梁 军，杨依依

(尉氏县人民医院眼科，河南 开封 452170)

视网膜母细胞瘤组织中基质金属蛋白酶-9、血管内皮生长因子的表达水平及其临床意义

梁 军，杨依依

(尉氏县人民医院眼科，河南 开封 452170)

目的 探讨视网膜母细胞瘤组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)表达水平及其临床意义。方法 采用免疫组化S-P法检测100例视网膜母细胞瘤和30例正常视网膜组织中MMP-9、VEGF的表达水平，并分析两者与视网膜母细胞瘤临床病理特征的关系。结果 视网膜母细胞瘤组织中MMP-9的阳性率为65.0%(65/100)，高于正常视网膜组织的6.7%(2/30)(P<0.05)；视网膜母细胞瘤组织中VEGF的阳性率为72.0%(72/100)，高于正常视网膜组织的10.0%(3/30)(P<0.05)。视网膜母细胞瘤组织中MMP-9、VEGF的表达与肿瘤分化程度、临床分期有关(P<0.05)。视网膜母细胞瘤组织中MMP-9、VEGF的表达呈正相关关系(r=0.570，P<0.05)。结论 视网膜母细胞瘤组织中存在高表达的MMP-9、VEGF，两者可能协同参与视网膜母细胞瘤的浸润转移。

视网膜母细胞瘤；基质金属蛋白酶-9；血管内皮生长因子

视网膜母细胞瘤的主要致病原因是Rb1基因的缺失，该病的主要危害是导致患儿的视力下降，为进一步探讨视网膜母细胞瘤的发病机制，本研究采用免疫组化S-P法检测视网膜母细胞瘤组织中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达，并分析两者之间的相关性，以期对视网膜母细胞瘤的发病机制进一步阐明。

1 资料与方法

1.1 临床资料 入组河南省眼科研究所和尉氏县人民医院2011年6月至2016年1月收治的经病理学确诊的100例视网膜母细胞瘤患者，男66例，女34例；年龄4个月～11岁，中位年龄4.2岁；组织分化程度：分化型55例，未分化型45例；临床分期：眼内期39例，青光眼期36例，眼外扩展期25例。并选取同期收治的因外伤摘除眼球的正常视网膜患者30例作为对照，其中男21例，女9例，年龄6个月～10岁，中位年龄3.9岁。2组患者的性别、年龄等基线资料具有可比性(P>0.05)。

1.2 试剂 MMP-9、VEGF鼠抗人单克隆抗体等均购自北京中山金桥生物技术有限公司。

1.3 MMP-9、VEGF表达的检测 对于收集到的100例视网膜母细胞瘤和30例正常视网膜组织标本，均采用免疫组化S-P法检测其MMP-9、VEGF的表达，以PBS代替一抗作为阴性对照，以已知MMP-9、VEGF阳性切片作为阳性对照。

1.4 结果判定 MMP-9阳性信号主要定位于细胞质或细胞膜，VEGF阳性信号主要定位于细胞质，阳性信号均为棕黄色颗粒以选取至少5个高倍镜(×400)视野，计数阳性细胞数,并观察染色强度，进行综合评估，判断阳性率[1]。

1.5 统计学处理 采用SPSS 17.0进行统计学处理，MMP-9、VEGF的阳性率比较采用χ2检验，MMP-9与VEGF的相关性分析采用Spearmen相关性分析法，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 视网膜母细胞瘤组织中MMP-9、VEGF的表达 视网膜母细胞瘤组织中MMP-9的阳性率为65.0%(65/100)，高于正常视网膜组织的6.7%(2/30)(P<0.05)；视网膜母细胞瘤组织中VEGF的阳性率为72.0%(72/100)，高于正常视网膜组织的10.0%(3/30)(P<0.05)。

2.2 视网膜母细胞瘤组织中MMP-9、VEGF的表达与其临床病理特征的关系 视网膜母细胞瘤组织中MMP-9、VEGF的表达与肿瘤分化程度、临床分期有关(P<0.05)。见表1。

2.3 视网膜母细胞瘤组织中MMP-9与VEGF的关系 视网膜母细胞瘤组织中MMP-9、VEGF的表达呈正相关关系(r=0.570，P<0.05)。见表2。

表1 视网膜母细胞瘤组织中MMP-9、VEGF的表达与其临床病理特征的关系

表2 视网膜母细胞瘤组织中MMP-9与VEGF的关系

注：r=0.570，P<0.05

3 讨论

视网膜母细胞瘤是婴幼儿高发的眼部原发性恶性肿瘤，可导致患儿的视力下降，严唐者可危及患儿生命[2-3]。视网膜母细胞瘤的发生发展与大多数实体瘤一样，离不开体内癌基因与抑癌基因平衡的打破，而肿瘤发生后如果继续进展则需要肿瘤细胞穿透基底膜而向外浸润或通过血管、淋巴管向远处转移；肿瘤的生长也需要新生血管形成来为其提供一定的营养物质[2-4]。MMPs是一类能够降解细胞外基质，从而破坏基底膜的酶类，这对肿瘤的浸润转移十分重要。研究证实，MMP-9在大多数实体瘤中存在高表达[5]。VEGF则是目前已知功能最强的促血管生成因子，是肿瘤血管新生的主要促进因子，在肿瘤血管新生过程中发挥了十分重要的作用，是很多实体瘤发生、发展的关键因子[6]。本研究结果显示，视网膜母细胞瘤组织中MMP-9的阳性率为65.0%(65/100)，高于正常视网膜组织的6.7%(2/30)(P<0.05)；视网膜母细胞瘤组织中VEGF的阳性率为72.0%(72/100)，高于正常视网膜组织的10.0%(3/30)(P<0.05)。视网膜母细胞瘤组织中MMP-9、VEGF的表达与肿瘤分化程度、临床分期有关(P<0.05)。视网膜母细胞瘤组织

中MMP-9、VEGF的表达呈正相关关系(r=0.570，P<0.05)。这与有关文献[1]报道结果相近。总之，视网膜母细胞瘤组织存在MMP-9、VEGF的异常表达，这与视网膜母细胞瘤的浸润、转移等有关。

[1]刘月君.基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1 和血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤组织中的表达[J].新乡医学院学报,2014,31(12):1015-1016.

[2]秦静，段大鹏，车选义,等.视网膜母细胞瘤中SHH与PTCH的表达及其意义[J].中华实用诊断与治疗杂志,2015,29(6):559-561.

[3]程育宏,申家泉,唐侠.基质金属蛋白酶-14 和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在视网膜母细胞瘤中的表达及意义[J].山东大学学报(医学版),2008,46(4):411-414,419.

[4]杨依依.视网膜母细胞瘤组织中Survivin、P53的表达及其意义[J].肿瘤基础与临床,2016,29(6):473-475.

[5]吴子旭,王炳彦,姚宏.基质金属蛋白酶-9和Ki-67在视网膜母细胞瘤中的表达和意义[J].山西医药杂志,2011,40(12):1195-1196.

[6]袁思奇,宋华.基质金属蛋白酶-1、血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤中的表达及意义[J].眼科学报,2010,25(1):48-51.

Expressions of Matrix Metalloproteinase-9 and Vascular Endothelial Growth Factor in the Retinoblastoma

LIANG Jun，YANG Yiyi

(DepartmentofOphthalmology,thePeople’sHospitalofWeishiCounty,Kaifeng452170,China)

Objective To investigate the expressions and clinical significance of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the retinoblastoma.Methods Immunohistochemical S-P method was used to detect the expressions of MMP-9 and VEGF in the 100 patients with retinoblastoma and the 30 patients with normal retina tissues,their relationship with clinicopathological parameters were analyzed.Results The positive rate of MMP-9 [65.0%(65/100)] in the retinoblastoma was higher than that [6.7%(2/30)] in the normal retina tissues (P<0.05).The positive rate of VEGF [72.0%(72/100)] in the retinoblastoma was higher than that [10.0%(3/30)] in the normal retina tissues (P<0.05).The expressions of MMP-9 and VEGF in the retinoblastoma were related with cell differentiation degree and clinical stage (P<0.05).In the retinoblastoma,the expression of MMP-9 was positively related with VEGF (r=0.570,P<0.05).Conclusion High expressions of MMP-9 and VEGF may be related to the infiltration and metastasis of retinoblastoma.

retinoblastoma; matrix metalloproteinase-9; vascular endothelial growth factor

梁军(1972-),女,主治医师,主要从事眼科疾病相关临床工作。

10.3969/j.issn.1673-5412.2017.01.007

R739.7；R730.23

A

1673-5412(2017)01-0027-03

2016-08-13)