胡乃军 纪 红

(锦州医科大学附属第一医院普外科，辽宁 锦州 121001)

胃腺癌信号转导与转录调控因子-3、-5和白细胞介素-17A表达及相关性

胡乃军 纪 红1

(锦州医科大学附属第一医院普外科，辽宁 锦州 121001)

目的 检测胃腺癌信号转导与转录调控因子(STAT)-3、-5和白细胞介素(IL)-17A的表达，探讨三者的关系及临床意义。方法 确诊为胃腺癌并行手术治疗的106例患者作为观察组，胃黏膜高级别上皮内瘤变的蜡块组织21例作为对照组1，胃黏膜低级别上皮内瘤变蜡块组织21例作为对照组2，非肿瘤性胃黏膜蜡块组织21例作为对照组3。应用免疫组化方法检测4组中STAT-3、STAT-5和IL-17A的表达。结果 4组中STAT-3、STAT-5和IL-17A的表达差异有统计学意义(均P<0.001)，观察组中STAT-3、STAT-5和IL-17A的表达与肿瘤的最大径、浸润深度密切相关，STAT-3和STAT-5的表达均与肿瘤的淋巴结转移和脉管累犯密切相关(均P<0.05)。相关分析显示STAT-3和IL-17A、STAT-5和IL-17A之间均呈正相关(均P<0.05)。结论 胃腺癌中STAT-3、STAT-5和IL-17A高表达对肿瘤的形成和进展均有促进作用，三者可能具有一定的协同作用。

胃腺癌；信号转导与转录调控因子(STAT)-3；STAT-5；白细胞介素(IL)-17A

胃癌中最多见的是胃腺癌，病变形成和进展中涉及较多的基因和蛋白表达的异常因素〔1〕。研究显示信号转导与转录调控因子(STAT)-3、-5在肿瘤进展中可能有重要作用〔2，3〕，二者可能与白细胞介素(IL)-17A具有一定的协同作用〔4〕。本文对胃腺癌患者术后组织中STAT-3、STAT-5和IL-17A蛋白表达进行检测，分析其临床意义及相关性。

1 资料与方法

1.1 临床资料 2010年6月至2015年6月锦州医科大学附属第一医院经病理医师确诊为胃腺癌后并行手术治疗的患者106例作为观察组，留取术后石蜡包埋的组织。男55例，女51例，年龄26～86岁，平均59.5岁。纳入均符合世界卫生组织诊断标准。胃黏膜高级别上皮内瘤变蜡块组织21例作为对照组1，男11例，女10例，年龄35～76岁，平均51.2岁。胃黏膜低级别上皮内瘤变蜡块组织21例作为对照组2，男10例，女11例，年龄30～78岁，平均54.7岁。非肿瘤性胃黏膜蜡块组织21例作为对照组3，男12例，女9例，年龄40～82岁，平均56.9岁。4组性别、年龄无明显差异(P>0.05)。

1.2 STAT-3、STAT-5和IL-17A的检测方法 STAT-3、STAT-5和IL-17A的检测均基于石蜡包埋术后组织，切片。STAT-3、STAT-5和IL-17A的检测应用免疫组化SP法，二氨基联苯胺(DAB)显色，严格按说明书进行操作，做好质量控制。

1.3 STAT-3、STAT-5和IL-17A的判定方法 STAT-3、STAT-5的表达部位是细胞质，部分表达于细胞核，IL-17A的表达部位是细胞质，以出现棕黄色颗粒为阳性反应细胞，在低倍镜下选择上皮细胞的视野进行观察，然后在400倍视野下进行计数，共选择3个视野，计算阳性率，取平均值，以<10%定为阴性，以≥10%定为阳性。

1.4 统计学方法 采用SAS6.12进行χ2检验和线性相关分析。

2 结 果

2.1 4组中STAT-3、STAT-5和IL-17A阳性率的比较 4组中STAT-3、STAT-5和IL-17A的阳性率差异有统计学意义(均P<0.001)。见表1。

2.2 观察组不同临床特征分组中STAT-3、STAT-5和IL-17A的比较 STAT-3、STAT-5和IL-17A的表达与肿瘤最大径、浸润深度密切相关，STAT-3和STAT-5的表达均与肿瘤的淋巴结转移和脉管累犯密切相关(均P<0.05)。见表2。

表1 4组STAT-3、STAT-5和IL-17A阳性率比较〔n(%)〕

表2 观察组不同临床特征分组中STAT-3、STAT-5和IL-17A的比较〔n(%)〕

2.3 观察组中STAT-3、STAT-5和IL-17A的相关性 STAT-3和IL-17A(r=0.47，P=0.035 7)、STAT-5和IL-17A(r=0.44，P=0.039 8)表达呈正相关。

3 讨 论

胃腺癌是胃黏膜上皮呈腺样分化的一种恶性上皮性肿瘤，病变有多种因素，长期萎缩性胃炎发展为癌是最常见的原因。肠型胃癌随年龄增长速度明显高于弥漫型胃癌〔5〕。在病变形成过程中，肿瘤细胞间质的炎性反应明显，且对病变形成有一定的影响〔6〕。Th17细胞是新发现的T辅助细胞，包括成员IL-17A～E，家族中成员具有高度同源性，其中IL-17A为发起成员，IL-17A可以与机体的上皮细胞、成纤维细胞等多种细胞表面的受体相结合后发挥其特有的生物学作用〔7～9〕。研究显示IL-17A能诱导炎性相关因子的产生，促进趋化因子的释放〔10〕。还有研究认为IL-17A可以刺激支气管上皮杯状细胞与黏膜下腺体产生黏液，刺激IL-6等促炎因子的产生〔11〕。STAT家族是一组具有高度同源性的转录因子，介导多种细胞因子和生长因子的信号向细胞核传导，影响靶基因的转录，同时具有调控细胞的功能〔12〕。STAT-3、STAT-5是家族中典型代表，可被多种细胞因子如IL-2、IL-6和IL-17等多肽类配体激活，进而参与肿瘤的生长、分化、增生和恶性转化的过程〔13〕。研究显示当配体与细胞表面的受体结合后，细胞受体被激活，STAT3蛋白通过自身的SH2结构域相互作用后被招募到受体结合位点〔14，15〕，然后STAT直接通过受体激酶而被磷酸化或间接通过中间激酶而活化，通过与其他转录调控元件的相互作用来调控相关基因的表达〔16，17〕。

本研究提示STAT-3、STAT-5和IL-17A高表达在胃黏膜上皮细胞恶变过程中起重要作用，STAT-3、STAT-5和IL-17A高表达可以促进肿瘤的生长和向肌层、外膜组织的侵袭，此时肿瘤生长活跃，肿瘤增殖快，细胞异型性明显，细胞恶性程度增高。本文提示STAT-3和STAT-5高表达可以促进肿瘤的淋巴道播散。STAT-3和STAT-5可能是转移相关的蛋白，其高表达时使肿瘤呈现高转移的状态。此时在临床及病理诊断中对淋巴结及远隔器官进行检查是必要的。本文提示STAT-3和STAT-5均与IL-17A具有协同作用，IL-17A是炎性和免疫相关的细胞因子，肿瘤细胞周围炎性反应明显，IL-17A在可以活化STAT3的表达，进而使肿瘤性病变与免疫性反应联系在一起〔18，19〕。研究认为STAT3可以识别出靶基因DNA特异的反应元件并与其相互结合，对Bcl-xl、Bcl-2等细胞周期调控基因和血管内皮生长因子的有效表达起一定作用，进而诱发免疫性疾病和肿瘤性疾病〔20〕。陈芳〔21〕认为IL-17A可以与基质金属蛋白酶相互结合，聚集中性粒细胞在炎症区域，同时对肿瘤的侵袭起重要促进作用。Th17 细胞分泌的IL-6、IL-2、IL-23等细胞因子可以诱导STAT3的磷酸化(P)，进而形成P-STAT3，而P-STAT3能结合IL-17mRNA，促进基因的转录，引起IL-17A的表达明显增加(环式循环)。

1 张照果，李 静，刘 岩，等.GRIM-19及其靶基因产物STAT3在胃癌组织中的表达及其意义〔J〕.吉林大学学报(医学版)，2011；37(3)：499-504.

2 Gkouveris I，Nikitakis N，Sauk J.STAT3 Signaling in Cancer〔J〕.J Cancer Ther，2015；6(8)：709-26.

3 Walker SR，Nelson EA，Zou L，etal.Reciprocal effects of STAT5 and STAT3 in breast cancer〔J〕.Molec Cancer Res，2009；7(6)：966-76.

4 温玉婷，刘 伟，杨爱军，等.IL-17和STAT3在结直肠癌组织中的表达及临床意义〔J〕.第三军医大学学报，2011；33(17)：1812-5.

5 李彬彬，郑 燕，郏雁飞，等.DEC1和STAT3在胃癌组织中的表达及意义〔J〕.中国现代普通外科进展，2009；12(7)：595-8.

6 De SV，Franzè E，Ronchetti G，etal.Th17-type cytokines，IL-6 and TNF-α synergistically activate STAT3 and NF-kB to promote colorectal cancer cell growth〔J〕.Oncogene，2015；34(27)：3493-503.

7 Wu X，Tao Y，Xiang L，etal.IL-17 promotes tumor angiogenesis through Stat3 pathway mediated upregulation of VEGF in gastric cancer〔J〕.Tumor Biol，2015；37(4)：1-9.

8 Ma S，Cheng Q，Cai Y，etal.IL-17A produced by γδ T cells promotes tumor growth in hepatocellular carcinoma〔J〕.Cancer Res，2014；74(7)：1969-82.

9 Guanglin C，Aping Y，Rasmus G，etal.IL-17A in the tumor microenvironment of the human colorectal adenoma-carcinoma sequence〔J〕.Scand J Gastroenterol，2012；47(11)：1304-12.

10 Benevides L，Cardoso CRB，Tiezzi DG，etal.Enrichment of regulatory T cells in invasive breast tumor correlates with the upregulation of IL-17A expression and invasiveness of the tumor〔J〕.Eur J Immunol，2013；43(6)：1518-28.

11 马志萍，李 锋，张文杰.IL-17在乳腺癌中的表达及其意义〔J〕.石河子大学学报(自然科学版)，2012；30(5)：615-20.

12 Fukada T，Hibi M，Yamanaka Y，etal.Two signals are necessary for cell proliferation induced by a cytokine receptor gp130：involvement of STAT3 in anti-apoptosis〔J〕.Immunity，1996；5(5)：449-60.

13 Bromberg JF，Horvath CM，Besser D，etal.Stat3 activation is required for cellular transformation by v-src〔J〕.Molec Cellular Biol，1998；18(5)：2553-8.

14 Devarajan E，Huang S.STAT3 as a central regulator of tumor metastases〔J〕.Curr Molec Med，2009；9(5)：626-33.

15 Demoulin JB，Van RE，Stevens M，etal.Distinct roles for STAT1，STAT3，and STAT5 in differentiation gene induction and apoptosis inhibition by interleukin-9〔J〕.J Biol Chem，1999；274(36)：25855-61.

16 Tanabe Y，Nishibori T，Su L，etal.Cutting edge：role of STAT1，STAT3，and STAT5 in IFN-alpha beta responses in T lymphocytes〔J〕.J Immunol，2005；174(2)：609-13.

17 Sung JY，Lim SJ，Kim YW，etal.Prognostic significance of pSTAT3 and Survivin expression in diffuse large B-cell lymphoma〔J〕.Basic Appl Pathol，2010；3(1)：7-13.

18 Lamkhioued B，Lajoie-Kadoch S，Maghni K，etal.Critical role for STAT3 in IL-17A-mediated CCL11 expression in human airway smooth muscle cells〔J〕.J Immunol，2009；182(6)：3357-65.

19 Sun C，Kono H，Furuya S，etal.Interleukin-17A plays a pivotal role in chemically induced hepatocellular carcinoma in mice〔J〕.Dig Dis Sci，2016；61(2)：474-88.

20 王 菊，张 楠，马志萍，等.乳腺癌患者原发磷酸化信号转导与转录激活因子3活性和白细胞介素-17表达的临床意义〔J〕.解剖学报，2015；46(6)：791-6.

21 陈 芳.寻常型银屑病皮损中磷酸化信号转导和P-Stat3与IL-17的表达及意义〔J〕.临床医学研究与实践，2016；12(1)：48.

〔2016-04-26修回〕

(编辑 苑云杰)

胡乃军(1983-)，男，硕士，主治医师，主要从事普外科疾病研究。

R735

A

1005-9202(2017)10-2464-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.10.052

1 锦州医科大学附属第一医院妇产科