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献血者血液核酸检测的关键及控制点思考

2017-01-12黄五平

关键词:窗口期献血者核酸

黄五平,李 江

(四川省自贡市中心血站,四川 自贡 643000)

丙型肝炎病毒(HCV)、乙型肝炎病毒(HBV)、人类免疫缺陷性病毒(HIV),上述病原体主要经血液传播,故国外内安全输血领域为重要关注问题。输血与采血机构虽会对标本予以ELISA检测抗-HCV、HBsAg、抗-HIV标志物,从而最大程度上降低传播率,但因一般检测剂存在窗口期,对于部分患者血液存在隐匿性或潜在期状况,从而极易出现漏检状况发生。血液核酸检测(NAT)属于一种检测核酸的方式,可有效缩短窗口期遗漏的问题,该方式已被广大临床、输血采血机构应用。

1 血液检测前的控制关键点

1.1 血液检测前准备工作

献血者血液标本的质量问题,一是:与相关人员疏忽并违背操作流程有关;二是:与采血环境或采血器材有关。于检验工作中,需对检测前血液标本质量进行严格控制[1.2]。按相关的血液检查前制度要求对献血者做健康体检、HBsAg、健康征询等快速予以血液检查,初期筛查合格的献血者在前1天或者当天禁止饮酒或食高蛋白高脂饮食,若未严格遵循上述要求应暂时禁止献血。

1.2 血液标本的注意事项

采集血液后,护士应于采血管上予以明确标示,同时,认真核对标本标签、体检标签、血袋标签。若标本发生溶血,红细胞被破坏可释放大量的血红蛋白,其成分有铁血红素,可产生过氧化物酶物质,从而使ELISA呈假阳性结果,进而对抗Taq酶活性,PCR扩增效果显著降低,导致显示结果呈偏低现象[3.4]。血液属于一种特殊成分,由各种血液物质组构,血液需在规定正确条件下予以保存。如红细胞可在2~6℃冷藏下可储存1个月;血小板可于20~24℃环境下放置5天;新鲜冷冻血浆可于-18℃低温环境中可放置1年,超出血液相应期限和储存条件,血液会失去相应的用处。

1.3 使用无菌采血

真空无菌负压管压力过小、过大或不干燥、不洁净,均可影响血液质量;当压力过小,可影响血液采集的量;当抗凝剂过少易导致标本发生凝血;分离胶式的真空无菌负压管,其分离胶较不稳定,故于夏季高温中,可使血液核酸混样;当真空式负压管质量较差时,在血液离心时,可能会导致采血管破裂。

2 血液检测中与检测后的控制

2.1 保持环境的清洁

核酸检测对周围环境敏感度极高,微小的污染就可导致检验失败,从而浪费血液,故需加强血液标本实验环境的控制。保持检测环境的清洁,于各个实验室的用品等备用工具,包括工作衣、一次性的帽子、口罩、鞋套、或防护服、无粉橡胶手套、鞋、等,应有明确标识,不可混用;配备相应防护器材,防止于检测流程中细菌病毒感染。引起感染主要因素有其它污染、标本污染、设备污染,故需严格控制出入人员,减少实验区内走动次数、降低交叉污染发生率,检测完成后需及时对实验区以有效地清洁消毒和去污。

2.2 完善血液检测制度及控制工作

确保检测工作过程的统一性,标本应符合检测程序技术要求,在试剂使用时需严格按说明书要求进行,从而保证信息管理设备和系统运转通畅。进行室内质控时,必须确保试剂贴有内标,并保证试剂的放置符合要求,避免感染。同时,应用阴性对照,从而判定核酸实验区有无污染;需保证每个检测的批次有阳性对照,进而监测提取核酸的有效性;且应积极参加卫生委组织实验室质量的相关活动,以评判实验的安全性与规范性。在完成核酸标本的采集后,必须在4个小时之内进行离心处理,并于72小时之内完成检测。

2.3 检测后控制工作

采血护士需负责清点并收集血液标本,同时做好有关记录,将采血管管口向上放置在试管架上的专用容器中。在运输时,应减少标本振动,运输后,应及时与检验科有关人员进行当面交接,双方核对内容包括标识、留样量、标本数量是否保持清晰及规范完整,双方核对无误后应在交接单中签字,若发现有疑问标本,需查找原因、加强沟通,防止出现问题。

3 讨 论

国内研究表明NAT技术,用于献血者中血液筛查可显著缩短病毒窗口期,并有效提高输血严格性和安全性,为此,为提高输血及血液安全,NAT技术用于献血者血液检查中是可行和必要的。

[1] 夏云峰.张家港地区献血者血液核酸检测结果分析[J] .国际检验医学杂志,2013,34(16):2174-2175.

[2] 吴丹霄,吴亚玲,吕杭军,等.核酸检测在献血筛查中的应用[J] .浙江预防医学,2015,15(5):501-503.

[3] 王 霞,许晓绚,吴桂丹,等.深圳地区2003~2014年献血者HIV血液筛查结果及其窗口期确认[J] .国际检验医学杂志,2016,20(3):299-302.

[4] 梁启忠,程玉根.核酸检测技术在献血者血液筛查中的应用[J] .国际检验医学杂志,2015,28(22):3265-3267,3270.

[5] 任艳丽.核酸检测在献血者血液筛查中的应用研究[J] .山西医药杂志,2017,46(8):968-969.

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