郑志方 陈国利 刘 霞 冯小娜 蒋海燕 金子超

血清淀粉样蛋白A、超敏C反应蛋白和降钙素原检测在儿童原发性肾病综合征中的应用价值及相关性分析*

郑志方①*陈国利②刘 霞①冯小娜③蒋海燕③金子超④

目的：探讨血清淀粉样蛋白A(SAA)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)和降钙素原(PCT)检测在儿童原发性肾病综合征(PNS)病变中的临床应用价值。方法：选取医院收治的95例PNS患儿，分为两组，单纯型肾病患儿分为单纯组(67例)，肾炎型肾病患儿分为肾炎组(28例)；另选取同期健康体检的50名健康儿童为健康对照组。采集3组的静脉血，应用胶体金法测定SAA，电化学发光法测定血清PCT水平，免疫比浊法测定hs-CRP水平。比较各组SAA、hs-CRP、PCT、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、白细胞(WBC)和中性粒细胞百分比(N)水平等。结果：单纯组患儿SAA、hs-CRP和PCT水平分别为(31.59±13.40)mg/L、(11.68±13.35)mg/L和(0.93±1.70) ng/ml；肾炎组患儿SAA、hs-CRP和PCT水平分别为(70.73±19.49)mg/L、(22.31±20.10) mg/L和(1.61±1.19)ng/ml，均高于健康对照组的(5.23±2.18)mg/L、(3.43±2.29)mg/L和(0.20±0.17)ng/ml，差异有统计学意义(t=13.76，t=23.63，t=4.34，t=6.61，t=3.01，t=8.27；P＜0.05)。单纯组中SAA、hs-CRP与BUN均呈现正相关(r=0.253，r=0.251；P＜0.05)。结论：SAA、hs-CRP和PCT在一定程度上参与了PNS疾病的过程，联合监测SAA、hs-CRP和PCT可为PNS的诊断、病情监测等方面提供实验室依据。

血清淀粉样蛋白A、超敏C反应蛋白；降钙素原；原发性肾病综合征；儿童

临床上，肾病综合征(nephrotic syndrome，NS)以大量蛋白尿、低蛋白血症、高脂血症以及水肿为特点，病理及生理改变使肾小球基底膜通透性增加，使大量血浆蛋白从尿中丢失。在病因上，NS可分为原发性、继发性和先天性三种，而原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome，PNS)最多见，占小儿时期NS总数的90%左右。但是，PNS的病因及发病机制并不十分明确，常伴有严重的炎症反应。本研究回顾性分析了95例PNS患儿，并对其进行感染性指标血清淀粉样蛋白A(serum amyloid A，SAA)、超敏C反应蛋白(high sensitivity C-reactive protein，hs-CRP)和降钙素原(procalcitonin，PCT)的水平测定，进一步探讨炎性指标在儿童PNS中的应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

随机选取2009年12月至2014年12月承德医学院附属医院收治的95例PNS患儿，其中男性72例，女性23例；年龄1.45～13.00岁，平均年龄(6.28±2.78)岁；将其中单纯型肾病患儿分为单纯组(67例)，肾炎型肾病患儿分为肾炎组(28例)，另选取同期健康体检的50名健康儿童为健康对照组。单纯组中男性48例，女性19例；年龄1.97～13.00岁，平均年龄(6.42±2.80)岁。肾炎组中男性24例，女性4例；年龄1.45～12.60岁，平均年龄(5.93±2.75)岁。健康对照组中男性39例，女性11例；年龄1.23～12.25岁，平均年龄(6.00±2.98)岁。3组的一般资料无差异，具有可比性。本研究为回顾性分析，获得医院伦理委员会批准。

1.2 纳入与排除标准

(1)纳入标准：①0.25岁＜发病年龄≤14岁；②所有患儿诊断均符合2009年中华医学会儿科学分会肾脏病学组制订的诊断标准[1]。即大量蛋白尿，l周内3次尿蛋白3+～4+，24 h尿蛋白≥50 mg/kg，白蛋白≤25 g/L；③总胆固醇≥5.7 mmol/L；④不同程度的水肿。按照标准中临床分型可分为：单纯型和肾炎型；⑤患者及家属签署知情同意书。

(2)排除标准：①排除乙型肝炎病毒相关性肾炎及紫癜性肾炎等的继发性肾病综合征；②病患为Wilms瘤等有肾外表现。

1.3 仪器与材料

SAA应用SAA-SPOT定量试剂盒(上海奥普生物医药有限公司)，通过胶体金法进行检测。PCT试剂盒购自上海罗氏诊断产品有限公司，采用罗氏COBAS E411电化学发光仪(罗氏诊断产品有限公司，瑞士)测定。C反应蛋白试剂盒(上海奥普生物医药有限公司)，通过胶乳增强透射免疫比浊法测定。白细胞(WBC)计数采用希森美康Sysmex XN-3000型全自动血细胞分析仪(日本，希森美康生物技术公司)进行检测。

1.4 检测方法

在患儿入院时抽取静脉血，急查血常规、血生化、SAA、PCT、hs-CRP。SAA结果以SAA≥8 mg/ L为阳性。PCT结果以PCT≥0.5 ng/ml为阳性。C反应蛋白结果以CRP≥8 mg/L为阳性。WBC计数结果以WBC≥10×109/L为阳性。

1.5 观察与评价指标

检测分析各组SAA、CRP、PCT、尿素氮(blood urea nitrogen，BUN)、肌酐(urine creatinine，Cr)、WBC和中性粒细胞百分比(Neutrophil percentage，N)值水平；对SAA、hs-CRP和PCT测定值与BUN和Cr进行相关分析。

1.6 统计学方法

本研究采用SPSS19.0统计软件对所得数据进行统计学分析，计量资料结果以均值±标准差(±s)表示，计数资料表示为率(%)，均数两两比较应用t检验，统计结果以P＜0.05为差异有统计学意义。

表1 各组检测SAA、hs-CRP、PCT、BUN、Cr、WBC以及N值水平

2 结果

2.1 各组检测SAA、hs-CRP、PCT、BUN、Cr、WBC水平和N值的情况比较

单纯组和肾炎组测定的SAA、hs-CRP、PCT、BUN、Cr、WBC和N值水平均高于健康对照组；单纯组SAA、hs-CRP、PCT、BUN和Cr与健康对照组比较，差异有统计学意义(t=13.76，t=4.34，t=3.01，t=7.18，t=8.47；P＜0.05)；肾炎组SAA、hs-CRP、PCT、BUN和Cr与健康对照组比较，差异有统计学意义(t=23.63，t=6.61，t=8.27，t=12.21，t=14.88；P＜0.05)，见表1。单纯组与肾炎组之间的SAA、hs-CRP和PCT水平比较无差异。提示SAA、hs-CRP和PCT的3项指标能够在PNS的发生、发展过程中发挥作用，因此可在PNS明确诊断及监测病情时作为重要的检测指标。

2.2 SAA、hs-CRP和PCT测定值与BUN和Cr的相关分析比较

两组的95例患儿SAA、hs-CRP和PCT为自变量，分别与BUN和Cr进行相关分析比较。结果显示，单纯组SAA、hs-CRP与BUN均呈正相关(r=0.253，r=0.251；P＜0.05)。相关性比较如图1、图2所示。

图1 单纯组SAA与BUN相关性比较散点图

图2 单纯组hs-CRP与BUN相关性比较散点图

3 讨论

PNS在临床中多呈隐匿性起病，病因和发病机制尚不十分明确，临床上的治疗仍以糖皮质激素为首选药物。虽然目前已报道的许多单基因突变如NPHS1、NPHS2、WT1、PLCE1、CD2AP和ACTN4可导致激素耐药型肾病综合征(steroid-resistant nephrotic syndrome，SRNS)，但临床上仍已激素敏感型肾病综合征(steroid-sensitive nephrotic syndrome，SSNS)占大多数[2-14]。肾小球基底膜由于受到许多炎性细胞及介质侵犯而使其通透性增加，导致大量血清蛋白透过滤过屏障，致使PNS患儿尿液中蛋白含量增加。目前一致认为感染是影响本病激素疗效的重要因素[15]。因此，炎性细胞因子和炎性反应的研究为探讨PNS患儿的病情发生、发展提供了新的研究方向。对此，本研究通过回顾性分析PNS患儿的临床资料，对其炎性指标(SAA、hs-CRP、PCT)进行测定，结果发现PNS合并细菌感染患儿的SAA、hs-CRP和PCT均高于健康对照组，表明SAA、hs-CRP和PCT参与了PNS疾病的发生以及发展过程，可能是导致PNS患儿发病的原因之一。

SAA属于急性时相反应蛋白，是组织SAA的前体物质，一种高度异质性蛋白，主要在肝脏分泌，是一类多基因编码的多形态蛋白家族，组织SAA的前体物质。在健康人血液中少量存在，但当人体处于炎症、疾病活动期或组织损伤时，可迅速在8～24 h内升高，尤其当细菌或病毒感染时。在炎症刺激下，肝脏分泌大量的SAA，比CRP积聚更明显，SAA血浆浓度上升更快，Tanaka等[16]报道显示，在细菌、病毒或真菌，甚至外伤、肿瘤，急性炎症等相关疾病中均有检测到SAA升高，与本组研究发现的PNS患儿血清中SAA的水平明显高于对照组报道一致。

CRP由肝脏合成，是一种在全身性炎症反应过程中所产生的急性期重要的极其敏感的非特异性炎性标志物之一。CRP通常在正常人体内含量极少，但在病毒或细菌感染、梗塞、免疫复合物沉积等因素导致的组织损伤后，由巨噬细胞释放白细胞介素等刺激肝细胞合成CRP迅速增加。hs-CRP采用超敏感检测技术，之后检测到较低浓度的CRP，而hs-CRP对于检测炎症反应更灵敏、准确。在PNS患儿中，由于多种不同致病因素的共同作用，使肾小球内皮细胞出现损伤，导致炎症细胞及炎性介质释放入血而发生一系列病理改变，从而使肾小球损伤令hs-CRP升高。

本研究中PNS患儿血清中hs-CRP的水平高于健康对照组，比较结果表明差异有统计学意义。此外，hs-CRP与BUN相关性研究结果显示，单纯组C反应蛋白与BUN呈正相关，表明在患病情况下，监测CRP水平不仅能反映其与PNS的发病情况，同样也能表明其可以反映PNS患儿的肾功能情况。研究亦对单纯型和肾炎型NS的CRP水平与对照组进行了比较，结果显示均有显著差异，且肾炎型肾病其CRP水平与对照组相比，差异更显著，表明CRP在PNS患儿中具有一定的临床应用价值。

正常代谢下，甲状腺C细胞产生PCT，并分泌激素活性的降钙素，PCT是降钙素原的前肽物质，是一种无激素活性的糖蛋白，产生快、半衰期短、稳定性好、不易被降解是其临床特点。健康人血清中PCT的浓度一般＜0.05 ng/ml，但在各种细菌毒素和炎性细胞因子的刺激下，PCT可异常升高，甚至有时可高达10～1000 ng/mL。与本研究中PNS患儿的PCT检测水平高于健康对照组，且比较结果显示有显著差异的报道结果一致。

本研究通过PNS患儿检测SAA、hs-CRP及PCT水平，发现其测定值均高于正常健康儿童，且SAA、hs-CRP水平与BUN均呈正相关，表明感染指标SAA、hs-CRP和PCT参与了PNS的发生、发展过程。因此，临床上检测SAA、hs-CRP和PCT对于PNS的诊断及监测病情等方面具有重要的临床意义，并可提供一定的实验室依据。

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The application value and correlation analysis of SAA, hs-CRP and PCT in primary nephrotic syndrome of children/ZHENG Zhi-fang, CHEN Guo-li, LIU Xia, et al//China Medical Equipment,2017,14(7):88-91.

Objective: To explore the implication value of serum amyloid A (SAA), high sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) and procalcitonin (PCT) in primary nephrotic syndrome (PNS) of children in clinical practice. Methods: 95 children with PNS were divided into simple type group (67 patients with simple nephrotic syndrome) and nephritis group (28 patients with nephritic nephrosis), and 50 healthy children were divided in healthy control group. The venous bloods of three groups were collected, and series of indicators including SAA detected by colloidal gold method, PCT detected by electrochemiluminescence and hs-CRP detected by immunoturbidimetry were detected. And then, the SAA, hs-CRP, PCT, blood urea nitrogen (BUN), creatinine (Cr), white blood cell (WBC) and neutrophil percentage (N) among different groups were compared and analyzed, respectively. Results: In simple type group, SAA, hs-CRP and PCT were (31.59±13.40)mg/L, (11.68±13.35)mg/L, (0.93±1.70)ng/ml, respectively. In nephritis group, the three indicators were (70.73±19.49)mg/L, (22.31±20.10)mg/L and (1.61±1.19) ng/ml, respectively. These indicators of the two groups were significant higher than those (5.23±2.18mg/L, 3.43±2.29mg/L, 0.20±0.17ng/mL) of healthy group (t=13.76, t=23.63, t=4.34, t=6.61, t=3.01, t=8.27, P＜0.05), respectively. In simple type group, there was positive correlation between SAA and BUN and between hs-CRP and BUN, respectively (r=0.253, r= 0.251, P＜0.05). Conclusion: SAA, hs-CRP and PCT participate the progress of PNS in some extent, therefore, the combinative detections of SAA, hs-CRP and PCT can provide references of laboratory for diagnosis and monitoring of PNS.

Serum amyloid A; High sensitivity C-reactive protein; Procalcitonin; Primary nephrotic syndrome; Children [First-author’s address] Department of Pediatrics, Affiliated Hospital of Chengde Medical University, Chengde 067000, China.

郑志方,女,(1984- ),硕士，主治医师。承德医学院附属医院小儿内科，从事小儿内科的诊治工作。

2017-02-18

10.3969/J.ISSN.1672-8270.2017.07.022

1672-8270(2017)07-0088-04

R446.113

A

承德市科学技术研究与发展计划(20151028)“承德地区感染因素对小儿原发性肾病综合征的影响”

①承德医学院附属医院小儿内科 河北 承德 067000

②承德医学院附属医院外一科 河北 承德 067000

③承德宽城满族自治县医院 河北 承德 067600

④承德市宽城满族自治县中心卫生院 河北 承德 067600

*通讯作者：zhengzhifang126@126.com