方萍 颜春荣

（江苏省食品药品监督检验研究院，江苏南京210008）

·食品分析·

QuEChERS结合气相色谱-三重四级杆串联质谱法测定动植物混合型食品中多种农药残留*

方萍**颜春荣

（江苏省食品药品监督检验研究院，江苏南京210008）

现代生活节奏的加快，极大地促进了方便食品加工业的发展，动植物混合型食品越来越受人们的欢迎。随着人们对食品安全意识的增强，水饺、方便菜肴等食品中的农药残留也越来越多地受到重视。目前农药残留检测研究大多集中在单一基质中，针对动植物混合型食品中农药残留检测的研究报道鲜见。由于动植物混合性食品中既含有动物性脂肪和蛋白，又含有调味料、色素、香精香料等物质，基质非常复杂，给检测工作带来挑战。

自2003年美国化学家提出QuEChERS法之后，该方法因其高效、简便、快速、价格低廉等优点，被很快应用于食品中农药残留的分析，在缩短分析时间方面优势显著。三重串联四极杆气质联用仪（GC-MS/MS），是在GC-MS的基础上增加了二级子离子的质谱信息，增强了结构解析和定性能力。本研究选取动植物混合型食品中7种常见农药残留为对象，建立其气相色谱-串联质谱农药残留检测方法。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

7200三重串联四极杆气质联用仪，美国Agilent公司；T18型均质器，德国IKA公司；旋转蒸发器，德国IKA公司；低速离心机，热电公司。

乙腈、正己烷、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷，均为色谱纯，购自Tedia公司；无水硫酸钠，分析纯，上海化学试剂厂，650℃灼烧4 h后，置于干燥器中备用；Mili-Q高纯水，美国Millipore公司；农药标准物质溶液，纯度≥95%，北京百灵威公司。

1.2 样品处理方法

1.2.1 样品提取

速冻菜肉水饺经室温化冻后，称取500 g样品于粉碎机中绞碎。准确称取20 g搅拌均匀的样品于80 mL离心管中，加入40 mL 15∶85乙酸乙酯-乙腈混合溶剂，用均质器以15 000 r/min匀浆提取1 min后，加入5 g氯化钠，再次匀浆提取1 min，以4 200 r/min离心5 min，取离心上清液20 mL（相当于10 g的样品重量）至塑料压塞离心管中，加入6.0 g无水硫酸镁，旋涡混合后离心，取上清液，转移至50 mL离心管中，待净化。

1.2.2 样品净化

向离心管中加入0.5 g的PSA粉末、5.0 g无水硫酸镁、0.3 g的石墨化炭黑，旋涡混合后4 000 r/min离心5 min，取上清液，经无水硫酸镁柱滤到快速浓缩瓶中，在40℃真空下快速浓缩至近干。以1.0 mL的色谱纯正己烷定容，旋涡混合后4 000 r/min离心2 min，上清液经孔径0.45 μm的有机相微孔滤膜过滤，供气相色谱-串联质谱仪测定。

1.3 气相色谱-串联质谱条件

1.3.1 气相色谱条件

色谱柱：HP-5MS毛细管柱（30 m×0.25 mm ×0.25 μm）；色谱柱柱箱程序升温模式：80℃保持1 min，然后以每分钟25℃程序升温至170℃，再以每分钟6℃升温至300℃，保持10 min；载气：氦气，纯度≥99.999%；柱流速1.45 mL/min恒流模式；进样量：1 μL；进样口温度：250℃；进样方式：不分流进样。

1.3.2 质谱条件

碰撞气流速：氮气1.5mL/min，氦气2.5mL/min；离子源：电子轰击源，70 eV;离子源温度：230℃；扫描方式：正离子扫描；传输线温度：280℃；检测方式：MRM多反应监测；溶剂延迟：5.0 min。在多反应监测条件下，7种农药在串联质谱中的保留时间、定量离子对、定性离子对以及碰撞电压见表1。

表1 多反应监测模式下7种农药的保留时间、监测离子对和碰撞能量

2 结果与讨论

2.1 样品提取方法优化

动植物混合食品的特点是基质成分复杂，且样品中农药品种和数量较多，极性差异较大，因此对样品的前处理要求较高。本研究选择二氯甲烷、乙酸乙酯、乙腈和丙酮4种提取试剂，经添加回收试验发现，用二氯甲烷提取后样品的杂质较多，对测定结果干扰大；用丙酮提取的样品水分太多，增加了净化难度和步骤。乙酸乙酯和乙腈的添加回收率能满足要求，而乙腈提取的样品杂质更少，净化更为简便。在乙腈中添加少量乙酸乙酯可以提高极性较低农药的提取效率，高速匀浆可以使样品充分破碎并能与试剂充分混合，与通常的索氏提取方式相比，提取时间短，提取效率高。故选择乙酸乙酯-乙腈（15∶85）作为高速匀浆提取样品中残留农药的溶剂。

2.2 净化方法的选择

QuEChERS方法作为农药多残留分析样品前处理技术发展十分迅速，已经日益广泛应用于植物源和动物源性食品、农产品、医药、兽药、农药等检测领域。该技术解决了传统分析方法中存在的样品前处理时间长，有毒溶剂使用量大，共存物易干扰定量、定性等问题。由于动植物混合食品中脂肪酸含量较高，同时含有植物性的叶绿素、胡萝卜素和香辛料，本研究优化了动植物混合食品中农药残留的QuEChERS净化法，采用石墨化炭黑，能有效吸附各种食品、蔬菜和水果中的色素，对各种极性分析物具有更广泛的保留范围，且容易洗脱，可以改善多种农药残留的分析结果。本试验考察了加入不同量的石墨化炭黑（0.1 g、0.2 g、0.3 g、0.5 g）对回收率的影响，得到回收率在石墨化炭黑添加量为0.3 g时最高，因此确定加入0.3 g石墨化炭黑。同时，利用了PSA与NH2相似的吸附性能，可以有效地去除基质中的脂肪酸、有机酸和糖等杂质。试验还考察了不同PSA粉末的用量对回收率的影响，在分别添加0.1 g、0.2 g、0.3 g、0.5 g PSA粉末时，得到添加0.5 g PSA粉末时的回收率最高，因此选择添加0.5 gPSA粉末进行提取。

2.3 线性范围和检出限

按1.2.2试验步骤制取样品的空白基质提取液，加入7种农药的标准液，配制质量浓度分别为10 μg/L、20 μg/L、50 μg/L、100 μg/L、200 μg/L、500 μg/L的农药基质加标溶液，在1.3的分析条件下进行测定，分别得到7种农药在基质中的质谱图（图略）。以峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标作图，得到的7种农药的线回归方程、线性范围和线性相关系数，结果见表2。结果表明检测低限最低可以达到1.0 μg/kg。

表2 7种农药的线性回归方程、线性范围和相关系数

2.4 方法的回收率和精密度

在空白样品中加入0.10 mg/kg的7种农药混标，取5组平行样，按1.2.2中的试验步骤和1.3中分析条件，进行精密度和回收率测定，结果见表3。从表3可以看出，添加回收率为67.2%～118.6%，相对标准偏差（RSD）为5.2%～16.3%（n=5）。分析结果表明本方法有很好的重现性。

表3 7种农药混标的检测回收率和相对标准偏差

3 结论

本文通过对提取方式的选择和对QuEChERS净化法的优化，建立了用乙酸乙酯-乙腈（15∶85）混合溶剂高速匀浆提取样品中的残留农药，加入氯化钠盐析离心，添加0.3 g石墨化炭黑、0.5 g PSA粉净化，利用气相色谱-串联质谱法同时测定7种农药残留的检测方法。该方法操作简单快捷，灵敏度高，重现性好，回收率高，可用于动植物混合型食品中7种常见农药残留的检测。

［1］卢大胜，熊丽蓓，温忆敏，等.QuEChERS前处理方法联合GPC-GC／MS在测定蔬菜水果农药残留中的应用［J］.质谱学报，2011，32（4）：229-235.

［2］佟玲，李重九.含硫蔬菜中50种农药多残留的气相色谱-串联质谱检测技术研究［J］.分析测试学报，2008，27（9）：930-935.

［3］NASTASSIADES M，LEHOTAY S J，STAJNBAHER D. Quick，easy，cheap，effective，rugged，and safe（QuEChERS）approach for the determination of pesticide residues［G］. 18th Annual Waste Testing and Quality Assurance Symposium Proceedings，2002：231-241.

［4］CHEN Z L，ZHANG H，LIU B，et al．Determination of Herbicide Residues in Garlic by GC-MS［J］.J Chromataogr A，2007，66：887-891.

［5］王雯雯，刘畅.安捷伦7000三重串联四极杆气质联用仪一次进样同时检测大葱中170种农药残留［J］.环境化学，2011，30（10）：1 824-1 827.

［6］周长民，徐宜宏，张侃.气相色谱-三重四级杆串联质谱法测定圆葱中134种农药的多残留［J］.福建分析测试，2014，23（4）：5-15.

［7］刘满满，康澍，姚成.QuEChERS方法在农药多残留检测中的应用研究进展［J］.农药学学报，2013，15（1）：8-22.

Determination of multi-pesticide residues in mixed food derived from animal and vegetable by QuEChERS-Gas chromatography-tandem mass spectrometry*

FANGPing*YANChunrong
（Jiangsu food and drug supervision and inspection institute，Jiangsu Nanjing 210008，China）

建立了气相色谱串联质谱（GC-MS/MS）定量和定性检测动植物混合型食品中7种农药残留量的方法。样品中的待测农药组分经乙腈-乙酸乙酯混合溶剂（85∶15，v/v）提取，采用改进的QuEChERS法为净化方法，以外标法进行定量，以气相色谱-三重四级杆串联质谱（GC-MS/MS）多反应监测模式（MRM）检测。在动植物混合性食品基质中，以该方法检测的大部分农药的线性范围为0.01 μg/L～0.50 μg/L，检测低限最低可以达到1.0 μg/kg，添加回收率为67.2%～118.6%，相对标准偏差（RSD）为5.2%～16.3%（n=6）。该方法的准确性高、重复性好、操作简便，适用于动植物混合型食品中多种农药残留同时测定。

气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）；农药残留；QuEChERS；动植物混合型食品

A method was developed for the determination of 7 pesticide residues in mixed food derived from animal and vegetable by Gas chromatography-tandem mass spectrometry（GC-MS/MS）.The pesticides were extracted by mixed solvent of acetonitrile-ethyl acetate（15∶85,v/v）,and purified by modified QuEChERS.The pesticides were finally detected by GC-MS/MS with multiple reaction monitoring mode（MRM），external standard method for quantitative.In the range of 0.01 μg/L～0.5 μg/L，most of them showed good linear relationship.When spiked at 100 μg/kg, the average recovery rates of pesticides were 67.2%～118.6%with relative standard deviation(RSD)5.2%～16.3%.The method is accuracy and repeatable,with high sensitivity,simple operation,and suitable for simultaneous determination ofmultiple pesticide residues in mixed food.

gas chromatography-tandem mass spectrometry（GC-MS/MS）；pesticide residue；QuEChERS；mixed food derived from animal and vegetable

TS211.7

A

1673-6044（2016）04-0049-04

10.3969/j.issn.1673-6044.2016.04.013

江苏省重点研发计划项目（BE2015359）；江苏省质量技术监督局科技项目（KJ112505）。

**方萍，女，1978年出生，2005年毕业于中国人民解放军炮兵学院南京分院食品安全监管专业，工程师。

2016-09-30

2016-11-16