、不同时间下，益母草酒炙品的生物碱含量差异很大，且以140℃、20 min下酒炙品生物碱含量最高。这提示不同炮制方法和炮制温度对益母草中生物碱含量影响较大。丛悦等[24]采用高效液相色谱-紫外法测定不同产地益母草和酒炙益母草中芦丁和丁香酸的含量发现，河南栾川采收的益母草中芦丁和丁香酸含量最高；益母草经酒炙后，芦丁含量降低，丁香酸含量升高，表明益母草经酒炙后活血祛瘀、调经止痛作用增强的有效成分是丁香酸，而不是芦丁。宋崎等[25]以益母草炮炙时的干燥时间与温度为考察因素，以盐酸水苏碱含量、含水量为考察指标，采用综合加权评分法对测定结果进行分析发现，益母草的最佳炮制工艺为干燥温度40℃，干燥时间3.5 h。马亚民等[26]以盐酸水苏碱量计算总生物碱含量发现，益母草炒炭后总生物碱（有效成分）损失36%，认为益母草因止血而炒炭是不合理的。

2.2 炮制对益母草药理作用的影响

益母草中的很多化学成分具有良好的体内或体外生物活性，尤其是生物碱具有明显的心血管保护作用和子宫调节作用[27-28]。刘新华[29]用化学全合成的方法得到益母草碱，采用乳鼠心肌细胞缺氧、H9C2细胞系氧化应激、大鼠急性心肌梗死和心力衰竭的体外模型来研究益母草碱对心血管的保护作用，结果发现益母草碱主要通过抗氧化对心肌细胞有直接的保护作用。单晓莉、赵培等[30-31]分别采用Ⅱ型胶原酶分离新生大鼠心肌细胞和改良的Simpson法培养乳鼠心肌细胞来研究水苏碱对去甲肾上腺素诱导的新生大鼠和乳鼠心肌细胞肥大的作用，结果显示水苏碱能抑制去甲肾上腺素诱导的心肌细胞肥大。秦美蓉等[32]研究盐酸益母草碱和盐酸水苏碱对大鼠离体子宫收缩的影响时发现，盐酸益母草碱和盐酸水苏碱作用于未处理大鼠离体子宫时均未见对子宫肌产生明显收缩作用，而对缩宫素致大鼠离体子宫收缩则分别呈现出抑制和增强（或协同）的作用。益母草还具有改善微循环及心肌缺血、防止血小板聚集和降低血液黏度、促进淋巴微循环及T淋巴细胞增殖、利尿、抗炎、镇痛等方面的作用[33-34]。

杨明华等[35]对不同生长时期采收的益母草以及同一批新鲜益母草和晒干益母草的缩宫效应进行比较时发现，相同剂量下，不同生长时期益母草的缩宫作用比较营养期＞花前期＞盛花期；相同剂量下，鲜益母草榨汁液的缩宫作用明显强于同一批次的干草煎煮液，故认为传统的将益母草晒干和煎煮入药的方法可能造成其有效成分的损失，用新鲜的益母草取代传统的干草入药在药效上具有合理性。

2.3 炮制对益母草毒副作用的影响

益母草虽被《神龙本草经》列为上品，一般认为毒性不大，但近年来益母草及其制剂的不良反应报道日益增多，其中以益母草导致肾损伤最为引人关注[36-37]。

孙蓉等[38]将益母草水煎液按高、低剂量组（90、30 g/kg）连续给大鼠灌胃90 d，研究益母草对大鼠的肾毒性时发现，高剂量组大鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肌酐（Cr）及尿素氮（BUN）水平均明显增高；高剂量组中50%大鼠肾髓质的间质中有纤维组织增生，40%大鼠肾小管上皮有明显浊肿，表明益母草大剂量会造成不同程度的肾形态学改变。黄伟等[39]进行了长期、大量给予益母草醇提取物导致大鼠肾毒性的机制研究，将益母草醇提取物按高、中、低剂量组（120、60、30 g/kg）连续给大鼠灌胃90 d，检测血中丙二醛（MDA）、总巯基（—SH）、还原型谷胱甘肽（GSH）以及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性，结果益母草醇提取物可导致血中总—SH、MDA含量增加，GSH含量降低，SOD、GSH-Px活性下降，这些变化随剂量的增加而逐渐加重，与空白对照组比较有明显差异。这表明益母草醇提取物导致大鼠肾毒性损伤途径与引起机体的氧化应激诱导肾细胞脂质过氧化作用增强有关，也与机体氧化应激后诱导脂质过氧化和组织内活性分子—SH损耗而造成肾组织损伤有关。

罗毅等[40-41]将益母草总生物碱提取物（AE）按高、低剂量[1.23、0.615 g/（kg·d）]给小鼠连续灌胃15 d，将益母草石油醚提取物按60 g/（kg·d）剂量给大鼠连续灌胃15 d，测定血清中ALT、AST、Cr、BUN、尿蛋白（Upro）、尿N-乙酰氨基葡萄糖苷酶水平，考察益母草AE和石油醚提取物对大鼠肝、肾的亚急性毒性作用。结果，AE高剂量组小鼠血清中AST明显增高，其余各肝、肾功能指标无明显改变，而AE低剂量组小鼠各指标无明显异常；给药组小鼠肝、肾组织均未见明显病理改变。这表明AE灌胃对小鼠并没有明显的肝肾毒性，仅高剂量时可影响小鼠肝功能。而益母草石油醚提取物的血清中上述指标水平明显升高，肝、肾组织可见肿胀、少量炎细胞浸润等病理损伤；停药后Upro水平依然升高，其余肝、肾功能指标水平均降低，组织病理损伤有所减轻。这表明益母草石油醚提取物有明显的肝肾毒性，对Upro水平的影响短期内不可逆，其余毒性影响均具有可逆性，提示益母草的毒性成分可能主要存在于其石油醚提取物中。

黄伟等[42]通过比较鲜益母草、干益母草、酒炙益母草3种炮制品的95%乙醇回流提取物对小鼠急性毒性，发现益母草不同炮制品对小鼠急性毒性大小依次为鲜益母草＞干益母草＞酒炙益母草，其中鲜益母草、干益母草的半数致死剂量分别为83.089、102.93 g/kg。这提示炮制可降低益母草的毒性，但不同炮制方法的减毒作用存在差异。

3 结语

综上所述，古代记载益母草炮制方法多样，包括炒制、制炭、酒制、醋制、蜜制和四制益母草等，但沿用至今的有生品、酒制品和益母草炭，其他方法现已很少用或不用。在炮制对益母草的化学成分影响方面，益母草药材经过炮制后生物碱及黄酮类含量明显降低；经酒炙后活血祛瘀、调经止痛作用增强的有效成分是丁香酸，而不是芦丁；炒炭后益母草总生物碱（有效成分）损失36%，认为益母草因止血而炭炒是不合理的。在炮制对益母草的药理作用影响方面，传统的将益母草晒干和煎煮入药的方法可能造成其有效成分的损失，用新鲜的益母草取代传统的干草入药在药效上具有合理性。在炮制对益母草的毒副作用影响方面，炮制可降低益母草的毒性，但不同炮制方法的减毒作用存在差异。

目前对益母草炮制品研究较少，基础研究非常薄弱，发挥功效的药效物质基础尚不明确，质量控制方法和技术手段仍比较落后。今后应深入研究益母草炮制品的物质基础、质量控制方法以及炮制机制。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S].2015年版.北京：中国医药科技出版社，2015：290-291.

[2] 明·张浩.仁术便览[M].北京：商务印书馆，1957：339.

[3] 明·武之望.济阴纲目[M].北京：中国中医药出版社，1998：179.

[4] 明·陈嘉谟.本草蒙荃[M].北京：中医古籍出版社，2009： 68.

[5] 明·张介宾.景岳全书[M].北京：人民卫生出版社，1991：1185.

[6] 宋·王怀隐.太平圣惠方[M].北京：人民卫生出版社，1958：1218.

[7] 清·屠道和.本草汇纂[M].北京：国医砥柱社，1936：69-70.

[8] 清·鲍相璈.验方新编[M].北京：中国中医药出版社，1994：294.

[9] 清·严西亭.得配本草[M].上海：上海卫生出版社，1958：92.

[10] 中华人民共和国卫生部药政管理局.全国中药炮制规范[S].北京：人民卫生出版社，1988：234-235.

[11] 江西省食品药品监督管理局.江西省中药饮片炮制规范[S].上海：上海科学技术出版社，2009：424-425.

[12] 重庆市食品药品监督管理局.重庆市中药饮片炮制规范及标准[S].重庆：重庆市卫生局，2006：381-382.

[13] 四川省药品监督管理局.四川省中药饮片炮制规范[S].成都：四川省药品监督管理局，2002：378.

[14] 湖南省食品药品监督管理局.湖南省中药饮片炮制规范[S].长沙：湖南科学技术出版社，2010：379-380.

[15] 福建省卫生厅.福建省中药炮制规范[S].福州：福建科学技术出版社，1988：405-406.

[16] 陕西省食品药品监督管理局.陕西省中药饮片标准[S].西安：陕西科学技术出版社，2008：176-177.

[17] 张雪，宋玉琴，杨雨婷，等.益母草活血化瘀化学成分与药理作用研究进展[J].药物评价研究，2015，38（2）：214-217.

[18] 李锟，王树真，李乐，等.益母草的化学成分和药理作用研究进展[J].广东化工，2014，41（2）：54-55.

[19] Shang X，Pan H，Wang X，et al.Leonurus japonicus Houtt.：ethnopharmacology，phytochemistry and pharmacology of an important traditional Chinese medicine[J].J Ethnopharmacol，2014，152（1）：14-32.

[20] 朱友林.HPLC法测定癃闭舒胶囊中盐酸水苏碱的含量[J].中国药房，2011，22（16）：1509-1511.

[21] 方慧祥，孔艳娥.HPLC法测定八珍益母片中盐酸水苏碱的含量[J].中国药房，2014，25（16）：1517-1519.

[22] 程轩轩，桑雪雨，杨全，等.不同炮制方法及提取溶剂对益母草有效成分含量的影响[J].中国医院药学杂志，2013，33（22）：1850-1852.

[23] 江海燕，陈国佩，宁海梅.益母草不同炮制品的质量研究[J].中成药，2002，24（4）：271-272.

[24] 丛悦，王艳，谢欣梅，等.HPLC-UV法测定益母草和酒炙益母草中丁香酸和芦丁的含量[J].河南大学学报（自然科学版），2010，40（5）：507-510.

[25] 宋崎，周小初，宋英，等.益母草炮制工艺的优化[J].时珍国医国药，2009，20（3）：709-710.

[26] 马亚民，梁景武，聂惠生.从益母草炭总生物碱的损失看益母草炭用药的不合理[J].陕西中医学院学报，1994，17（2）：32-33.

[27] 宋韶鹤，苗明三.益母草碱的研究概况[J].中国中医药现代远程教育，2016，14（3）：141-143.

[28] 叶绿萍.水苏碱的药理作用研究进展[J].河北医药，2016，38（1）：118-121.

[29] 刘新华.益母草碱的合成及其对心血管保护作用的研究[D].上海：复旦大学，2009.

[30] 单晓莉，章忱，廖月玲，等.益母草水苏碱抑制去甲肾上腺素诱导心肌细胞胚胎基因再表达的作用[J].上海中医药杂志，2013，47（2）：70-72.

[31] 赵培，吕嵘，卫洪昌.益母草水苏碱干预NE诱导乳鼠心肌细胞肥大的作用[J].中药药理与临床，2010，26（2）：16-19.