谭启东，张晓轩，周东辉，秦思源,5，殷铭阳，刘光学，朱兴全，徐前明



宁夏回族自治区奶牛感染贝氏柯克斯体的血清流行病学调查

谭启东1,2,3，张晓轩2,4，周东辉2，秦思源2,4,5，殷铭阳2，刘光学2，朱兴全2，徐前明1

目的 调查宁夏回族自治区奶牛感染贝氏柯克斯体状况。方法 通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检出奶牛血清贝氏柯克斯体抗体，总体阳性率为11.37%(103/906)。结果 吴忠市和青铜峡市奶牛贝氏柯克斯体抗体阳性率分别为12.28%和10.44%；不同年龄组的抗体阳性率为9.86%至13.21%；未生育过的奶牛抗体阳性率最高为11.99%。结果显示地区、年龄和胎次均与贝氏柯克斯体感染无统计学差异(P>0.05)。结论 揭示了宁夏地奶牛贝氏柯克斯体感染普遍存在，对该地区人群健康构成潜在威胁。

贝氏柯克斯体；流行病学；奶牛；ELISA；宁夏回族自治区

Q热，由一种专性革兰氏阴性胞内菌贝氏柯克斯体引起，在世界范围内广泛分布。贝氏柯克斯体可以感染家畜、野生动物、宠物、鸟、人[1]。贝氏柯克斯体感染人可引起人的急性、慢性Q热[2]。急性Q热症状主要包括发热、头痛、咳嗽，严重急性Q热可出现非典型性肺炎、肝炎等并发症[3]。慢性Q热患者长期持续发热，可有心内膜炎、慢性肝炎、骨髓炎等。在畜牧业，贝氏柯克斯体感染可引起牛、羊流产、死胎、厌食和不育[4]。已感染动物通过分娩、泌乳、排泄等方式将体内贝氏柯克斯体排出[2,5-6]，排出的贝氏柯克斯体对外界环境有很强的抵抗力，可在环境中长期存活[7]。贝氏柯克斯体主要通过空气传播，干燥和多风的气候条件有利于其传播和扩散[8]。因此减少动物排泄物对环境污染对于控制人和动物的贝氏柯克斯体感染至关重要。

近些年，一些血清学技术已经被应用于检测贝氏柯克斯体的特异性抗体，包括补体结合试验(CFT),微量凝集试验(MA),间接荧光抗体试验(IFAT),以及酶联免疫吸附试验(ELISA)。由于其高度的敏感性、特异性和易操作性，ELISA已被广泛用于分析人和动物的贝氏柯克斯体感染[9]。

世界范围内很多地区如美洲、欧洲以及包括中国在内的亚洲均已做过关于牛贝氏柯克斯体感染的血清学调查[9-13]，所得结果差别很大。但是目前关于中国宁夏回族自治区奶牛贝氏柯克斯体的感染情况还不清楚。本研究的目的在于调查宁夏地区奶牛贝氏柯克斯体的感染情况，为该地区的贝氏柯克斯体感染的防控提供科学数据。

1 材料与方法

1.1 调查区域 本研究选取宁夏回族自治区吴忠市和青铜峡市作为奶牛贝氏柯克斯体感染情况的调查对象。吴忠市(35°14′～39°23′ N, 104°17′～107°39′ E)坐落于宁夏的中北部地区，温带大陆性半干旱季风气候，年平均气温为9.4 ℃。青铜峡市(37°36′～38°15′ N, 105°21′～106°21′ E)地处宁夏西北部，为县级市，气候与吴忠市相仿，年平均气温为9.2 ℃。奶牛养殖业在这两市畜牧业中占有重要地位。

1.2 血清样品 于2013年分别在宁夏青铜峡市(450份)和吴忠市(456份)共采得906份荷斯坦奶牛血样品，所有样品均未经特殊处理，随机采样以保证每1个样品都具有代表性。血样品经4 000 r/min离心10 min后将血清转移到新的离心管中，于-20 ℃保存待用。记录奶牛的地区、年龄、胎次等重要基本信息。

1.3 血清学检测 血清样品采用酶联免疫吸附试验ELISA检测贝氏柯克斯体抗体，试剂盒为市场可购法国LSI ELISA检测试剂盒，按照说明书的要求操作。每板设阴、阳性血清对照，若有可疑孔则进行复检。在450 nm波长处读取结果。阴阳性的判断结果依据S/P值(%)，S/P值(%)=(样品OD值-阴性OD值)/(阳性OD值-阴性OD值)×100%，S/P值(%)≤40%判为阴性，S/P值(%)>40%判为贝氏柯克斯体抗体阳性。

1.4 数据分析 运用SAS软件中的χ2分析不同变量包括地区、年龄和胎次与贝氏柯克斯体抗体阳性率之间是否存在差异，以P<0.05为具有统计学意义的判断标准。

2 结 果

在此次调查的906份荷斯坦奶牛的血清样品中，共检出103份贝氏柯克斯体抗体阳性样品，阳性率为11.37%(95%CI: 9.30-13.44)，其中吴忠市和青铜峡市的阳性率分别为12.28% (95%CI: 9.27-15.29) 和10.44% (95%CI: 7.62-13.27)。不同畜群的感染率从0%到40%不等(表1)。

表2显示所有年龄组均检出贝氏柯克斯体抗体阳性样品，阳性率为9.86% (95%CI: 6.46-13.27)至13.21% (95%CI: 4.09-22.32)，其中大于37月龄奶牛阳性率最高。奶牛胎次分为0胎至大于等于2胎，阳性率从8.82% (95%CI: 4.56-13.09)至11.99%(95%CI: 9.29-14.68)不等，其中0胎奶牛感染率最高。然而，地区、年龄和胎次因素均与贝氏柯克斯体感染差异无统计学意义(P>0.05)。

3 讨 论

本文首次报道宁夏地区奶牛贝氏柯克斯体感染血清流行病学调查。宁夏作为中国5大牧区之一，畜牧业是当地经济的重要组成部分。由于贝氏柯克斯体感染可引起奶牛流产、死胎等，这将对当地经济产生巨大损失。此外，贝氏柯克斯体感染可通过奶牛的泌乳传播，这将对人类健康产生潜在危害。而且宁夏地处中国西北部，干旱多风，对于贝氏柯克斯体的传播提供了有利条件。因此，对奶牛做贝氏柯克斯体感染的流行病学调查十分必要。

表1 不同畜群奶牛血清贝氏柯克斯体抗体阳性率

Tab.e.1 Seroprevalence ofC.burnetiiinfection in dairy cattle in different herds

畜群Herd地区Region检测数(份)No．tested阳性数(份)No．positive阳性率%Prevalence(%)95%CI1吴忠市66710．613．18-18．042吴忠市20210．000-23．153吴忠市2015．000-14．554吴忠市20630．009．92-50．085吴忠市20210．000-23．156吴忠市20210．000-23．157吴忠市20210．000-23．158吴忠市20000 9吴忠市20525．006．02-43．9810吴忠市2015．000-14．5511吴忠市2015．000-14．5512吴忠市20315．000-30．6513吴忠市20840．0018．53-61．4714吴忠市2015．000-14．5515吴忠市2015．000-14．5516吴忠市20000 17吴忠市2015．000-14．5518吴忠市20525．006．02-43．9819吴忠市50816．005．84-26．1620青铜峡市2202511．367．17-15．5621青铜峡市153138．504．08-12．9222青铜峡市77911．694．51-18．87总计90610311．379．30-13．44

表2 不同地区、年龄和胎次的奶牛血清贝氏柯克斯体抗体阳性率

Tab.e.2 Seroprevalence ofC.burnetiiinfection in dairy cattle in different regions,ages and numbers of pregnancies

变量Factor分类Category检测数(份)No．tested阳性数(份)No．positive感染率%(95%CI)Prevalence(%)(95%CI)P值P⁃value地区Region青铜峡市4504710．44(7．62-13．27)0．38吴忠市4565612．28(9．27-15．29)年龄Age0-12月66710．61(3．18-18．04)0．7613-24月4936012．17(9．28-15．06)25-36月294299．86(6．46-13．27)≥37月53713．21(4．09-22．32)胎次No．pregnancies05596711．99(9．29-14．68)0．511170158．82(4．56-13．09)≥21772111．86(7．10-16．63)总计Total90610311．37(9．30-13．44)

到目前为止，世界范围内很多国家都已经报道了关于奶牛贝氏柯克斯体感染的血清学调查。在本研究中，共有103份血清样品检出贝氏柯克斯体抗体，总体感染率为11.37%。这一结果低于韩国的25.6%[14]和英国的21%[15]，略高于北爱尔兰的10.4%[16]。引起这些差异的原因可能归结于奶牛的饲养条件、免疫水平、气候条件、检测方法敏感性和动物福利不同等[17]。和国内的一些省市报道相比，调查结果略高于黑龙江省报道的10.1%[13]，但是低于新疆报道的12.9%[9]。之前提到过干旱多风的气候条件对于贝氏柯克斯体的传播十分有利，新疆地处我国西北部，而黑龙江位于我国东北，西北相较于东北来说更加干旱和多风，因此可能更利于贝氏柯克斯体的传播，使感染率更高。

本调查中，不同畜群的贝氏柯克斯体抗体阳性率从0%到40%不等，这可能归结于不同牧场的管理模式和饲养条件存在差异。吴忠和青铜峡相毗邻，气候条件相似，因此抗体阳性率也相差不大。地区之间不存在统计学差异(P=0.38)。

4个年龄分组中，大于37月龄的奶牛贝氏柯克斯体抗体阳性率最高为13.21%。这可能由于年龄越大，获得感染的机会越多；而且犊牛可能自出生携带母源抗体，因此有着更强的抵抗力。然而，贝氏柯克斯体的感染与年龄之间并无统计学意义(P=0.76)。

胎次方面，检测的906头奶牛中，有347头奶牛至少生育过一次。未生育过的奶牛贝氏柯克斯体抗体阳性率最高为11.99%，其次为≥2胎的奶牛，生育过1胎的奶牛阳性率最低，同样，贝氏柯克斯体感染与胎次之间也并无统计学意义(P=0.51)，表明胎次也并不是奶牛感染贝氏柯克斯体的风险因素。先前有报道称怀孕反刍动物对贝氏柯克斯体感染高度敏感[18]，这与本文的结果并不一致，因此需要进一步的研究。

总之，本次调查结果表明宁夏地区奶牛贝氏柯克斯体感染普遍存在，这对于当地人群健康构成潜在威胁。应当采取有效的防控手段和管理方法以阻止和控制奶牛的贝氏柯克斯体感染。

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Xu Qian-ming, Email: vetqmxu@163.com.

Seroprevalence ofCoxiellaburnetiiinfection in dairy cattle in Ningxia Hui Autonomous Region,Northwest China

TAN Qi-dong1,2,3, ZHANG Xiao-xuan2,4, ZHOU Dong-hui2, QIN Si-yuan2,4,5, YIN Ming-yang2, LIU Guang-xue2, ZHU Xing-quan2, XU Qian-ming1

(1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,AnhuiAgriculturalUniversity,Hefei230036,China; 2.StateKeyLaboratoryofVeterinaryEtiologicalBiology,LanzhouVeterinaryResearchInstitute,CAAS,Lanzhou730046,China; 3.AnimalQuarantineStationofBeijingEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau,Beijing101312,China; 4.CollegeofAnimalScienceandTechnology,JilinAgriculturalUniversity,Changchun130118,China; 5.GeneralStationforSurveillanceofWildlifeDiseases&WildlifeBorneDiseases,StateForestryAdministration(SFA),Shenyang110034,China)

The aim of this present study was to examine the seroprevalence ofCoxiellaburnetiiinfection in randomly selected dairy cattle in Ningxia Hui Autonomous Region (NXHAR)，Northwest China. The overallC.burnetiiseroprevalence was 11.37% (103/906) by ELISA. The seroprevalence ofC.burnetiiwas 12.28% and 10.44% in dairy cattle，in Wuzhong and Qingtongxia respectively. The seropositive rate ranged from 9.86% to 13.21% in different age groups. Dairy cattle with no pregnancy had the highest seroprevalence (11.99%). Geographical location, age and number of pregnancies had no apparent association withC.burnetiiseropositivity (P>0.05). This survey indicates thatC.burnetiiinfection is highly prevalent in dairy cattle in NXHAR, which may pose a potential threat to human health.

Coxiellaburnetii；seroprevalence；dairy cattle；ELISA；NXHAR

10.3969/j.issn.1002-2694.2017.04.011

国家科技支撑计划项目(No.2012BAD12B07)和甘肃省创新研究群体计划项目(No.1210RJIA006)联合资助

徐前明，Email: vetqmxu@163.com

1.安徽农业大学动物科技学院，合肥 230036； 2.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室，兰州 730046； 3.北京出入境检验检疫局动物隔离场，北京 101312； 4.吉林农业大学动物科技学院，长春 130118； 5.国家林业局野生动物疫源疫病监测总站，沈阳 110034

Supported by National Key Project of Scientific and Technical Supporting Program (No.2012BAD12B07) and the Science Fund for Creative Research Groups of Gansu Province (No.1210 RJIA006).

R378

A

1002-2694(2017)04-0349-04

2016-03-24 编辑：张智芳