陈红英，丁 洁，游 晶

·论著·

慢性乙型肝炎病毒感染者血清流行病学研究

陈红英，丁 洁，游 晶*

背景 随着慢性乙型肝炎(CHB)临床治愈的提出及研究，乙型肝炎病毒(HBV)血清免疫标志物和HBV DNA载量检测可以为其治疗提供依据。目的 探讨慢性HBV感染者血清学模式及其与HBV DNA载量之间的关系。方法 选取2015年3—12月就诊于昆明医科大学第一附属医院感染科门诊、住院的HBV DNA载量阳性的慢性HBV感染者2 425例为研究对象，采用ARCHITECT i2000SR全自动免疫发光分析仪检测HBV血清免疫标志物，采用PGQ-PCR扩增仪检测HBV DNA载量。分别以1、2、3、4、5代表乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(HBsAb)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)、乙型肝炎e抗体(HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)，分析其血清学模式。结果 2 425例慢性HBV感染者共有7种血清学模式，所占比例>1.00%的血清学模式有5种：“1、3、5”“1、4、5”“1、3、4、5”“1、5”“1、2、3、5”模式分别占55.05%、37.69%、3.26%、1.86%、1.53%；“1、2、4、5” 和“2、4、5” 模式分别占0.53%和0.08%。5种主要血清学模式慢性HBV感染者年龄、HBV DNA载量比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；性别比较，差异无统计学意义(P>0.05)。5种主要血清学模式慢性HBV感染者年龄构成比较，差异有统计学意义(χ2=266.625，P<0.001)。“1、3、5”“1、3、4、5”“1、5”“1、2、3、5”模式主要发生于21～30岁及31～40岁，“1、4、5”模式主要发生于31～40岁及41～50岁。“1、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA载量与HBsAg、HBeAg呈正相关，与HBcAb呈负相关(P<0.05)；HBsAg与HBeAg呈正相关(P<0.05)。“1、4、5”“1、3、4、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA载量与HBeAg、HBcAb呈正相关(P<0.05)。“1、2、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA载量与HBsAg、HBeAg、HBcAb呈正相关，HBsAg与HBeAg呈正相关(P<0.05)。结论 在HBV DNA载量阳性的慢性HBV感染者中，存在7种血清学模式，以“1、3、5”和“1、4、5”模式为主，5种主要血清学模式患者年龄和HBV DNA载量均存在差异。

乙型肝炎病毒；病毒载量；血清流行病学研究

陈红英，丁洁，游晶.慢性乙型肝炎病毒感染者血清流行病学研究[J].中国全科医学，2017，20(8)：939-942，947.[www.chinagp.net]

CHEN H Y，DING J，YOU J.Seroepidemiologic study of chronic HBV-infected patients[J].Chinese General Practice，2017，20(8)：939-942，947.

乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染呈世界性流行，据世界卫生组织报道，全球约20亿人感染HBV，其中2.4亿人为慢性HBV感染者[1]。HBV血清免疫标志物主要包括乙型肝炎表面抗原(hepatitis B surface antigen，HBsAg)、乙型肝炎表面抗体(hepatitis B surface antibody，HBsAb)、乙型肝炎e抗原(hepatitis B e antigen，HBeAg)、乙型肝炎e抗体(hepatitis B e antibody，HBeAb)、乙型肝炎核心抗体(hepatitis B core antibody，HBcAb)，与HBV DNA载量联合，是临床上诊断与分析HBV感染的重要指标。化学发光法在HBV血清免疫标志物检测中具有灵敏度高、线性宽、影响因素少、结果准确等优点[2-3]，近年来应用越来越多。本研究采用ARCHITECT i2000SR全自动免疫发光分析仪检测HBV血清免疫标志物，同时检测HBV DNA载量，分析慢性HBV感染者的血清流行病学特点。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年3—12月就诊于昆明医科大学第一附属医院感染科门诊、住院行HBV血清免疫标志物检测，同时HBV DNA载量阳性的慢性HBV感染者为研究对象。纳入和剔除标准：(1)HBV DNA载量可检测到，同时为阳性；(2)同姓名同年龄者采纳第一次检测结果；(3)剔除1岁以下儿童(考虑到母亲HBV血清免疫标志物阳性可能对婴幼儿检测结果产生影响)；(4)剔除检测结果在灰区的标本[4]。符合纳入和剔除标准者共2 425例，其中男1 596例，女 829例；年龄1～91岁，平均年龄(34.9±12.1)岁。

1.2 仪器与试剂 HBV血清免疫标志物检测采用ARCHITECT i2000SR全自动免疫发光分析仪(美国雅培公司)，并使用配套化学发光法试剂，试验均使用配套标准品及质控品进行定标、质量控制。HBV DNA载量采用PGQ-PCR扩增仪(德国凯杰公司)，使用凯杰生物工程(深圳)有限公司的HBV核酸定量检测试剂盒，并在有效期内使用，试验均使用配套标准品及质控品进行定标、质量控制。

本研究背景：

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)感染肝脏引起的对生命有潜在危害的疾病，是重要的全球性问题。因此对慢性乙型肝炎治愈方法的研究是一项重要的课题。目前随着科技的进步，提出了对慢性乙型肝炎患者“临床治愈”的概念，即停止治疗后持续的病毒学应答、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)消失、并伴有丙氨酸氨基转移酶(ALT)恢复至参考范围和肝组织学的改善。因此在治疗过程中，需要定时监测HBV DNA载量、HBV血清免疫标志物和ALT，综合性地观察疗效，选择合适的治疗方案，尽可能地追求慢性乙型肝炎的临床治愈。不同的血清学模式可以反映HBV在机体活动的状况，结合HBV DNA载量和ALT可以为治疗方案的选择提供依据。在临床工作中不常见的血清学模式常被忽视，本研究基于HBV DNA载量阳性，归纳总结了不同的血清学模式及其相关性，以期为临床研究及治疗提供参考。

1.3 方法

1.3.1 样本采集 采用威高红色促凝真空试管采集患者晨起肘静脉血2～3 ml，并及时检测。

1.3.2 阳性临界值 HBV血清免疫标志物HBsAg和HBsAb分别以U/ml、mU/ml为单位，HBsAg≥0.05 U/ml为阳性，HBsAb≥10 mU/ml为阳性；HBeAg以PEIU/ml为单位，HBeAg≥0.18 PEIU/ml为阳性；HBeAb和HBcAb以S/CO为单位，HBeAb以≤1 S/CO为阳性，HBcAb以≥1 S/CO为阳性。HBV DNA载量以U/ml为单位，以≥100 U/ml为阳性。

1.3.3 血清学模式 对HBV血清免疫标志物按习惯方式进行表述，分别以1、2、3、4、5代表HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb，并以阳性项目出现的序号作为该模式代表。如某份标本的检测结果为HBsAg阳性、HBsAb阴性、HBeAg阳性、HBeAb阴性、HBcAb阳性，则该模式表述代码为“1、3、5”模式[5]。

2 结果

2.1 血清学模式 2 425例慢性HBV感染者共有7种血清学模式，以“1、3、5” 模式和“1、4、5”模式为主，分别占55.05%和37.69%。所占比例>1.00%血清学模式有5种；“1、2、4、5” 模式和“2、4、5” 模式分别占0.53%和0.08%(见表1)。5种主要血清学模式慢性HBV感染者年龄、HBV DNA载量比较，差异均有统计学意义(P<0.05)；性别比较，差异无统计学意义(P>0.05，见表2)。

2.2 5种主要血清学模式慢性HBV感染者年龄构成比较 5种主要血清学模式慢性HBV感染者年龄构成比较，差异有统计学意义(χ2=266.625，P<0.001)。“1、3、5”“1、3、4、5”“1、5”“1、2、3、5”模式主要发生于21～30岁及31～40岁，“1、4、5” 模式主要发生于31～40岁及41～50岁(见表3)。

2.3 相关性分析 “1、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA载量与HBsAg、HBeAg呈正相关，与HBcAb呈负相关(P<0.05)；HBsAg与HBeAg呈正相关(P<0.05)。“1、4、5”“1、3、4、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA载量与HBeAg、HBcAb呈正相关(P<0.05)。“1、2、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA载量与HBsAg、HBeAg、HBcAb呈正相关，HBsAg与HBeAg呈正相关(P<0.05，见表4)。

表1 慢性HBV感染者血清学模式(n=2 425)

注：HBsAg=乙型肝炎表面抗原，HBsAb=乙型肝炎表面抗体，HBeAg=乙型肝炎e抗原，HBeAb=乙型肝炎e抗体，HBcAb=乙型肝炎核心抗体

表2 5种主要血清学模式慢性HBV感染者性别、年龄、HBV DNA载量比较

注：HBV=乙型肝炎病毒；a为χ2值，b为F值，余检验统计量值为H值

表4 5种主要血清学模式慢性HBV感染者HBV DNA载量和HBV血清免疫标志物相关性分析(r值)

注：a为P<0.05

表3 5种主要血清学模式慢性HBV感染者年龄构成比较〔n(%)〕

3 讨论

有关慢性HBV感染者血清学模式的各种文献报道不一，本研究共检出7种血清学模式，与高卫亚等[5]报道的HBsAg阳性13种血清学模式不完全一致，但是主要以“1、3、5” “1、4、5”模式为主是一致的。5种主要血清学模式慢性HBV感染者在性别上没有差异，与王景鸿等[6]报道的HBsAg阳性率存在性别差异不同，但是年龄具有差异，与HBsAg阳性率存在年龄差别[5-6]是一致的。表明HBV DNA载量与HBsAg在临床诊断中的作用是有差异的。

临床上将“1、3、5”模式(即传统的“大三阳”)转变为“1、4、5”模式(即传统的“小三阳”)称为HBeAg/HBeAb血清学转换。文献报道，自发性HBeAb血清学转换的平均年龄为(31.1±7.0)岁，在26岁前发生的概率为26.5%，40岁前累计为90%[7]。同时有学者报道，在40岁前实现HBeAg血清学转换的患者肝硬化的发生率显著降低，否则将增加肝硬化、肝细胞癌(HCC)发生的风险[8]。本研究发现，“1、3、5”模式慢性HBV感染者41～50岁、51～60岁、>60岁分别占12.44%、4.50%、1.72%。对于此类患者应尽早治疗，并增加肝硬化和HCC(尤其有肝硬化和HCC家族史)实验室及影像学相关指标监测，必要时行肝组织活检。

本研究发现，慢性HBV感染者中“1、3、5”模式所占比例最大，这可能与云南地区居民对乙型肝炎缺乏较深层次的认识有关[9]。“1、3、5”模式多为急性乙型肝炎，患者体内HBV复制活跃，传染性较强，应积极治疗，并防止传染给他人[10]。本研究还发现，“1、3、5”模式慢性HBV感染者HBV DNA载量与HBsAg、HBeAg呈正相关，与HBcAb呈负相关；HBsAg与HBeAg呈正相关，临床中应进行联合检查及随访。“1、4、5”模式一般为急性乙型肝炎趋向恢复或慢性乙型肝炎携带，随着血清中HBeAb的出现，常伴随着HBeAg血清学转阴，HBV的复制减低甚至转阴，传染性下降。本研究中“1、4、5”模式慢性HBV感染者占37.69%，且各项指标的相关性不佳，可能与HBV基因发生变异有关[11]，因此对于此类患者应定期进行监测。另有文献报道，“1、4、5”模式慢性HBV感染者是肝癌的高危人群，更要警惕HCC的发生，应重视该人群的定期体检和复查[12]。本研究还检测出了2例“2、4、5”模式慢性HBV感染者，1例HBV DNA载量为3.70×103U/ml；另1例HBV DNA载量为4.03×102U/ml，更值得注意的是，这例患者的HBsAb>1 000 mU/ml，因此在临床中，发现3个抗体阳性的患者应建议完善高精度的HBV DNA载量检测。

2015年《慢性乙型肝炎防治指南》指出，对于部分适合的患者应尽可能追求临床治愈，即停止治疗后持续的病毒学应答、HBsAg消失、并伴有ALT恢复至参考范围和肝脏组织学改善[13]。因此，对于慢性乙型肝炎患者应定期进行血清免疫标志物、高精度的HBV DNA载量、肝脏生化和肝纤维化扫描检查，及时评估患者情况，选择正确的治疗时机及正确的治疗方案，以达到临床治愈。另外对于少发的血清学模式，应进行HBV DNA载量检测，排除隐匿性慢性HBV感染。本文存在不足之处是未结合ALT和肝组织学进行分析，这也将是本课题下一步进行的研究。

作者贡献：陈红英、游晶进行文章的构思与设计，研究的实施与可行性分析，撰写论文；陈红英、丁洁进行数据收集；丁洁进行数据整理，统计学处理；陈红英进行结果的分析与解释；游晶负责文章的质量控制及审校，对文章整体负责，监督管理。

本文无利益冲突。

[1]OTT J J，STEVENS G A，GROEGER J，et al.Global epidemiology of hepatitis B virus infection:new estimates of age-specific HBsAg seroprevalence and endemicity [J].Vaccine，2012，30(12):2212-2219.

[2]宋文慧.乙型肝炎五项标志物定量检测的临床分析[J].中华医院感染学杂志，2012，22(6):1216-1217. SONG W H.Clinical analysis of quantitative detection for hepatitis B [J].Chinese Journal of Nosocomiology，2012，22(6):1216-1217.

[3]张继东.化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附法检测乙肝病毒标志物的比较 [J].中国全科医学，2008，11(14):1299. ZHANG J D.Comparison of chemiluminescence immunoassay and enzyme-linked immunosorbent assay for detection of hepatitis B virus markers [J].Chinese General Practice，2008，11(14):1299.

[4]Clinical and Laboratory Standards Institute.User protocolfor evaluation of qualitative test performance;approved guideline[S].2nd ed.CLSI，2008.

[5]高卫亚，袁红萍，杜忠祥，等.24 737例乙型肝炎HBsAg阳性者的病毒血清学模式回顾性分析[J].中国卫生检验杂志，2015，25(19):3371-3374. GAO W Y，YUAN H P，DU Z X，et al.Retrospectively analysis of serological patterns of hepatitis B virus in 24 737 patients with positive HBsAg [J].Chinese Journal of Health Laboratory Technology，2015，25(19):3371-3374.

[6]王景鸿，刘义庆，张培莉，等.山东省立医院2011—2013年门诊及住院患者乙型肝炎病毒感染状况分析 [J].中华全科医学，2015，13(1):6-8，96. WANG J H，LIU Y Q，ZHANG P L，et al.Analysis of hepatitis B virus infection in patients of Shandong provincial hospital from 2011 to 2013 [J].Chinese Journal of General Practice，2015，13(1):6-8，96.

[7]CHU C M，HUNG S J，LIN J，et al.Natural history of hepatitis B antigen to antibody seroconversion in patients with normal serum aminotransferase levels [J].Am J Med，2004，116(12):829-834.

[8]HSU Y S，CHIEN R N，YEH C T，et al.Long-term outcome after spontaneous HBeAg seroconversion inpatients with chronic hepatitis B [J].Hepatology，2002，35(6):1522-1527.

[9]刘桂兰，胥莹，潘慧，等.68例慢性乙型肝炎患者对疾病认知及心理和行为问卷调查 [J].昆明医科大学学报，2015，36(6):144-147. LIU G L，XU Y，PAN H，et al.Questionnaire investigation on disease cognition，psychology and behavior in 68 patients with chronic hepatitis B [J].Journal of Kunming Medical University，2015，36(6):144-147.

[10]LAU G K，PIRATVISUTH T，LUO K X，et al.Peginterferon alfa-2a，lamivudine，and the combination for HBeAg-positive chronic hepatitis B [J].N Engl J Med，2005，352(26):2682-2695.

[11]农荣欣.对乙肝“小三阳”前S1灰区结果分析[J].实验与检验医学，2013，31(6):627-629. NONG R X.The results of analysis of the "small Sanyang" hepatitis B S1 gray zone [J].Experimental and Laboratory Medicine，2013，31(6):627-629.

[12]张正国，贺庆伟，张晋军.原发性肝癌患者HBV DNA水平和基因分型及HBV-M检测的相关性分析[J].中国卫生检验杂志，2013，23(11):2501-2503. ZHANG Z G，HE Q W，ZHANG J J.Analysis of relationshop between hepatitis B virus genotyping and HBV DNA level and serologic markers in primary hepatic cancer [J].Chinese Journal of Health Laboratory Technology，2013，23(11):2501-2503.

[13]孟庆华，侯维.2015年版《慢性乙型肝炎防治指南》——慢性乙型肝炎抗病毒治疗指南解读[J].中国全科医学，2016，19(14):1613-1615.DOI:10.3969/j.issn.1007-9572.2016.14.001. MENG Q H，HOU W.Interpretation of 2015 guideline of prevention and treatment for chronic hepatitis B[J].Chinese General Practice，2016，19(14):1613-1615.DOI:10.3969/j.issn.1007-9572.2016.14.001.

(本文编辑：陈素芳)

Seroepidemiologic Study of Chronic HBV-infected Patients

CHENHong-ying，DINGJie，YOUJing*

DepartmentofInfectiousDiseases，FirstAffiliatedHospitalofKunmingMedicalUniversity，Kunming650032，China

*Correspondingauthor：YOUJing，Professor；E-mail:jingyoukm@126.com

Background With the development and research of clinical cure of chronic hepatitis B (CHB)，testing of serum immune markers of HBV and HBV DNA load can provide reference for the clinical treatment study of CHB.Objective To analyze the serological pattern in chronic HBV-infected patients and its correlation with HBV DNA load.Methods The subjects enrolled in this study were the chronic HBV-infected outpatients and inpatients(n=2 425) who received treatment in Department of Infectious Diseases，First Affiliated Hospital of Kunming Medical University from March to December 2015.Serum immune markers and HBV DNA load were measured in the subjects by ARCHITECT i2000SR Immunoassay Analyzer with matched chemiluminescence reagent，and PGQ-PCR Amplification with HBV nucleic acid quantitative detection kit，respectively.HBsAg，HBsAb，HBeAg，HBeAb and HBcAb was labeled as 1，2，3，4，and 5，respectively.And their serological patterns were analyzed.Results Of the 7 serological patterns found in the 2 425 patients with chronic HBV infection，there were 5 patterns which occupied a proportion more than 1.00%，respectively;the patterns of "1，3，5""1，4，5""1，3，4，5""1，5" and "1，2，3，5" accounting for 55.05%，37.69%，3.26%，1.86% and 1.53%，respectively.The rare for other patterns of "1，2，4，5" and "2，4，5" was 0.53% and 0.08%，respectively.The age and HBV DNA load were significant differences among the 5 main patterns (P<0.05)，but the gender was no significant differences among them (P>0.05).Notable difference in age distribution was observed among the 5 main patterns(χ2=266.625，P<0.001).Patterns of "1，3，5""1，3，4，5""1，5" and "1，2，3，5" mainly occurred in age groups of 21-30 and 31-40，while the pattern of "1，3，5" chiefly in age groups of 31-40 and 41-50.In chronic HBV-infected patients with pattern of "1，3，5"，the HBV DNA load was positively correlated with HBsAg and HBeAg(P<0.05)，while negatively correlated with HBcAb(P<0.05);HBsAg was positively related to HBeAg(P<0.05).Among chronic HBV-infected patients with pattern of "1，4，5" "1，3，4，5"，the HBV DNA load was positively associated with HBeAg and HBcAb (P<0.05).HBV DNA load was positively associated with HBsAg，HBeAg and HBcAb，HBsAg was positively associated with HBeAg in chronic HBV-infected patients with pattern of "1, 2, 3, 5"(P<0.05).Conclusion There were 7 kinds of patterns in chronic HBV-infected patients with positive HBV DNA，predominated by the patterns of "1，3，5" and "1，4，5".Significant differences by age and HBV DNA load existed among the 5 main patterns.

Hepatitis B virus；Viral load；Seroepidemiologic studies

云南省科技计划资助项目(2011WS0053，2011FZ121，2012WS0028)

R 512.62

A

10.3969/j.issn.1007-9572.2017.08.010

2016-08-18；

2017-01-05)

650032云南省昆明市，昆明医科大学第一附属医院感染科

*通信作者：游晶，教授；E-mail:jingyoukm@126.com